沈忠英
- 作品数：129 被引量：749H指数：15
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程理学更多>>
- 用人食管鳞状细胞癌移植建立裸小鼠移植瘤模型
- 1995年
- 将６例人食管癌的手术切除组织移植于ＮＩＨ裸小鼠皮下，其中３例移植成功并能传代，建成３林人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤，其病理组织学特点均与原人体肿瘤相似，染色体分析显示人类恶性肿瘤特征，电镜下形态属鳞状细胞癌，移植瘤中证实有。Ａｌｕ序列存在，表明它们来源于人类组织。３年多来３株移植瘤生长稳定，传代成功率达１００％。
- 许锦阶沈健游绍进沈忠英
- 关键词：肿瘤移植食管鳞状细胞癌移植瘤动物模型
- 白细胞介素-1家族在骨关节炎软骨损伤和修复中的作用被引量：10
- 2004年
- 王新家沈忠英孔抗美
- 关键词：白细胞介素-1骨关节炎软骨损伤OA致炎作用免疫组织学
- 人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导胎儿食管永生化上皮的生物学特性被引量：11
- 1999年
- 目的 ＳＨＥＥ细胞系是经人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８ 型Ｅ６Ｅ７ 基因诱导的永生化上皮细胞株，已传代超过５０ 代。研究胎儿食管上皮永生化的细胞株ＳＨＥＥ生物学特性，包括增殖，分化和调亡。方法 细胞于１９９ 培养基培养，用光镜、电镜和荧光显微镜研究其生长率、形态和染色体分析；用流式细胞仪研究其细胞增殖动力学；用免疫组织化学方法研究Ｋｉ６７ 和角蛋白和用末端转移酶标记（ＴＵＮＥＬ） 凋亡细胞。结果 细胞培养呈单层，锚定依赖和接触抑制生长。细胞生长曲线，增殖期３ ～８天，平顶期９ ～１０ 天，衰亡期１０ 天以后。增殖指数（ＰＩｘ）３４－０％ ，分裂指数（ＭＩ）２－４７％ （１－２０％ ～４－８０％ ） ，凋亡指数（ＡＩ）１－３０％ ～６－９０ ％ ，核染色体众数４６ 条为主（４４ ～５４ 条） 和细胞周期ＤＮＡ 呈２ 倍体核型分布。电镜可见胞浆有张力原纤维，角蛋白免疫组织化学阳性证实鳞状上皮有分化特征。细胞凋亡可发生在增殖期，特别在衰亡期增多。结论 从生物学行为看来，ＳＨＥＥ细胞株接近于其来源细胞，胎儿食管上皮基底层，保存其增殖能力和分化的潜力。细胞死亡（包括细胞凋亡）是细胞群体扩增调节重要的因素。
- 沈忠英沈健蔡维佳岑山曾毅
- 关键词：食管上皮生物学特性E6E7
- PCR和原位杂交检测食管癌组织中人乳头状瘤病毒被引量：6
- 1999年
- 目的：探索汕头高发区食管癌的发病是否与HPV感染有关。方法：用L1区共用引物PCR和HPV18DNA探针原位杂交技术对55例新鲜食管瘤标本进行检测。结果：PCR和原位杂交的HPV阳性检出率分别为92．72％和81．80%，癌旁粘膜HPV检出率高于癌组织（P＜0．05）。而且原位杂交提示不同病变杂交信号分布特征不同：癌旁“正常”和单纯增生上皮呈层状分布，原位癌层状分布特征消失，阳性细胞弥散全层，浸润癌呈区域性阳性。结论：HPV感染可能是食管癌的病因之一。
- 吕丽春沈忠英游绍进沈健蔡唯佳
- 关键词：食管肿瘤HPV聚合酶链反应原位杂交
- 有机硒对恶性转化人胚食管上皮永生化细胞系作用的实验研究被引量：5
- 2003年
- 黄海花苏敏田东萍沈忠英郑志超
- 关键词：有机硒食管癌亚硒酸钠
- 食管上皮细胞永生化及恶变中染色体异常和HPV18E6、HPV18E7表达
- 2002年
- [目的 ]研究HPV18DNA转染的人胚食管上皮细胞永生化及其恶性转化过程中的染色体异常和HPV18E6、HPV18E7蛋白表达情况。 [方法 ]体外培养HPV18DNA转染人胚食管上皮细胞基础上所建立的有恶变倾向的永生化细胞株H5E973 (其 61代部分细胞已恶性转化 )和瘤细胞株LTPA ,制备中期染色体并进行G显带核型分析。免疫组化检测它们的HPV18E6、HPV18E7蛋白表达情况。 [结果 ]①两株细胞均以亚三倍体为主 ,且伴随传代次数增加 ,H5E973细胞众数右移。 12、14、17、2 0号染色体的增加和Y染色体的丢失常见。②两株细胞均存在复杂的染色体结构异常 ,主要涉及 1、4、5、6、7、8、9、10、13、14、19、2 1号染色体。③H5E973第 2 0、第 85代和LTPA第 74代细胞虽均有HPV18E6、HPV18E7蛋白表达 ,但以恶性转化的H5E973第 85代表达最强。 [结论 ]①食管上皮细胞由永生化向恶性转化过程中 ,染色体极其不稳定 ,表现出复杂的数目和结构异常。②食管上皮细胞由永生化向恶性转化时 ,HPV18E6。
- 李晓昀苏敏吴贤英郑燕銮沈忠英
- 关键词：染色体异常永生化恶性转化
- 腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法 将人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中 ,通过包装的重组病毒感染 ,将E6E7基因导入并整合到永生 2 93细胞的基因组中。结果 本研究成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒并感染了永生 2 93细胞 ,PCR Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞 2 93TL中确有表达 ,转化细胞 2 93TC和 2 93TL具有明显的转化表型 ,和亲本 2 93细胞相比 ,生长速度快 ,接触抑制消失 ,集落形成率提高 2 0倍 ,且集落明显增大 ,形成时间短。结论 成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒 ,HPV18E6E7基因可引起永生化人上皮细胞 2 93的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞 。
- 岑山滕智平张月沈忠英许锦阶杜宾曾毅
- 关键词：人乳头状瘤病毒依赖病毒
- 乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同在裸鼠体内诱发人胎肝细胞癌变的研究被引量：2
- 2001年
- 为了研究乙型肝炎 (乙肝 )病毒 (HBV)和黄曲霉素 (AFB1)在肝癌发生过程中的作用 ,用HBV感染的人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下 ,以后每周注射AFB1,能诱发裸鼠成瘤。实验分为 4组 :A组为HBV +AFB1组 ,即用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,同时注射ABF1;B组为HBV+ 组 ,用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,不注射AFB1;C组为AFB1+ 组 ,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,注射AFB1;D组为对照组 ,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,也不注射AFB1。结果 :A组成瘤率为 2 7 3% (6 / 2 2 ) ,B组 0 % ,C组 13 3%(2 / 15 ) ,D组 0 % ,所有肿瘤病理诊断均为肝细胞癌。用EMA单抗检测 ,证实为人来源细胞。PCR和DNA狭缝印迹显示 :HBVX和HBVS基因阳性 ,证明HBV基因已到瘤细胞中。实验首次用人乙肝病毒协同AFB1在裸鼠体内诱发成功人肝细胞癌 ,证明了HBV协同AFB1在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时 。
- 蓝祥英郭秀婵周玲张永利沈忠英曾毅
- 关键词：乙型肝炎病毒黄曲霉素恶性转化癌变
- 乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同作用诱发人肝细胞癌细胞株的建立被引量：2
- 2001年
- 为了研究人乙型肝炎病毒 (HBV)和黄曲霉素 (AFB1)在肝癌发生过程中的作用 ,我们用HBV感染的人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下 ,以后每周皮下注射AFB1,在裸鼠体内成功地诱发了人肝细胞癌。选 3只裸鼠所形成的肿瘤组织 ,分别再接种裸鼠传代。在裸鼠体内传至 5代后 ,将瘤组织在体外培养、传代 ,建立了 3个肝癌细胞株 ,分别为CBH - 1a、CBH - 1b和CBH - 2。对 3个细胞株进行生物学特性分析发现 ,细胞生长迅速 ,接触抑制消失 ,细胞增殖核计数Ki6 7阳性细胞占 38 2 %。用EMA单抗检测证实为人来源细胞。核酸原位杂交显示 ,细胞中HBV-X和HBV-S基因阳性 ,PCR可扩增出X 基因 ,证明HBV基因已到瘤细胞中。 3个细胞株细胞再接种裸鼠皮下 ,可再生成肿瘤。此实验证明了HBV协同AFB1在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时 。
- 郭秀婵蓝祥英周玲滕智平张永利陈炯玉沈忠英曾毅
- 关键词：乙型肝炎病毒黄曲霉素肝癌细胞株癌变
- 人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化被引量：8
- 2001年
- 研究中期永生化食管上皮细胞的表型、细胞遗传学和部份基因的改变 ,以阐明癌前病变的特征。SHEE是该院用人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮 ,传至 6 1代已开始有少量细胞恶性转化。对永生化中期 31代培养细胞用相差显微镜检查细胞形态改变和细胞生长状态 (细胞接触抑制和锚定生长 ) ;流式细胞仪检测细胞周期 ;做染色体众数分析 ;多重PCR检查c-myc、p5 3、bcl- 2和ras等基因。免疫组化检查细胞角蛋白和鬼臼毒素荧光标记检查肌动蛋白F(F -actin)。软琼脂培养的集落细胞接种SCID小鼠检查成瘤性。Westernblot方法检测细胞内HPVE6表达蛋白。结果 :培养细胞有两种不同分化形态 ,分化差的基底细胞和分化好的鳞状上皮 ;前者角蛋白和F -actin极少 ,后者含量丰富 ;细胞接触抑制和锚锭生长特性减弱。分析 10 0个细胞染色体众数分二干系 ,5 6条 (占 30 % )和 6 1条 (占 2 4% )染色体 ,核型分析属于超二倍体 ,亚三倍体。多重PCR检查 :c -myc、p5 3基因上调 ,bcl- 2和ras基因阳性。用优选生长在软琼脂上的克隆细胞接种SCID小鼠 ,未成瘤 ;HPV18E6表达蛋白阳性。以HPV18E6E7诱导的食管永生化上皮 31代细胞形态出现了双向分化 ,根据其形态表型 ,双染色体众数的细胞遗传学改变和某些癌基因上调等特性 。
- 沈忠英许丽艳陈铭华蔡维佳陈炯玉洪超群沈健曾毅
- 关键词：食管上皮永生化细胞遗传学人乳头状瘤病毒
