杨帆
- 作品数：18 被引量：21H指数：3
- 供职机构：安徽师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金芜湖市科技计划重点项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学医药卫生更多>>
- 肺炎克雷伯氏菌感染小鼠乳腺炎模型构建及NLRP3、TLR4和TLR2基因变化被引量：4
- 2021年
- 为了构建肺炎克雷伯氏菌感染小鼠乳腺炎模型,初步探究小鼠乳腺炎发病的分子机制,试验采用传统细菌培养方法从奶样中分离出致病菌,提取基因组DNA进行PCR快速检测和测序比对。选取12只泌乳Balb/c小鼠,每只小鼠的一侧乳区注射100μL生理盐水作为对照组,在对侧乳区注射100μL浓度为1×109 cfu/mL的肺炎克雷伯氏菌菌液作为感染组。在注射后第1,2,4,8天依次取样,每次3只。采用H.E.染色法观察小鼠乳腺组织的病理变化,实时荧光定量PCR法检测炎症相关基因炎症小体3(NLRP3)、Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)基因的相对表达量。结果表明:试验成功从奶样中分离并鉴定得到肺炎克雷伯氏菌。对照组小鼠第1,2天乳腺腺泡组织结构完整,轮廓清晰,第4,8天乳腺上皮细胞发生溶解并伴有少量脂肪细胞浸润;感染组小鼠的主要病理变化为乳腺上皮细胞之间排列松散,伴有大量脂肪细胞浸润,并且随着感染时间延长小鼠乳腺组织的病理变化越来越明显。感染组小鼠乳腺组织中NLRP3和TLR2基因的相对表达量与对照组相比极显著升高(P<0.01),TLR4基因的相对表达量与对照组相比差异不显著(P>0.05)。说明试验成功构建出肺炎克雷伯氏菌小鼠乳腺炎模型,TLR2、NLRP3基因参与肺炎克雷伯氏菌小鼠乳腺炎的发生,TLR4基因的相对表达量无显著变化。
- 江孝俊杨帆袁露张嫚玲李君蔡亚非
- 关键词：乳腺炎NLRP3肺炎克雷伯氏菌小鼠模型
- 携人源TPA基因的慢病毒表达质粒的构建与鉴定
- 2010年
- 利用PCR扩增人源TPA基因,再用酶切-连接的方法将目的片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-PGK-eGFP中,最后用测序、酶切和在293细胞中瞬时表达的方法进行了鉴定.结果显示:含人源TPA基因的pL-PGK-TPA-eGFP慢病毒表达载体构建成功,为进一步利用转基因技术更加安全高效地生产TPA,治疗血栓类疾病打下基础.
- 张昱王燕杨帆蔡亚非王根林
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂慢病毒载体基因表达
- 87版电视剧《红楼梦》声乐作品的演唱研究——以《红豆曲》《葬花吟》为例
- 87版电视剧《红楼梦》声乐作品作为中国民族声乐作品中的经典，自问世以来便受到社会上的一致好评与追捧。本文挑选了其中最具人物代表性的两首作品《红豆曲》、《葬花吟》，通分四个篇章进行演唱分析。其中第一章第二章主要解读《红楼梦...
- 杨帆
- 关键词：电视剧声乐作品演唱技巧
- 文献传递
- 鹅胚脾淋巴细胞选择机制研究被引量：3
- 2011年
- 取发育到第14天的鹅胚胎(E14)到1日龄雏鹅的脾脏用免疫荧光双标法研究CD4和CD8抗原表达,用Hoeschst33342的荧光染色方法分析细胞凋亡率,探索鹅胚脾淋巴细胞选择机制。结果显示:E14脾初具轮廓,E19脾出现红髓和白髓,1日龄时脾被膜增厚,脾小结数目增多,脾结构完整。CD4和CD8共表达于脾的红髓和被膜上,白髓中表达量较少。鹅胚脾的CD4+CD8+表达量为1%～30%;1日龄雏鹅的双阳性面积百分比与胚胎鹅E14、E19、E24、E27差异极显著(P<0.01);1日龄雏鹅的凋亡率与胚胎鹅E14、E24差异极显著(P<0.01)。表明鹅胚脾的CD4+CD8+表达与细胞凋亡存在协同关系。
- 王燕周学军蔡亚非陈杰杨帆李平刘再群邓立翠
- 关键词：鹅胚外周淋巴细胞
- β-LG前体基因外显子区单核苷酸多态及其对奶牛生产性能和分子结构的影响
- β-乳球蛋白(β-LG)是由乳腺上皮细胞合成分泌的一种特有乳清蛋白,是鲜奶中蛋白质的一种,约占鲜奶蛋白质的7~12%,是牛和其它反刍动物乳中乳清蛋白中的重要组分,但是在啮齿类动物和人的乳中却缺少这种乳球蛋白,其功能目前尚...
- 杨帆
- 关键词：中国荷斯坦奶牛Β-乳球蛋白
- 文献传递
- Sr_3AlO_4F晶体中掺杂Ba^(2+),Ca^(2+)离子占据不同Sr^(2+)格位倾向性的第一性原理研究被引量：2
- 2012年
- 通过比较第一性原理计算总能量得出碱金属离子Ba2+和Ca2+取代占据氟氧化物晶体Sr3AlO4F中两种不同Sr格位时,Ba2+倾向占据10配位的Sr(1)位,而Ca2+倾向占据8配位的Sr(2)位,与实验分析结果一致.基于上述优化结构,通过键价求和计算和畸变指数分析,得出Sr3AlO4F中Sr(1)格位离子严重未饱和成键,倾向于被较大Ba2+离子取代占据;而Sr(2)格位离子略微过饱和成键,倾向于被较小Ca2+离子取代占据.
- 杨帆张玲玉宁利新
- 关键词：第一性原理计算
- KPb_2Cl_5晶体中掺杂Er^(3+)和Eu^(3+)离子占据格位倾向性的原子模拟研究被引量：1
- 2012年
- 本文采用经验势原子方法模拟研究了稀土Er3+和Eu3+离子掺入KPb2Cl5晶体的格位占据情况,其中经验势参数通过拟合KPb2Cl5、PbCl2、ErCl3、EuCl3晶体结构得到.在此基础上,研究了KPb2Cl5晶体的本征缺陷和替代缺陷,而且通过溶解反应能计算发现,掺杂Er3+/Eu3+离子更倾向于占据Pb2格位,并由最近邻的K空位缺陷提供电荷补偿.这一结论与文献报道的KPb2Cl5:Eu3+光谱分析结果一致,为Er3+掺杂KPb2Cl5占据格位实验假设提供理论支持.
- 黄景怀杨战方振兴杨帆张玲玉宁利新崔执凤
- 奶牛HSP70基因3'-侧翼区多态性分析及其与生产性能的关系被引量：2
- 2009年
- 以160头荷斯坦和娟姗奶牛作为研究对象,分别测定了其在不同温度条件下,直肠温度、呼吸频率、产奶量及乳成分,并进行了统计分析。同时设计引物扩增HSP70基因3'-侧翼区,通过PCR-SSCP技术分析HSP70基因3'-侧翼区的多态性,并发现一个多态位点。结果表明:扩增片段为292bp,扩增产物有基因多态性,共发现4种基因型,分别为荷斯坦牛的AA(H)型、AB(H)型和娟姗牛的AA(J)型、AB(J)型。其中B基因可能为抗热应激基因,这4种基因型奶牛个体的生产性能差异不显著(P>0.05)。
- 吴国良崔群维刘卉玲杨帆范睿蔡亚非王根林
- 关键词：直肠温度HSP70基因多态性热应激
- 体细胞Caspase-3信号通路及DNA甲基化调控卵泡闭锁的分子机制
- 2010年
- 为了揭示caspase-3等细胞凋亡相关基因及DNA甲基化水平在小鼠卵泡闭锁中的作用,小鼠经注射10 IU hCG后,在0、12、24、48、72和96 h解剖取出卵巢,用HE染色、DNA电泳、免疫组化、RT-PCR技术、甲基化酶切等试验方法,研究在卵泡发育及闭锁过程中caspase-3等凋亡相关基因的表达及DNA甲基化水平的变化。结果表明:bax、caspase-3的表达量在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05),且在卵腔液中大量表达;甲基化水平在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05);卵泡凋亡程度在48 h之前也持续减少,在72 h显著增多(P<0.05)。bcl-2的表达量在48 h之前持续增加,在72 h显著减少(P<0.05)。提示:卵泡的发育和闭锁可能受体细胞Caspase信号通路调控,并通过卵腔液发挥作用决定其存亡;另外,甲基化水平的改变可能与卵泡的闭锁直接相关。
- 刘楠乔蔡亚非许家玉周军智杨帆范睿
- 关键词：体细胞CASPASE-3甲基化
- 小鼠Zbtb38基因慢病毒过表达质粒的构建与鉴定
- 2020年
- 本研究旨在构建Zbtb38(zinc finger and BTB domain containing 38)基因慢病毒过表达质粒载体。以小鼠脊髓组织为材料,采用重叠延伸PCR方法扩增小鼠Zbtb38基因的CDS序列,分别设计Zbtb38 CDS序列前段扩增引物1和后段扩增引物2,再以上述两对引物的扩增产物作为模板,设计引物3并进行融合PCR扩增,由此得到Zbtb38 CDS全序列。将获得的Zbtb38基因CDS全序列连接到质粒pGM-T,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,采用直接PCR鉴定阳性克隆并进行测序验证。利用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切方法将Zbtb38 CDS序列连接至慢病毒载体Plvx-puro,获得穿梭质粒Plvx-puro-Zbtb38,再与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生产慢病毒颗粒。结果显示,引物1扩增产物包含Zbtb38 CDS全序列的第1-1794 bp,扩增产物实际测序长度为1772 bp,引物2扩增产物包含Zbtb38 CDS全序列的第1762-3594 bp,扩增产物实际测序长度为1818 bp,说明分段扩增目的片段已成功。引物3扩增的预期融合产物及菌落PCR扩增产物均包含Zbtb38 CDS全序列(3594 bp),与NCBI数据库Zbtb38基因的CDS序列比对后的重合率达99.99%,表明Zbtb38 CDS序列扩增成功。实时荧光定量PCR检测结果显示,病毒滴度达3.25×108 Tu/mL,达到普通动物注射标准要求,提示慢病毒载体构建成功。综上所述,本试验成功构建了小鼠Zbtb38基因慢病毒过表达质粒载体。
- 李洁陈静杨帆李君蔡亚非
- 关键词：重叠PCR慢病毒载体
