蔡亚非
- 作品数：99 被引量：312H指数：9
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 家畜冷冻精液DNA的纯化及影响因素分析被引量：2
- 2020年
- [目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5、1、1.5、2、3和5 h的蛋白酶解时间,用试剂盒法纯化DNA。从DNA产物浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值3方面,结合琼脂糖凝胶电泳和PCR检测进行分析,最终确定DNA纯化的最佳精液初始量以及最佳蛋白质酶解时间。在此基础上,纯化67份来源于牛、马、驴等不同家畜品种的冷冻精液DNA,同时测定每份精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖的含量,结合精液样品的冻存时间,研究以上4种因素对DNA纯化质量的影响。[结果]使用100μL冷冻精液,蛋白酶解3 h的纯化效果最好,而且酶解2和3 h的DNA产物,均可以满足后续核基因组和线粒体基因组常规PCR的要求。家畜冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖含量与提取DNA浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值(纯度)在不同程度上呈斯皮尔曼负相关,其中果糖是干扰DNA纯化的关键因素,同时样品的冻存时间与DNA质量存在显著正相关关系。虽然冷冻精液中蛋白质、甘油/甘油三酯和果糖等成分可以减轻冷冻复苏对精子的损伤,但这些成分的增加,会对DNA纯化质量产生一定的负面影响,即使它们随着冻存时间及DNA纯化时酶解时间的延长而有所消耗。[结论]优化后的人精液DNA试剂盒法可完全适用于家畜冷冻精液DNA的纯化。
- 郭玛丽张晓婷彭珍珍蔡亚非陆汉希黄文佳黄文佳张威
- 关键词：冷冻精液DNA纯化果糖
- 采用16S rRNA高通量测序技术分析鲜奶中微生物的多样性被引量：11
- 2020年
- [目的]本研究以16S rRNA为分子标记,采用高通量测序技术分析探讨3种水平体细胞鲜奶样品中细菌种类、菌群多样性和菌群结构。[方法]选取江苏某牧场45头奶牛鲜奶样品,分为健康、亚临床乳腺炎型和临床乳腺炎型3组,并对临床型奶样进行细菌培养鉴定,同时分别提取各组鲜奶样品中细菌总DNA,根据16S rRNA V4—V5区设计引物进行扩增测序,利用生物信息学软件对测序结果进行分析。[结果]对体细胞数>1×106 mL-1的奶样进行细菌培养,鉴定出奶牛乳腺炎致病菌为无乳链球菌。对序列进行相似性聚类分析,得到394个可操作分类单位(OTU)。通过对OTU的聚类分析发现3组样品之间部分OUT水平存在明显差异。物种及丰度分析显示,门水平上的优势门为厚壁菌门(Firmicutes)、蓝藻门(Cyanobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobactice);属分类水平上的优势属为芽胞杆菌属(Bacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、海洋杆菌属(Oceanobacillus)、沙雷菌属(Serratia)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)和vadinBC27 wastewater-sludge group。其中临床组沙雷菌属和鞘氨醇单胞菌属显著高于其他2组,而海洋杆菌属的相对丰度降低。[结论]该牧场奶牛乳腺炎致病菌为无乳链球菌,为乳腺炎临床的抗生素选择和治疗提供了依据和借鉴。
- 吕成龙田雨陈芳慧刘小军李丽丽吕林雪葛继文顾晨浩邹彦王根林蔡亚非
- 关键词：鲜奶微生物多样性菌群分布
- 莴苣皮生物材料吸附水溶液中阳离子染料的研究被引量：17
- 2006年
- 采用莴苣皮粉剂为生物材料吸附剂对亚甲蓝（MB）、亮甲酚兰（BCB）、中性红（NR）3种阳离子染料进行了吸附研究。考察了吸附剂量、吸附剂粒径、吸附时间、染料浓度及pH值等因素对染料吸附的影响，确定了最佳吸附条件。结果显示，莴苣皮粉剂对3种阳离子染料的去除率均较高，当初始pH值等于或大于4时，用2．0g60～80目的莴苣皮粉剂对浓度为100mg·L^-1的3种阳离子染料处理60min后的去除率都在85％以上；吸附等温线符合Langmuir或Freundlich模式，用Lagergren准一级反应动力学方程对吸附过程进行模拟，拟合良好。上述结果表明，莴苣皮可成为一种很有前途的阳离子染料废水处理生物材料。
- 杨超蔡亚非龚仁敏邵登辉孙影芝
- 关键词：生物吸附阳离子染料亚甲蓝中性红
- 大肠杆菌ptsHIcrr操纵子的快速敲除及敲除菌生长性能测定被引量：5
- 2010年
- 敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)ptsHIcrr操纵子,考察敲除菌株生长特性并将其与ptsG敲除菌进行比较。利用I-SceⅠ特异性切割和Red同源重组方法成功构建了大肠杆菌DH5α△ptsHIcrr敲除菌。在LB培养基中,DH5α△ptsHIcrr的生长行为与DH5α和DH5α△ptsG明显不同,其最高菌密度是DH5α和DH5α△ptsG的近2倍,而DH5α△ptsG生长行为与DH5α无明显差异。但在含1%葡萄糖的LB中,DH5α△ptsHIcrr和DH5α△ptsG均表现出生长优势,最高菌密度依次是DH5α的2.8和2倍;培养液中最终乙酸含量分别是DH5α的12.2%、47%。在M9修饰培养基中,DH5α△ptsHIcrr比生长速率(1/h)和比葡萄糖消耗速率[g/(g.h)]明显低于DH5α,并略低于DH5α△ptsG。结果说明,ptsHIcrr操纵子敲除菌改变了葡萄糖的代谢速率,并呈现与ptsG基因敲除菌不同的代谢特点。
- 周军智邹永康戴红梅李树龙蔡亚非方宏清
- 关键词：RED同源重组大肠杆菌
- 黑眉锦蛇(Elaphe taeniura)精子的超微结构被引量：5
- 1997年
- 用透射电镜观察了黑眉锦蛇的精子结构．精子总长度约６９～７５μｍ，头部弯曲呈镰刀状，长约１１μｍ，有以下几个特点：（１）复杂的顶体复合体，包括顶体帽、顶体下杆、顶体下颗粒、顶体下核帽、顶体下间隙及中央管六个部分；（２）连接段形成连接裙，裙底边膨大成锤状；（３）中段无远端中心粒，具有厚的纤维鞘，第３号与第８号双联微管外侧有直径为５０ｎｍ粗的外致密纤维。
- 蔡亚非谢志浩陈壁辉
- 关键词：精子黑眉锦蛇爬行纲
- 苏中地区规模化牧场奶牛乳腺炎病原菌鉴定及药物敏感性分析被引量：4
- 2019年
- 从江苏省南通市大生源牧场、盐城市泰来神牧场及连云港市三元双宝牧场采集分析了12个月的奶牛乳样,通过分析3个牧场奶牛乳腺炎发病率的季节变化发现,冬季发病率普遍低于夏秋季。以2017年7月份南通市大生源牧场321头奶牛的乳样为例,采用奶牛生产性能测定(DHI)随机筛选出20头患有临床型乳腺炎的奶牛乳样,经过细菌分离纯化培养后采用PCR技术鉴定致病菌种类。结果显示:这20份乳样中共分离鉴定出枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、苏云金杆菌、微杆菌、金黄色葡萄球菌、格氏乳球菌、分支杆菌、大肠杆菌、气单胞菌、枸橼酸杆菌、不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌共13种细菌,其中以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枸橼酸杆菌、不动杆菌和肺炎克雷伯杆菌感染为主;此外,奶牛大都感染了3种及以上致病菌,说明奶牛乳腺炎以多种致病菌混合感染为主。选用6种抗生素药物组合对混合乳样致病菌进行药敏试验,结果显示氨苄西林钠、青霉素钾、硫酸链霉素共同处理组体外抑菌效果最好,为苏中地区大生源牧场奶牛乳腺炎防治提供一定的理论基础。
- 沈阳阳方舒婷贠阳李丽丽吕成龙陈芳慧马腾月宋文娟蔡亚非
- 关键词：奶牛乳腺炎致病菌药敏试验
- 一氧化氮在泌乳调控机制中的作用
- 2005年
- 一氧化氮(NO)是一种结构简单且化学性质活泼的信号分子,具有多种生理和病理调节功能。现有研究发现一氧化氮合成酶(NOS)在乳腺组织、下丘脑垂体神经轴均有分布,对泌乳神经内分泌系统具有调节功能。
- 杜娟蔡亚非王根林
- 关键词：畜牧学一氧化氮泌乳垂体激素
- BMP4诱导的Smad9在小鼠卵泡发育中的作用及其机制的初步研究被引量：5
- 2018年
- 本研究旨在探讨Smad9在小鼠卵泡发育中的作用,为卵泡生长发育及其调控机制的研究提供新思路。将6周龄的雌性昆明小鼠随机分成3组,分别腹腔注射生理盐水、骨形态发生蛋白-4(BMP4)和Smad9抑制剂(LDN-193189),依次作为对照组、BMP4组和LDN组。48h后收集卵巢制作石蜡切片,HE染色后观察卵泡发育情况并对各级卵泡进行计数;采用Western blotting和实时荧光定量PCR技术检测Smad9蛋白和mRNA水平。同时通过ELISA试验测定各组小鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P4)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和芳香化酶等的浓度,并检测了CYP19a1、LHR、PRLR和FSHR基因的表达情况,进一步探究Smad9可能的作用机制。结果显示,与对照组相比,BMP4组Smad9蛋白和mRNA水平较高,而LDN组较低;BMP4组有腔卵泡显著增加(P<0.05),而LDN组显著减少(P<0.05)。此外,ELISA试验结果显示,BMP4组血清E2、FSH和芳香化酶含量增加,而P4和LH含量降低;LDN组中E2和芳香化酶的含量降低。实时荧光定量PCR结果显示,BMP4组FSHR和CYP19a1基因的mRNA水平升高,而LHR和PRLR基因的mRNA水平降低;LDN组PRLR基因的mRNA水平升高,而CYP19a1基因的mRNA水平降低。由以上试验结果可以得出,BMP4诱导的Smad9能促进小鼠有腔卵泡的发育,而其可能主要通过影响E2、PRL和芳香化酶等的产生而起作用。
- 王和建张莉余道伦陈杰邢朝凤李洁李君蔡亚非
- 关键词：卵泡发育小鼠
- 牛奶中饱和脂肪酸的中红外快速批量检测方法
- 本发明属于奶牛性能测定和牛奶品质检测领域，公开了牛奶中饱和脂肪酸的中红外光谱快速批量检测方法。在特征波段的选择方面，打破了常用的使用算法筛选特征，而是使用人工手动选择+多次遍历的方法。最终选取用于建模的特征波段，特别是筛...
- 倪俊卿张震蔡亚非何开兵王贵强周扬马亚宾李春芳闫磊王海童操礼军胡永青陈芳慧秦则平任小丽李广吴喜娟夏振海郝磊晓邹慧颖
- 乌梢蛇上唇腺及达氏腺的组织学研究被引量：3
- 1999年
- 该文用光镜及透射电镜观察了４条鸟梢蛇的上唇腺及达氏腺。两腺体均具分叶，上唇腺为混合腺，其分泌部呈管泡状，由大量的粘液性细胞和少量的浆液性细胞组成。达氏腺为浆液腺，其分泌部呈分枝管状，由单层柱状上皮的浆液性细胞组成，腺体具单一导管。最后讨论了两腺体的生理功能，协同作用及达氏腺在系统演化上的意义。
- 蔡亚非李君陈壁辉
- 关键词：乌梢蛇组织学
