梁晓萍
- 作品数：2 被引量：17H指数：1
- 供职机构：广州医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部留学回国人员科研启动基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 睾丸性不育动物模型的建立被引量：16
- 2007年
- 目的:探讨制作睾丸性不育动物模型的方法。方法:①X-射线局部照射:取8～10周龄的BALB/c雄鼠70只,分实验组1、2、3、4、5、6和对照组各10只。实验组1、2、3、4、5、6分别用1000、1200、1400、1600、1800、2000cGy6种不同的剂量照射睾丸局部10min;对照组不做任何处理。做受孕试验。②环磷酰胺腹腔注射:取4～5周龄的雄鼠40只,分实验组1、2、3和对照组各10只。实验组分别以30、5070mg/kg体重剂量的环磷酰胺腹腔注射,每周2次,连续注射5周;对照组腹腔注射生理盐水。做受孕试验。③达菲林腹腔注射:取8～10周龄的雄鼠20只,分实验组和对照组各10只。实验组腹腔注射0.375mg/ml达菲林0.4m,l对照组腹腔注射生理盐水0.4ml。做受孕试验。④通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)、苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化等病理学检查鉴定。未使雌鼠受孕的雄性小鼠定为睾丸性不育,共30只。结果:①X-射线局部照射:实验组1、2的雄鼠分别于X-射线照射后10、15d使雌鼠受孕;实验组3、4的雄鼠,经观察3个月也未能使雌鼠受孕;实验组5、6的雄鼠,于X-射线照射后第5d和第2d死亡;对照组雄鼠皆于3d内使雌鼠受孕。②环磷酰胺腹腔注射:实验组1雄鼠体重增加7g左右,停药后9～14d恢复生育能力,使雌鼠受孕;实验组2雄鼠体重增加4g左右,停药后观察3个月未使雌鼠受孕;实验组3雄鼠体重不增,呈消瘦状,分别于用药第3、4、5周相继死亡;对照组雄鼠皆于3d内使雌鼠受孕。③达菲林腹腔注射:实验组雄鼠于停药后3周左右使雌鼠受孕;对照组雄鼠皆于3d内使雌鼠受孕。④TUNEL结果:对照组睾丸组织偶见凋亡细胞,占(0.71±0.12)%;睾丸性不育组睾丸组织凋亡细胞数量明显增加,占(10.36±1.48)%,两者比较差异有显著性(P<0.05)。HE染色:对照组睾丸组织正常,生精小管呈饱满椭圆形,各级生精细胞排列有序,内含大量精子�
- 刘风华杨冬梓王沂峰梁晓萍彭文明曹长安陈系古郭忠敏
- 关键词：动物模型
- 小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的研究小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定方法，为干细胞替代疗法或构建人工阴道黏膜治疗先天性无阴道提供依据。方法取7～8周龄小鼠的阴道黏膜上皮，用酶消化培养法原代培养阴道黏膜干细胞（VMSC）。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代分离和富集VMSC。显微镜下动态观察细胞生长特性；苏木精-伊红（HE）染色；透射电镜观察细胞超微结构；荧光显微镜下观察标记滞留细胞（LRC）。免疫组化sP法检测细胞表面标记物（β1整合素、细胞角蛋白19）进行鉴定。结果用酶消化培养法得到原代VMSC，用Ⅳ型胶原黏附法分离到较纯的VMSC，经连续传代，富集到大量VMSC。动态观察发现细胞呈克隆性生长的干细胞特性。HE染色细胞呈椭圆形或梭形、核质比例大等幼稚细胞特征。透射电镜发现细胞呈未成熟细胞特征。荧光显微镜下LRC的核呈亮黄色，标记滞留时间长。免疫组化SP法检测β1整合素和细胞角蛋白19呈阳性表达。结论用酶消化培养法可原代培养VMSC。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代可分离、富集VMSC。免疫组化SP法检测细胞表面标记物可鉴定VMSC。
- 刘风华王沂峰梁晓萍彭文明曹长安周峰
- 关键词：阴道黏膜干细胞细胞培养
