赵勇
- 作品数:151 被引量:650H指数:14
- 供职机构:中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 复发性流产保胎方案的研究
- 目的 通过对复发性流产患者排卵后进行雌激素、孕激素、促黄体生成素的测定,妊娠后对应不同的激素水平进行调整进行保胎治疗,探讨明确一种安全、高效、实用的临床保胎方案.方法 选取均有孕酮保胎失败史,部分有免疫治疗失败史的复发性...
- 商微王蔼明赵勇李敏闫玲
- 评估无血清培养子宫内膜间充质干细胞的可行性被引量:2
- 2015年
- 目的使用无血清培养基体外分离扩增子宫内膜间充质干细胞,研究其生物学特性。方法比较在无血清培养基中和含10%胎牛血清培养基中子宫内膜间充质干细胞细胞形态细胞表型、增殖能力、细胞活率和分化能力等生物学特性。结果无血清培养基和有血清培养基培养的子宫内膜间充质干细胞形态相似,但是前者呈明显的漩涡状生长,更加细长,立体感更强;无血清和有血清培养的子宫内膜间充质干细胞表面标记物均呈阳性;无血清培养的子宫内膜间充质干细胞细胞活率更高、细胞增殖能力更强。结论无血清培养基能够在体外扩增子宫内膜间充质干细胞,并使其生物学特性(细胞增殖,细胞活率)优于胎牛血清培养的子宫内膜间充质干细胞,且分化能力无改变,可以取代胎牛血清用于细胞治疗,避免有血清培养的干细胞治疗引起的人畜共患病及免疫原性反应。
- 康康王蔼明尹善德赵勇王明凯黄绍敏
- 关键词:细胞增殖细胞周期分化
- 近红外荧光染料对胃癌原位移植模型的靶向识别
- 目的:研究靶向近红外荧光(NIRF)染料在胃癌原位移植模型活体成像中的应用效果.
方法:将标记荧光酶素的人胃癌细胞系原位移植裸鼠建立肿瘤模型,同时诱发制备胃溃疡模型;对上述模型分别采用生物发光成像和NIRF成像...
- 赵勇张彩勤赵宁宁谭邓旭赵亚张海师长宏
- 关键词:胃癌细胞原位移植模型活体成像
- 复苏促进因子结合蛋白A的原核表达及对耻垢分枝杆菌的促生长作用被引量:2
- 2010年
- 目的:在大肠埃希氏菌中表达结核分枝杆菌复苏促进因子结合蛋白A(resuscitation-promoting factor-interacting protein A,RipA),观察该蛋白对耻垢分枝杆菌的促生长作用。方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv的DNA中扩增出编码RipA蛋白的Rv1477基因,测序正确后克隆入原核表达载体pProEx HTa,构建重组表达质粒pProEx HTa-RipA。以重组质粒转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性重组菌株,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside IPTG)诱导RipA表达,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化。将纯化的RipA蛋白加入到耻垢分枝杆菌中,分光光度法测定细菌的A600,观察RipA蛋白的促生长作用。结果:成功扩增了Rv1477基因,并克隆于表达载体pProEx HTa中,经酶切鉴定获得阳性克隆。经诱导在大肠杆菌中表达出相对分子量为52kDa的目的蛋白,Western-blot结果显示该蛋白与6×His单抗有特异性的反应条带。采用Ni+-NTA柱可获得纯化的目的蛋白。100pM的RipA蛋白可显著促进耻垢分枝杆菌休眠菌的复苏和生长。结论:RipA蛋白在大肠杆菌中成功表达,并能有效促进耻垢分枝杆菌的生长。
- 师长宏赵勇毛峰峰张海白冰江鹰
- 关键词:结核分枝杆菌休眠
- 粒细胞集落刺激因子与子宫内膜修复的研究进展被引量:7
- 2015年
- 薄型子宫内膜(thin endometrium)在人类辅助生殖技术中越来越受到人们的重视。薄型内膜是指子宫内膜厚度不足以能够获得妊娠,即低于胚胎着床的阈厚度。子宫内膜的修复机制涉及女性体内多方面因素,除众所周知的下丘脑-腺垂体-卵巢轴的协同作用之外,细胞因子也在这一过程中通过自分泌或旁分泌起到关键作用,集落刺激因子(CSFs)就是其中之一。近年来的研究发现粒细胞集落刺激因子(G-CSFs)在子宫内膜增殖过程中起着一定程度上的正向促进作用。
- 程龙凤王蔼明赵勇
- 关键词:粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子受体子宫内膜修复
- RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠杂交群体的建立
- 2016年
- 目的建立RAG2/IL2RG双基因缺陷的CRG小鼠杂交群体。方法将RAG2基因缺陷小鼠与IL2RG基因缺陷小鼠分别进行繁殖,选取RAG2基因缺陷雄鼠RAG2(-/-)与IL2RG基因缺陷雌鼠IL2RG(-/-)进行配对,培育杂交后代,通过PCR扩增基因组RAG2和IL2RG基因进行鉴定;应用流式细胞仪分析检测RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠外周血T细胞(CD3+)、B细胞(CD19+)和NK细胞(CD49b+)含量;并测定8—12周龄RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠血液生理生化及主要脏器重量指标。结果成功繁育RAG2基因缺陷小鼠和IL2RG基因缺陷小鼠,筛选获得稳定的RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠并成功保种和扩群;该双基因缺陷小鼠外周血淋巴细胞中T细胞、B细胞,NK细胞比例显著降低(P<0.05);与相同周龄野生型C57BL/6相比9项血清生化指标无明显变化(P>0.05);18项血液生理指标中红细胞(RBC)和血红蛋白(HGB)含量显著降低(P<0.05);白细胞(WBC)、淋巴细胞数(LYMPH)、淋巴细胞比率(LYM)、单核细胞、中性细胞数(NEUT)降低极显著(P<0.01);脾脏重量显著均低于野生型C57BL/6小鼠(P<0.05);人肝肿瘤传代细胞移植于RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠后,肿瘤移植成功率和生长速率均明显高于亲本单基因缺陷小鼠(P<0.05),成功获得了临床肝癌病人肿瘤组织的异种移植模型。结论成功构建筛选出RAG2/IL2RG双基因缺陷小鼠杂交群体。
- 赵亚吴朋朋张彩勤谭邓旭赵勇白冰张海师长宏
- 关键词:免疫缺陷小鼠免疫细胞肿瘤移植
- 促甲状腺激素释放激素受体-2在大鼠生后睾丸不同发育阶段的表达和定位被引量:1
- 2005年
- 目的研究促甲状腺激素释放激素受体-2(TRH-R2)在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达,探讨其在生殖发育调节中的作用。方法应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中TRH-R2的表达和定位,并结合图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析,观察其在发育过程中的变化。结果免疫印迹杂交发现TRH-R2蛋白表达于出生后15d以后各阶段的大鼠睾丸;而免疫组织化学在第8d以后的各个发育阶段均检测到TRH-R2的表达,TRH-R2定位于大鼠睾丸的间质细胞,TRH-R2免疫反应阳性物位于细胞膜和细胞质内,细胞核为阴性;图像分析结果显示随着大鼠睾丸的发育,TRH-R2表达量逐渐增多,35d达到最大值,此后维持稳定水平,表达量在35d同其他阶段之间具有统计学差异(P<0·01)。结论TRH-R2在大鼠睾丸发育过程中均有表达,定位于睾丸的间质细胞,其表达量随着增龄变化而变化,即同发育过程相关。
- 赵勇张远强张金山刘新平许若军
- 关键词:免疫组织化学睾丸
- 利用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠被引量:10
- 2016年
- 目的应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。方法针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA,sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因组DNA进行测序以鉴定基因型,同时取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器研磨后提取总RNA,通过real-time PCR分析miRNA-29b1在这些脏器中的表达。结果设计了20 bp的miRNA-29b1sgRNA并与Cas9一起进行了体外转录,显微注射小鼠受精卵细胞后获得miRNA-29b1基因突变小鼠。测序结果表明突变小鼠有两种基因型,一种为10 bp的缺失突变;另一种为22 bp的缺失突变,同时伴有3 bp的插入突变。与野生型小鼠相比,基因突变小鼠心、肝、脾、肺、肾等组织中miRNA-29b1表达量下降明显。结论应用CRISPR/Cas9技术成功构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。
- 赵勇师长宏赵亚辛智倩刘佩娟张彩勤白冰白杰英王华张海
- 关键词:基因敲除小鼠
- 温阳生精汤对肾阳虚不育大鼠睾丸Smads基因表达的调控被引量:14
- 2006年
- 目的探讨转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族的细胞内信号内转导分子Smads(mother against dpp)基因腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸中表达的定位和分布及温阳生精汤对Smads基因表达的调控作用。方法将实验大鼠随机分为3组,分别为正常对照组、肾阳虚不育组和温阳生精汤组。应用免疫组织化学SABC法和半定量RT-PCR法检测实验大鼠睾丸中Smad1、Smad2、Smad4的定位和分布,并通过图像分析系统进行统计学分析;应用放射免疫法测定血清中睾酮(testosteone,T)、促黄体激素(luteinizing hormone,LH)和促卵泡激素(follicle-sti mulating hormone,FSH)含量;同时测定大鼠体重、睾丸和附睾重量及精子数量。结果Smad1和Smad2在实验大鼠睾丸的各级生精细胞中均有表达,其免疫反应阳性物质位于细胞质内,Smad2在支持细胞的胞质内亦可见阳性表达,两者在间质细胞呈阴性反应;Smad4在实验大鼠睾丸间质细胞的胞质内有表达,生精细胞及支持细胞呈阴性反应。肾阳虚不育组大鼠睾丸中Smad1的表达明显低于正常对照组(P<0.05),Smad2和Smad4的表达明显强于正常对照组(P<0.05)。温阳生精汤能明显增加Smad1在肾阳虚不育大鼠睾丸中的表达(P<0.05),降低Smad2和Smad4的表达(P<0.05)。与正常对照组比较,肾阳虚不育组大鼠体重明显下降,附睾的精子数量明显减少;血清中T显著降低,FSH、LH增高(P<0.05);而各实验组大鼠睾丸及附睾重量无明显变化(P>0.05);温阳生精汤组大鼠体重和精子数量较肾阳虚不育组显著增加;血清T水平增加,FSH、LH水平降低(P<0.05)。结论温阳生精汤不仅能够通过提高肾阳虚不育大鼠血清中T水平,降低FSH和LH水平,增加大鼠的精子数量;而且可以通过调控大鼠睾丸中TGF-β超家族的细胞内信号转导分子Smads基因的表达水平,直接或间接地影响T、FSH和LH水平,促进精子生成,达到治疗男性不育的目的。
- 马静王宗仁卢兹凡李伟赵勇朱华萍张远强
- 关键词:SMADS肾阳虚不育睾丸
- 基因工程小鼠制备和保种、育种技术研究被引量:2
- 2016年
- 本文从小鼠的超数排卵、采集胚胎、原核受精卵显微注射、胚胎移植、基因型鉴定等多个环节,详细阐述制备基因工程小鼠的技术操作要领;通过实施辅助生殖技术IVF(体外受精)、精子和胚胎的冷冻、复苏技术实现了基因工程小鼠的保种和育种,涉及相关技术的要点改进和操作体会,成功建成了基因工程小鼠的制备和保种、育种平台,提供了良好的技术服务。
- 张彩勤赵亚谭邓旭张海赵勇白冰刘佩娟辛智倩师长宏
- 关键词:保种育种