龚为民
- 作品数：33 被引量：113H指数：6
- 供职机构：中国科学技术大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金中国科学院“百人计划”更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- 真菌漆酶的结构与功能被引量：63
- 2003年
- 漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,能催化氧化酚类和芳香类化合物,同时伴随4个电子的转移,并将分子氧还原成水。漆酶结构的解析是阐明其催化作用机理、了解蛋白质结构与功能关系的基础。综述近年来对真菌漆酶蛋白结构及其功能研究的进展。
- 张敏肖亚中龚为民
- 关键词：真菌漆酶晶体结构蛋白结构
- 野生革耳菌组成型漆酶的生成条件及性质研究被引量：6
- 2002年
- 首次发现野生革耳菌 (Panusrudis)在 39℃液体振荡培养条件下 ,不需诱导剂的诱导 ,能持续产生漆酶 .优化后培养基的碳氮源分别为 2 %蔗糖和 2 6mM酵母抽提物 ,最高酶活达 1 .6× 1 0 4U/L ,属于目前已知的组成型漆酶高产菌株 .发酵液经硫酸铵沉淀 ,DEAE Sepharose ,SephacrylS 2 0 0 ,MonoQ柱层析分离纯化后 ,可得电泳纯漆酶蛋白 .该酶为单体蛋白 ,分子量为 58kDa .以愈创木酚为底物 ,该酶的最适作用pH为4 5,最适反应温度为 50℃ ,Km值为 0 .2 1mM ,并表现出较好的热稳定性 。
- 张敏张敏肖亚中王芳张仁云刘林
- 关键词：漆酶产酶条件酶学性质振荡培养多酚氧化酶
- 3,5-二氟代酪氨酸翻译系统及其应用
- 本发明涉及一种氨酰基‑tRNA合成酶突变体，其为一种正交氨酰基‑tRNA合成酶，其含有的氨基酸序列选自由SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列和SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的保守性变体组成的组，所述保守性变体具...
- 王江云李发慧李家松龚为民江欢欢
- 文献传递
- 7号淀粉酶链霉菌M1033菌株木糖异构酶晶体结构研究被引量：1
- 1997年
- 7号淀粉酶链霉菌M1033菌株木糖异构酶(SDXyI).19nm分辨率晶体结构已经解出.晶体空间群为I222,晶胞参数为a=9.884nm,b=9.393nm,c=8.798nm.参考锈赤链霉菌木糖异构酶(SRXyI)的晶体结构模型,通过分析晶体密堆积关系和晶体学R因子搜索,获得了SDXyI晶体结构的初始模型.采用PROLSQ软件包使用0.60～0.19nm分辨率衍射数据对模型进行了修正.最终模型的晶体学R因子为0.177,键长键角均方根偏差分别为0.0019nm和2.1°.与SRXyI相比较,SDXyI整体构象未发生明显变化,活性中心构象有显著差异.
- 徐庆平伍传金崔涛王玉珍王淳朱学勇龚为民牛立文滕脉坤
- 关键词：链霉菌木糖异构酶晶体结构淀粉酶
- 尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶结构、酸失活及蛋白水解施机理的研究
- 尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶acutolysin A具有强烈的出血作用,它是一种低分子量金属蛋白酶,分子量为22kDa.以adamalysin Ⅱ分子为模型用分子置换法测定了acutolysin A在pH7.5和pH5.0...
- 龚为民
- 关键词：金属蛋白酶
- 皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅳ的纯化与初步鉴定被引量：2
- 1996年
- 从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ，等电点为ｐＨ５．０．从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇＡａＨⅣ纯品．ＡａＨⅣ有较强的出血活性，最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ．
- 朱中良龚为民牛立文滕脉坤
- 关键词：尖吻蝮蛇蛇类出血毒素提纯
- 功能蛋白质合成的化学生物学新方法
- 王江云刘晓红李发慧龚为民张华姜丽胡诚田长麟牛忠伟江欢欢张维周庆潘延超李家松周娟作
- 二十一世纪以来,由于蛋白质科学研究更为深入,传统的生物学研究手段已经不能满足蛋白质科学中诸多前沿课题研究的需要,因此,使用化学小分子作为工具解决生物学问题的化学生物学方法逐渐被应用到该研究中。该项目主要利用基因密码子扩展...
- 关键词：
- 关键词：功能蛋白质化学生物学酶催化剂
- 野生革耳菌漆酶cDNA在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：9
- 2004年
- 将分离到的野生革耳菌(Panusrudis)漆酶的cDNA序列克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,构建成受强启动子AOX1控制的重组表达载体.重组质粒DNA经BglII线性化后,电击转化毕赤酵母GS115细胞,通过G418筛选和PCR鉴定的重组酵母在甲醇诱导后能分泌表达活性漆酶.低温培养是该漆酶基因活性表达的必要条件.培养基中添加400μmol/L的CuSO4最有利于漆酶的活性表达.
- 张敏张敏肖亚中余聪
- 关键词：漆酶CDNA序列毕赤酵母
- 应用多波长反常散射法测定耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶的晶体结构被引量：3
- 2001年
- 运用基因工程技术,将耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶（TC23O）分子中的甲硫氨酸（Met）全部置换为甲硒氨酸（SeMet）.培养出甲硒氨酸置换的耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶（SeMet-TC23O）的晶体.利用同步辐射光源收集了SeMet-TC23O 晶体的X射线衍射数据,应用多波长反常散射方法测定了TC23O0.3mm的晶体结构.结果显示,TC23O分子为同源四聚体结构,每个单体由相对独立的N-端结构域（1～153位氨基酸残基）和C-端结构域（153～319位氨基酸残基）构成.每个结构域含有两个在此类酶中具有特征性的βαβββ结构花样.两个结构域可根据分子内非晶体学对称轴近似叠合.
- 姜涛季朝能盛小禹陈民勤谢毅毛裕民龚为民
- 关键词：晶体结构X射线衍射同步辐射光源
- 人源硫酯酶超家族成员2的晶体结构和功能研究
- ＜正＞人源硫酯酶超家族成员2（hTHEM2）在我们研究之前只是一个假想蛋白,对于其功能和结构一无所知．我们在结构基因组的项目支持下,首次克隆了该基因,并且在大肠杆菌中过量的表达,纯化,结晶该蛋白,并且利用Se-SAD法成...
- 程中军宋峰单骁越鲍时来Debra Dunaway Mariano龚为民
- 文献传递
