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简便快捷的小鼠胰岛分离纯化方法研究: 2012年; 目的探讨小鼠胰岛分离与纯化的方法.方法采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化胰岛.双硫腙特异性染色后计算胰岛产量及纯度.葡萄糖刺激后测定培养上清液胰岛素水平检测胰岛功能.结果 (1)每只小鼠采用上述分离、纯化法平均得到(114±15)个胰岛,平均纯度为(77.12±3.23)%,胰岛细胞存活率>90%;(2)分离、纯化的胰岛培养上清液中胰岛素水平在无糖、低糖(2.8 mmol/L)和高糖(22.2 mmol/L)刺激下分别为(23.80±3.52)mIU/L、(67.57±4.04)mIU/L和(164.32±10.75)mIU/L,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).两两比较,低糖组的胰岛素水平为无糖组的2.84倍(P<0.05),高糖组的胰岛素水平为低糖组的2.43倍(P<0.05),高糖组的胰岛素水平为无糖组的6.90倍(P<0.05).结论采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化的小鼠胰岛产量及纯度较高,形态完整,不同浓度葡萄糖刺激后胰岛素分泌反应良好,是一种简便、快捷的小鼠胰岛分离方法.; 合湫苏恒李超沈涛严新民薛元明; 关键词：多点注射分离纯化

炎症细胞因子IL-1β、IFN-γ对小鼠胰岛葡萄糖刺激下胰岛素分泌反应的影响: 第一部分小鼠胰岛的分离、纯化及鉴定目的研究小鼠胰岛的分离、纯化方法。方法采用多点注射灌注胶原酶消化胰腺,不连续密度梯度离心,联合人工挑取的方法纯化胰岛;台盼蓝染色观察胰岛活性,双硫腙（Dithizone,...; 合湫; 关键词：多点注射 NIT-1细胞; 文献传递

细胞外信号调节激酶1/2在白介素-1β抑制胰岛β细胞葡萄糖刺激下胰岛素分泌中的作用被引量：2: 2015年; 目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在人IL-1β抑制小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC-6)葡萄糖刺激下胰岛素分泌反应(GSIS)中的作用。方法 (1)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度;(2)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5 mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5min,蛋白质免疫印迹法检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平;(3)βTC-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15ng/ml)培养24h后于含1.38mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,检测上清液中胰岛素浓度;(4)βTC-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15ng/ml)培养24h后于含1.38mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5min,检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平。结果 (1)βTC-6细胞在1.38mmol/L葡萄糖刺激时胰岛素分泌及ERK1/2磷酸化水平均达到高峰;(2)IL-1β可抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的ERK1/2磷酸化及胰岛素分泌,作用与剂量呈正相关。结论 ERK1/2信号转导通路可能在IL-1β抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的胰岛素分泌反应中发挥重要作用。; 李超合湫王敏苏恒李清竹沈涛薛元明; 关键词：细胞外信号调节激酶1/2 信号转导通路

细胞外调节蛋白激酶1/2在小鼠胰岛瘤βTC-6细胞胰岛素分泌功能中的作用探讨被引量：2: 2015年; 目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2信号转导通路在βTC-6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)反应中的作用。方法采用不同浓度葡萄糖刺激βTC-6细胞,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度,Western blot检测细胞裂解物ERK1/2磷酸化水平。采用MEK抑制剂PD98059处理βTC-6细胞,放射免疫法检测葡萄糖刺激后上清液中胰岛素浓度,Western blot检测葡萄糖刺激后ERK1/2磷酸化水平。结果βTC-6细胞在1.38mmol/L葡萄糖刺激时,胰岛素分泌和ERK1/2磷酸化水平达高峰。PD98059可抑制葡萄糖刺激下ERK1/2磷酸化及胰岛素分泌,作用与剂量呈正相关。结论ERK1/2信号转导通路可能在βTC-6细胞GSIS中发挥作用。; 刘丽娟合湫合湫苏恒薛元明

胰岛β细胞损伤的分子机制探讨被引量：1: 2011年; 1型糖尿病的病理生理机制为自身免疫T细胞特异性破坏胰岛β细胞。越来越多的研究显示，胰岛β细胞的破坏同样在2型糖尿病的发生发展中发挥重要作用。2型糖尿病胰岛β细胞损伤的可能机制包括内质网应激、氧化应激、; 合湫苏恒; 关键词：胰岛Β细胞损伤病理生理机制细胞特异性 1型糖尿病内质网应激自身免疫

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合湫