季颖
- 作品数:11 被引量:33H指数:4
- 供职机构:北京医科大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金美国中华医学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Ortho第2代酶联诊断试剂对北京地区丙肝病毒阳性献血者检出效果评价被引量:4
- 1996年
- Ortho第2代酶联诊断试剂对北京地区丙肝病毒阳性献血者检出效果评价100083北京医科大学人民医院肝病研究所王宇,赵海燕,纪和平,季颖,陶其敏HCV在被感染者体内含量很低,不易用常规方法直接检测到,目前广泛应用的血清学检测方法(用基因重组或人工合成...
- 王宇赵海燕纪和平季颖陶其敏
- 关键词:丙型肝炎病毒阳性献血者
- 丙型肝炎病毒NS5b区酶切基因分型及其在干扰素治疗中的应用被引量:4
- 2001年
- 探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。应用逆转录 -聚合酶链反应(RT -PCR)技术对 2 6 9例肝炎患者血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α - 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。HCV单纯 1b型感染、1b基因变异及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14/ 2 0 )、9 5 % (2 / 2 1)、71 4% (5 / 7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/ 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、5 7 1% (4/ 7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 / 2 0 )、4 8% (1/ 2 1)、14 3 % (1/ 7)。 1b基因变异组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b基因变异者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标。
- 许青田杜绍财季颖王会民李新月陶其敏
- 关键词:丙型肝炎病毒基因分型聚合酶链反应干扰素
- 酶免疫法检测丙型肝炎病毒RNA的聚合酶链反应产物被引量:17
- 1998年
- 目的建立一灵敏、快速的检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA逆转录-套式聚合酶链反应(PCR)产物的酶免疫法。方法对第2次PCR所用的引物进行双标记,使扩增产物同时被修饰有生物素和荧光素(fluorescein)成分,再经过固相的链亲合素进行捕获、辣根过氧化物酶标记的抗-fluores-cein反应后显色测定。结果所建立的方法与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比灵敏、快速、准确,结果判断客观,重复性也较好;所测结果可反映PCR产物量的多少,但不能准确表示模板量的大小。结论建立的方法可取代电泳法而成为HCVRNA常规PCR反应产物的检测技术。
- 仝文斌张春英费然季颖冯百芳陶其敏
- 关键词:丙型肝炎病毒RNA酶免疫法聚合酶链反应
- 丙型肝炎病毒NS3蛋白单克隆杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定被引量:4
- 1995年
- 应用国产基因工程表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS3区抗原免疫小鼠,然后取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0融合,筛选出4株稳定分泌抗HCVNS3区蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为2B6,2F3,3D8,3D9,经初步研究表明这4株单抗与NS3抗原具有良好的反应性,与HCV核心区多肽及乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原均无反应。抑制实验表明这4株抗体分别针对NS3抗原分子上的2个不同的抗原决定簇。
- 高建恩郭建平纪和平季颖陶其敏
- 关键词:丙型肝炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 丙型肝炎病毒NS5b区与5’-非编码区不同基因区RNA检测结果的比较被引量:2
- 2000年
- 为探讨丙型肝炎病毒 (HCV)NS 5b区与 5’ -非编码区 ( 5’ -NCR)不同基因区RNA检测结果的区别及临床应用价值。利用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测 148例肝炎患者血清HCVNS 5b基因的cDNA ,并与5’ -NCR基因区cDNA检测技术进行了比较。结果 HCVNS 5b基因区RNA检出率为 2 4.3% ( 34/ 148) ,5’ -NCR基因区RNA检出率为 31.1% ( 47/ 148)。HCV 5’ -NCR基因区扩增效果较好 ,而HCVNS 5bPCR敏感性接近于HCV 5’-NCR检测结果 ,亦可直接应用于临床RNA检测。
- 许青田季颖杜绍财王会民李新月陶其敏
- 关键词:RNA丙型肝炎HCV
- HCV NS5b1b与1b混合感染指标在干扰素治疗中的应用被引量:1
- 2002年
- 目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。方法 :应用逆转录—聚合酶链反应 (RT PGR)技术对 2 69例肝炎病人血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。结果 :HCV单纯 1b型感染、1b与 1b混合感染及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14 /2 0 )、9 5 % (2 /2 1)、71 4% (5 /7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/2 0 )、4 8% (1/2 1)、5 7 1% (4 /7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 /2 0 )、4 8% (1/2 1)、14 3 % (1/7)。 1b与 1b混合感染组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b与 1b混合感染者干扰素治疗效果极差 。
- 许青田王会民李新月杜绍财季颖陶其敏
- 关键词:丙型肝炎病毒基因分型干扰素RT-PCR慢性丙型肝炎
- 丙型肝炎病毒 HCV E1区基因的真核表达载体构建及序列分析被引量:2
- 1999年
- 建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并通过对其序列分析阐明其作为基因接种的可能性。方法:经常规RT-PCR法从HCV RNA阳性病人的血清中扩增出HCV E1区的基因片段,经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶发后将其克隆到真核表达载体PcDNA3中,阳性克隆经SmaⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定以脱氧终止法测序,同时利用计算机软件对其推定的氨基酸序列进行分析。
- 高建恩蒋栋陶其敏纪和平季颖冯百芳
- 关键词:丙型肝炎病毒基因表达
- 庚型肝炎病毒与丙型肝炎病毒混合感染的初步研究
- 2001年
- 胡继伟许青田郝红梅杜绍财季颖陶其敏
- 关键词:庚型肝炎病毒丙型肝炎病毒
- HCV E1基因序列的原核高效表达及表达产物的初步应用
- 2001年
- 目的 在原核表达系统中对HCVE1基因进行克隆和高效表达 ,并初步探讨表达产物在抗 HCV筛选中的作用。方法 通过RT PCR法从HCVRNA阳性的血清标本中扩增出HCVEI片段 ,并在扩增用的引物中引入克隆所需的酶切位点 ,克隆产物经XbaⅠ和EcoRⅠ酶切后 ,在T4DNA连接酶的作用下克降入经同样双酶切的原核表达载体PMS 31b中 ,并用此连接产物转化大肠埃希菌POP2 136 ,挑取具有氨苄抗性的菌落扩大培养后提取质粒进行酶切鉴定 ,鉴定出的阳性菌经42℃诱导后用SDS PAGE检查其表达状况 ,并用Westernblot鉴定表达产物的特异性 ,同时用初步纯化的表达产物用ELISA法检测病人血清。结果 经SmaⅠ酶切后PCR产物被切成 144bp和 35 6bp的两个片段 ,在具有氨苄抗性的菌中提取的质粒经SmaⅠ和XbaⅠ酶切后产生了一 35 6bp的片段 ;42℃诱导后在SDS PAGE中出现了一条相对分子质量为 310 0 0的条带 ,其表达量约为 17% ,经West ernblot鉴定后在该处出现了阳性信号 ;ELISA实验显示在抗HCV阳性的血清中的阳性率约为2 9 8% (2 6 /90 ) ,而在抗HCV阴性的血清中其阳性率约为 3 9% (3/76 )。结论 通过RT PCR方法将HCVE1基因从HCVRNA阳性的血清标本中调出 ,构建了HCVE1的原核表达载体—PMS E1,其表达量为 17% ,表达产物具有良好的特异性 ,有?
- 高建恩陶其敏马大龙冯百芳纪和平季颖
- 关键词:丙型肝炎病毒病毒包膜蛋白质粒
- 庚型肝炎病毒NS3区聚合酶链反应临床RNA检测
- 2001年
- 赵清霞许青田郝红梅陈桂芬杜绍财季颖陶其敏
- 关键词:庚型肝炎病毒感染RNA检测