丛敏
- 作品数：89 被引量：182H指数：6
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 建立荧光定量聚合酶链反应检测金属蛋白酶组织抑制因子-1方法的研究
- 目的构建含有金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的重组质粒并以其为模板建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测TIMP-1的标准曲线,为荧光定量PCR准确检测TIMP-1奠定基础。方法提取大鼠呈状细胞系HSC-T...
- 丛敏阎钟钰王萍张岩徐雍卢炎王宝恩贾继东尤红
- 文献传递
- 肝星状细胞在肝纤维化发生中的作用及在抗纤维化治疗中的意义
- 贾继东马红尤红王宝恩丛敏刘天会王萍唐淑珍
- 1998年1月-2007年3月，自选课题、自筹经费，进行了该项目的研究。研究成果：1.观察乙肝病毒、瘦素等因子对肝星状细胞增殖、细胞外基质合成与降解的作用，初步证明乙肝病毒能够进入肝星状细胞并促进其增殖，并且对I型胶原m...
- 关键词：
- 关键词：肝星状细胞肝纤维化抗纤维化治疗细胞增殖乙肝病毒
- 细胞色素P450 2E1抑制剂DDC上调人星状细胞基质金属蛋白酶-1表达被引量：3
- 2010年
- 目的细胞色素P450 2E1(CYP2E1)可以诱导肝星状细胞合成I型胶原增加,而此效应可被CYP2E1抑制剂阻断,但其机制仍不清楚。本研究旨在研究CYP2E1抑制剂DDC可能的抗纤维化机制。方法将稳定表达CYP2E1的人肝细胞系C3A-CYP2E1与人星状细胞系LX-2共培养,并给予CYP2E1抑制剂DDC处理。DDC处理24h后收取共培养上清及LX-2细胞。ELISA检测共培养上清中前I型胶原含量,半定量PCR及实时荧光定量PCR测定LX-2细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、I型胶原和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TI MP-1)的相对转录水平。结果 ELISA结果显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组共培养上清中的前I型胶原含量下降,差异具有统计学意义。半定量PCR及实时荧光定量PCR均显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组LX-2细胞中MMP-1的相对转录水平明显增加,差异具有统计学意义;而I型胶原和TIMP-1的相对转录水平无明显改变。结论 CYP2E1抑制剂DDC主要通过上调MMP-1的表达,以发挥其抑制I型胶原合成的作用,而对I型胶原和TI MP-1的转录无明显影响。
- 刘天会丛敏王萍徐有青尤红
- 关键词：细胞色素P450DDC基质金属蛋白酶-1氧化应激
- 腺相关病毒为载体携带HBV抗原刺激树突状细胞引起特异性免疫杀伤作用
- 尤红丛敏刘天会王萍唐淑珍徐雍马红贾继东王宝恩
- 1.该研究系统观察了分别包装有HBV–C，S，X抗原的重组腺相关病毒刺激外周血单核细胞后，应用不同细胞生长因子，作用不同时间对其成熟为树突状细胞（DC）的影响，建立了一整套在体外分离外周血单核细胞进而以最优化方式培养为D...
- 关键词：
- 关键词：腺相关病毒细胞毒性T淋巴细胞乙肝病毒
- 外泌体在肝脏纤维化中的研究进展被引量：3
- 2018年
- 外泌体是由多种细胞通过胞吐作用分泌到体液中的膜包被小泡,介导细胞间信息交流以及调节细胞微环境,参与细胞生长、增殖、分化、凋亡,肿瘤生长、侵袭等多种生理病理活动.肝脏纤维化是细胞坏死以及炎症刺激等引起肝脏细胞外基质（extracellularmatrices,ECMs）过量产生并沉积的病理过程.肝星状细胞（hepaticstellatecells,HSCs）受多种信号通路调节,激活后可以向肌成纤维细胞（myofibroblasts,MF）转化,是引起肝脏纤维化的ECMs的主要来源.大量实验证明外泌体在肝脏纤维化发生发展过程中发挥着重要作用,在肝脏纤维化诊治中具有潜在的应用价值.
- 王燕红黄小莉丛敏
- 关键词：肝脏纤维化外泌体肝脏细胞外基质肌成纤维细胞细胞微环境胞吐作用
- 多种细胞共培养支架以及多种细胞共培养装置
- 本实用新型涉及一种多种细胞共培养支架，该支架包括支架面和与所述支架面连接的支撑架，所述的支架面上开设有固定孔。所述的支架面边缘处连接有支撑架。本实用新型可根据需要进行3到5种细胞的共同培养，可适用于多种贴壁细胞、悬浮或半...
- 刘天会尤红贾继东朱圣韬王萍丛敏
- 文献传递
- 腺相关病毒载体携带HBV抗原刺激树突状细胞引起特异性免疫杀伤
- 尤红丛敏刘天会王萍唐淑珍徐雍马红贾继东王宝恩
- 该项目所属“医疗卫生”技术领域。主要研究开发内容是应用腺相关病毒AAV为载体的重组病毒，将其分别携带有HBV的S，C或X基因，分别转化刺激人外周血培养的树突状细胞，观察感染转化效率和抗原的表达，以及由树突状细胞提呈抗原引...
- 关键词：
- 关键词：HBV抗原腺相关病毒树突状细胞免疫杀伤
- 腺相关病毒Rep78蛋白对乙型肝炎病毒C基因的抑制作用被引量：6
- 2005年
- 目的 研究腺相关病毒(AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒C基因(HBV-C)的抑制作用及机制。 方法 以pEOB6(含有HBV全长的质粒)为模板,聚合酶链反应法分别扩增出HBV-C启动子基因及含有HBV-C启动子的HBV-C基因。利用pMAL-Rep78体外扩增得到Rep78蛋白。以凝胶电泳阻滞实验检测Rep78与HBV-C启动子的结合,体外转录实验观察Rep78对HBV-C转录的影响。 结果 聚合酶链反应法扩增出了的HBV-C启动子基因(182 bp)及含有HBV-C启动子的HBV-C基因(789 bp)。凝胶电泳阻滞实验结果显示Rep 78与HBV-C启动子结合,呈剂量依赖性并可以被Rep 78抗体阻滞。体外转录实验显示Rep78明显抑制HBV-C的转录。 结论 AAVRep78可以通过与HBV-C启动子结合抑制HBV-C的转录。
- 阎钟钰丛敏王萍唐淑珍王宝恩贾继东刘勇尤红
- 关键词：C基因腺相关病毒乙型肝炎病毒蛋白聚合酶链反应法凝胶电泳
- 腺相关病毒介导的小干扰RNA对大鼠肝星状细胞金属蛋白酶组织抑制因子-1及基质金属蛋白酶13表达的影响被引量：4
- 2007年
- 目的观察以腺相关病毒(AAV)为载体含有针对金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达情况。方法将对大鼠TIMP-1基因具有最强抑制作用的一对siRNA,在体外构建为短发夹siRNA表达载体后,将其包装为重组AAV-rAAV/siRNA-TIMP-1/neo并感染HSC-T6,于感染后4周及12周应用荧光定量PCR方法及Western blot方法分别检测TIMP-1及MMP13mRNA及蛋白质表达情况。结果经PCR、酶切及序列测定证实抑制作用最强的1对siRNA在体外构建的shRNA表达载体成功克隆。将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞,与对照组细胞相比,rAAV/siRNA-TIMP-1/neo感染组在感染后4周及12周细胞TIMP-1mRNA及蛋白质表达水平明显降低(P<0.01),而MMP13mRNA及蛋白质表达水平明显增高(P<0.01)。结论化学合成的siRNA在短时期内可有效地抑制TIMP-1基因的表达,重组病毒rAAV/siRNA-TIMP-1/neo可长期有效地抑制TIMP-1基因表达。
- 丛敏刘天会徐雍卢炎唐淑珍刘晓明王宝恩贾继东尤红
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制因子小干扰RNA腺相关病毒肝星状细胞
- 铁和铁调素在四氯化碳肝纤维化小鼠模型中的表达被引量：8
- 2017年
- 目的利用四氯化碳(CCl_4)肝纤维化小鼠模型,动态观察小鼠肝纤维化发生发展过程中血清铁、肝脏组织铁的变化及血清铁调素(hepcidin)对铁代谢的影响,为临床抗肝纤维化治疗提供实验依据。方法利用8周龄的C57BL/6品系雄性小鼠分别给予CCl_4一周2次灌胃建立不同时期的肝纤维化模型,通过HE及Masson染色观察各组小鼠肝脏炎症、肝损伤及纤维化程度,并通过检测小鼠血清铁调素、血清铁、肝脏组织铁、膜铁转运蛋白的表达来评价小鼠肝纤维化过程中铁调素对铁代谢的影响。结果 CCl_4肝纤维化模型小鼠随造模时间的延长,纤维化程度逐渐加重,血清铁调素的表达呈递增趋势;血清铁及肝脏组织铁均呈先增加后降低的趋势,但两者出现峰值的时间点不同,且在CCl_4灌胃第6周仍高于正常对照组。血清膜铁转运蛋白随时间变化趋势与肝脏组织铁相似。结论在CCl_4诱导的肝纤维化小鼠模型中,随纤维化程度逐渐加重,血清铁调素的表达逐渐增加;血清铁、肝脏组织铁及膜铁转运蛋白的表达呈先增加后降低趋势,与铁调素调控体内铁代谢、维持铁稳态密切相关,同时也证实了肝纤维化过程中存在铁沉积。
- 赵卫华王燕红丛敏刘天会王萍尤红
- 关键词：小鼠肝纤维化铁调素铁代谢
