刘天会
- 作品数：82 被引量：123H指数：5
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 带HBV基因的重组腺相关病毒刺激树突状细胞引起特异性CTL杀伤作用的研究
- 目的研究腺相关病毒(AAV)为载体的含有HBV-S、C或X基因的重组病毒(rAAV-HBV-S、 C、X)通过刺激树突状细胞(DC),产生对HBV感染的靶细胞特异性的缅胞毒杀作用。方法分别构建含有HBV-S、C和X基因的...
- 尤红丛敏王萍刘天会唐淑珍徐雍卢炎刘晓明王宝恩贾继东
- 文献传递
- 脂蛋白脂肪酶与非酒精性脂肪性肝病
- 2023年
- 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)通常与代谢风险因素有关,包括肥胖、血脂异常和糖尿病等。脂蛋白脂肪酶(LPL)是调控血清中甘油三酯水平的关键酶,与上述风险事件的发生密切相关,提示LPL在NAFLD中发挥重要作用。
- 康碧莲刘天会
- 关键词：脂蛋白脂肪酶非酒精性脂肪性肝病甘油三酯
- 腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV-X基因启动子的体外结合被引量：2
- 2006年
- 目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV-X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP-rep78融合蛋白;通过SDS-电泳及免疫印迹(Western blot)鉴定蛋白表达。合成地高辛标记的X启动子3段探针;以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-X启动子的结合。结果得到纯化的MBP-rep78融合蛋白;EMSA结果显示Rep78蛋白在体外能够与HBV-X启动子DNA结合,并有剂量依赖关系。结论AAVRep78可以与HBV-X启动子结合。
- 刘天会丛敏王萍唐淑珍王宝恩贾继东尤红
- 关键词：腺相关病毒乙肝病毒
- 以腺相关病毒为载体的小干扰RNA对肝星状细胞中金属蛋白酶组织抑制因子的抑制作用被引量：1
- 2006年
- 目的观察以腺相关病毒(AAV)为载体含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1的表达抑制作用。方法针对大鼠TIMP-1 mRNA基因序列挑选一段22bp片段,在体外构建为短发夹siRNA (shon hairpin siRNA,shRNA)表达载体后,将其包装为重组AAV并感染大鼠肝星状细胞系HSC-T6后,于感染后30d及90d应用荧光定量PCR方法及Western blot方法分别检测TIMP-1 mRNA及蛋白质表达情况,同时通过PCR技术以感染后细胞的基因组DNA为模板扩增外源基因验证其长效表达。结果经PCR、酶切及序列测定证实含有siRNA-TIMP-1基因的重组AAV载体质粒已成功克隆。将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞,与对照组细胞相比,感染后30d及90d细胞TIMP-1 mRNA水平明显降低(P＜0．01),感染后30d TIMP-1蛋白表达水平较对照组细胞相比下降约60％,而感染后90d,TIMP-1蛋白表达几乎下降90％。PCR结果显示在重组病毒感染后90d细胞基因组DNA中仍可扩增出外源基因,证实外源基因可长期表达。结论重组病毒rAAV/siPtNA-TIMP-1/neo可长期有效地抑制TIMP-1基因的表达。
- 丛敏王萍刘天会徐雍卢炎唐淑珍刘晓明王宝恩贾继东尤红
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制因子小干扰RNA腺相关病毒肝星状细胞
- 腺相关病毒和慢病毒作为小干扰RNA转运载体的比较被引量：2
- 2009年
- 目的观察以腺相关病毒（adeno—associated virus，AAV）和慢病毒（Lenti virus）为载体、含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP）-1、具有较强抑制作用的小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）感染大鼠肝星状细胞系（hepatic stellate cell，HSC）-T6的感染效率和其对TIMP-1的表达抑制作用。方法挑选针对大鼠TIMP-1基因具有较强抑制作用的siRNA序列，在体外构建为短发夹表达载体后，将其包装为重组AAV／siRNA—TIMP-1／GFP和Lenti／siRNA—TIMP-1／GFP，同时包装阴性对照AAV／GFP和Lenti／GFP，并以MOI=10感染大鼠肝星状细胞系HSC—T6，感染后72h，通过流式细胞仪及荧光显微镜观察病毒的感染效率。在感染后7d，应用Western bloting方法检测TIMP-1蛋白表达情况。结果感染HSC—T6后细胞形态、增生速度未发生明显变化。通过流式细胞仪及荧光显微镜证实感染效率分别为：空载体AAV／GFP和Lenti／GFP组分别为72．7％和70．0％，AAV／siRNA-TIMP-1／GFP和Lenti／siRNA—TIMP-1／GFP感染组分别为64．58％和61．86％。与正常细胞相比，感染后7d，siRNA感染组TIMP-1蛋白表达均下降约40．0％，但两组siRNA感染组下降幅度无统计学意义。结论构建的重组AAV／siRNA．TIMP-1／GFP和Lenti／siRNA—TIMP-1／GFP均可有效感染大鼠HSC—T6，感染效率相近，且均可在短期内有效抑制大鼠肝星状细胞系HSC—T6TIMP-1蛋白的表达。
- 丛敏白艳锋王萍刘天会徐雍杨爱婷王慧唐淑珍马红贾继东尤红
- 关键词：腺相关病毒慢病毒小干扰RNA金属蛋白酶组织抑制因子-1肝星状细胞
- 肝脏干细胞研究进展与治疗前景被引量：4
- 2002年
- 刘天会贾继东阎钟钰
- 关键词：肝脏干细胞肝疾病
- 铁调素通过抑制肝细胞凋亡在肝纤维化中的作用机制研究被引量：1
- 2021年
- 目的明确在小鼠肝纤维化发生、发展过程中铁调素(hepcidin)的调控作用。方法将野生型C57BL/6(WT)小鼠和hepcidin基因敲除(HAMP-/-)小鼠按随机数字表法分为正常对照组(n=10)和四氯化碳(CCl 4)组(n=10)。正常对照组小鼠给予橄榄油灌胃,CCl 4组小鼠给予25%CCl 4(CCl 4︰橄榄油=1︰3)灌胃,每周2次,共6周。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CCl 4灌胃1周、4周和6周小鼠血清中hepcidin的水平;通过Masson染色和苏木精-伊红(HE)染色来分别观察CCl 4所诱导的小鼠肝脏纤维化严重程度,以及肝内的炎症水平;通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测小鼠肝脏内纤维化相关基因Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)和转化生长因子β(TGF-β)的表达,炎症相关基因白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,以及凋亡相关基因Bax、Fas、Bcl-xl和Bcl 2的表达;最后采用流式细胞术检测hepcidin多肽对CCl 4诱导的小鼠肝细胞系NCTC1469细胞凋亡的调控作用。结果ELISA结果表明,随着肝纤维化进展,小鼠血清中hepcidin水平呈现出逐渐升高的趋势,在6周时最高,与正常对照组小鼠相比,升高约1.9倍,差异有统计学意义(P<0.01)。肝组织病理学结果显示,与WT型CCl 4组小鼠相比,HAMP-/-CCl 4组小鼠肝纤维化程度和肝脏炎症细胞浸润更严重。qPCR结果显示,与WT型CCl 4组小鼠相比,HAMP-/-CCl 4组小鼠其肝脏CollagenⅠ、CollagenⅢ和TGF-β的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);促凋亡基因Bax和Fas的表达也呈现出上调趋势,凋亡抑制基因Bcl-xl和Bcl 2的表达呈下调趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪分析结果显示,hepcidin可显著抑制CCl 4诱导的小鼠肝细胞系NCTC1469细胞凋亡。结论Hepcidin可以通过抑制肝脏细胞的凋亡进而抑制肝脏炎症和肝�
- 刘莹莹王晓凡李长英刘琳刘天会王萍丛敏
- 关键词：小鼠铁调素肝脏纤维化肝细胞凋亡
- 多种细胞共培养支架
- 本发明涉及一种多种细胞共培养支架，该支架包括支架面和与所述支架面连接的支撑架，所述的支架面上开设有固定孔。所述的支架面边缘处连接有支撑架。本发明可根据需要进行3到5种细胞的共同培养，可适用于多种贴壁细胞、悬浮或半悬浮细胞...
- 刘天会尤红贾继东朱圣韬王萍丛敏
- 文献传递
- 慢性乙肝患者CD4^+ CD25^+ T细胞对外周血树突状细胞成熟的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞成熟的影响。方法对2013年6月至2013年12月就诊的15例CHB患者和18例健康对照各抽取外周血20 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),于体外培养获得树突状细胞(DC)及免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞;分别将CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞与DC共培养后采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达。结果健康对照组,加入Treg后,相比于DC对照组及DC与CD4+CD25-T细胞共培养组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异有统计学意义。CHB患者组,加入Treg后,相比于DC对照组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异均有统计学意义;与DC和CD4+CD25-T细胞共培养组相比,Treg对DC的CD83、CD80表达抑制率较高,差异有统计学意义。CHB患者组的Treg对DC的CD83、CD80、CD86表达抑制率均高于健康对照组,差异均有统计学意义。结论 CHB患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,抑制效应强于健康对照。
- 张群庞国进谌双君刘天会王萍尤红丛敏
- 关键词：调节性T细胞树突状细胞
- 表达细胞色素P2E1 C3A肝细胞系的建立及其对增殖的影响被引量：2
- 2006年
- 细胞色素P450 2E1（Cytochrome-P450）2E1,CYP2E1）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病机制中发挥重要作用.CYP2E1广泛与细胞物质代谢,是否影响肝细胞增殖是一个值得探讨的问题,我们对CYP2E1对C3A肝细胞增殖的影响进行了初步探索.
- 刘天会徐有青尤红徐雍丛敏王萍贾继东王宝恩
- 关键词：细胞色素P450细胞系C3A非酒精性
