徐杰
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅医学科技发展基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ADAMl0抑制剂GI254023X对Jurkat细胞的增殖和凋亡作用及机制研究
- 马莎徐杰王雪吴庆运曹江李振宇曾令宇陈翀徐开林
- GST-NRP-1融合蛋白的原核表达及纯化被引量：1
- 2015年
- 目的:构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,在大肠埃希菌(E.coli)中诱导其表达,并进行包涵体的复性及纯化。方法:利用RT-PCR扩增人NRP-1基因,将其克隆至p CR-blunt载体,酶切制备NRP-1基因片段,插入表达载体p GEX-4T-1,生成p GEX-4T-1-NRP-1,转入BL21感受态细胞以IPTG诱导其蛋白的表达。裂解细菌后行Western blot检测GST-NRP-1融合蛋白的表达,表达的包涵体经复性后用Glutathione Sepharose 4B纯化。结果:RT-PCR扩增出NRP-1基因并连入p CR-blunt载体;经亚克隆构建了融合蛋白表达载体p GEX-4T-1-NRP-1。转入BL21感受态细胞后考马斯亮蓝染色检测到GST-NRP-1融合蛋白的表达,经包涵体复性后得到纯化的融合蛋白。结论:成功构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,为进一步研究NRP-1的结构、功能及其与之相互作用的蛋白奠定了基础。
- 韩正祥张梦瑾徐杰王红梅杜秀平陈翀徐开林
- 关键词：NRP-1原核表达融合蛋白纯化
- BRD4抑制剂GSK525762A对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响及可能机制
- 目的探究BRD4抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能的机制。方法用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4;11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat...
- 陈翀王缦徐杰王力宋旭光张焕新曾令宇徐开林
- 文献传递
- GSK525762A对KU812细胞增殖与凋亡的影响及其初步作用机制
- 目的本研究旨在观察4型含Bromo结构域蛋白(Bromodomain-containing protein 4,BRD4)抑制剂GSK525762A对KU812增殖及凋亡的影响。方法用GSK525762A 100、250...
- 陈翀徐杰王力宋旭光吴庆运赵恺曾令宇韩正祥徐开林
- 文献传递
- GSK525762A对KU812细胞增殖与凋亡的影响及其初步作用机制
- 目的本研究旨在观察4型含Bromo结构域蛋白（Bromodomain-containing protein 4,BRD4）抑制剂GSK525762A对KU812增殖及凋亡的影响。方法用GSK525762A 100、250...
- 陈翀徐杰王力宋旭光吴庆运赵恺曾令宇韩正祥徐开林
- 人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231中肿瘤干细胞亚群相关基因表达差异的初步研究被引量：1
- 2015年
- 目的 在无血清培养液悬浮培养条件下筛选人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231的干细胞相关亚群,并初步探讨其相关基因的表达差异.方法 采用有血清贴壁和无血清悬浮培养方法,扩增出贴壁细胞和悬浮微球体细胞两种肿瘤细胞.采用流式细胞术检测MCF-7、MDA-MB-231贴壁及悬浮微球体细胞中CD44＋ CD24-、CD133＋表型细胞比例的变化.反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测两组贴壁及悬浮微球体细胞中CD44、CD24、CD133、ALDH3A1、ABCG2、CXCR4基因的表达变化.结果 MCF-7微球体细胞的CD44＋ CD24-/ low细胞比例高于其贴壁培养细胞（P＜0.05）;CD133＋细胞比例同其贴壁培养细胞差异无统计学意义（P＞0.05）.MDA-MB-231微球体细胞的CD44＋ CD24-/low细胞比例低于其贴壁培养细胞（P＜0.05）;CD133＋细胞比例高于其贴壁培养细胞（P＜0.05）.MCF-7微球体细胞中CD44、ABCG2的表达较其贴壁细胞上调（均P＜0.05）,CD24、CD133、ALDH3A1、CXCR4表达与其贴壁细胞相比,差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）.MDA-MB-231微球体细胞中CD24、CD133、ABCG2、ALDH3A1、CXCR4表达较其贴壁细胞上调（均P＜0.05）,CD44表达下调（P＜0.05）.MCF-7和MDA-MB-231微球体细胞中CD44、CD24、CD133、ALDH3A1表达差异有统计学意义（均P＜ 0.05）.结论 乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系微球体中乳腺癌干细胞相关基因的表达存在差异,提示不同分子亚型乳腺癌干细胞的来源可能不同.
- 韩正祥张洁徐杰杜秀平
- 关键词：肿瘤干细胞细胞系微球体
- GSK525762A对KU812细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在观察4型含Bromo结构域蛋白(bromodomain-containing protein 4,BRD4)抑制剂GSK52-5762A对KU812细胞增殖及凋亡的影响及其机制。用GSK525762A 100、250、500、1000、2500和5000 nmol/L处理KU812细胞48和72 h,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;GSK525762A 1.0、2.5和5.0μmol/L处理72 h,利用流式细胞术检测其对KU812细胞的凋亡诱导作用。将KU812细胞经DMSO和2.5μmol/L的GSK525762A处理后,利用实时荧光定量PCR观察c-Myc、BCL-2、CDK6、BCL-xL、BAK和BAX基因的mRNA表达水平。结果表明,GSK525762A能显著抑制KU812细胞的增殖,且抑制作用存在量-效关系(r=0.970)和时-效关系(r=0.956);GSK525762A能促进KU812细胞的凋亡;GSK525762A处理后促增殖基因c-Myc、CDK6和抗凋亡基因BCL-2和BCL-xL的mRNA较对照组降低,而促凋亡基因BAK和BAX的转录水平较对照组升高。结论:GSK525762A显著抑制KU812细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与下调c-Myc、BCL-2、CDK6、BCL-xL的表达和上调BAK、BAX的表达有关。
- 徐杰王力宋旭光吴庆运赵恺曾令宇韩正祥陈翀徐开林
- 沙利度胺改善恶性肿瘤患者围化疗期恶心、呕吐的临床研究被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨沙利度胺治疗恶性肿瘤患者围化疗期恶心、呕吐的临床疗效及不良反应.方法 70例患者随机分为治疗组（38例）和对照组（32例）.治疗组于化疗前1d晚睡前开始顿服沙利度胺,起始剂量第1周100 mg/d,如能耐受不良反应,每晚增加50 mg,直至按剂量200 mg/d维持,如不能耐受加量者,则维持原剂量,服用至围化疗期结束;同时化疗前30 min静脉注射托烷司琼2 mg.对照组于化疗前30min静脉注射托烷司琼2mg,评价两组的止吐效果及不良反应.结果 治疗组与对照组的呕吐控制有效率分别为89.5％（34/38）、68.8％（22/32）,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组的不良反应类似,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 沙利度胺联合托烷司琼可有效改善恶性肿瘤患者围化疗期的呕吐,不良反应可耐受,进一步提高了沙利度胺临床抗肿瘤治疗的适应证.
- 韩正祥孙旋徐杰李艳杜秀平
- 关键词：肿瘤沙利度胺围化疗期恶心呕吐
- 溴结构域蛋白4抑制剂GSK525762A对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响及可能机制被引量：4
- 2014年
- 目的 探究溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能机制.方法 用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4; 11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞作对照.采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;用Annexin Ⅴ/7-AAD标记,流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测抗凋亡基因c-myc、Bcl-2、CDK6和促凋亡基因Bad、Bak、Bax的转录水平;Western blot检测Bcl-2及Bak蛋白的表达.结果 不同浓度GSK525762A对RS4; 11细胞增殖均有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,作用48、72 h其半数抑制率分别为6.174和1.996 μmol/L.与DMSO处理组比较,GSK525762A处理后RS4; 11细胞c-myc、Bcl-2、CDK6mRNA转录水平降低,而Bad、Bak、Bax mRNA转录水平升高,且Bcl-2蛋白表达水平下调,Bak蛋白表达水平上调.而GSK525762A对Jurkat细胞的增殖抑制作用并不明显.结论 GSK525762A可抑制RS4; 11细胞的增殖,并促进其凋亡;该作用可能通过下调Bcl-2表达,诱导白血病细胞凋亡而实现的.
- 王缦陈翀徐杰王力宋旭光张焕新曾令宇徐开林
- 关键词：RS4细胞增殖
- ADAM10抑制剂GI254023X对Jurkat细胞的增殖和凋亡作用及机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨ADAM10抑制剂GI254023X对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:选择不同浓度的GI254023X处理Jurkat细胞,采用CCK-8法检测并绘制增殖抑制曲线,Annexin V/7-AAD双染检测细胞存活与凋亡,Western blot检测Notch1蛋白的切割,定量PCR检测抑凋亡基因BCL-2、MCL-1、BCL-xl及Notch1靶基因Hes-1的转录变化。结果:GI254023X能明显抑制Jurkat细胞增殖,且呈量-效关系,但无明确的时-效关系。GI254023X能够诱导Jurkat细胞凋亡。Western blot检测结果显示,Cleaved Notch1在GI254023X作用后水平下降,而Notch1水平升高;GI254023X能够使抑凋亡基因MCL-1和Hes-1表达下调,对BCL-2和BCL-xl转录无明显影响。结论:GI254023X能抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,其机制主要与抑制Notch1活化和下调MCL-1转录有关。
- 马莎徐杰王雪吴庆运曹江李振宇曾令宇陈翀徐开林
- 关键词：急性T淋巴细胞白血病JURKAT细胞
