纪和平
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 供职机构：北京医科大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划美国中华医学基金会项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分泌抗丙型肝炎病毒NS5a蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立及应用被引量：3
- 1996年
- 制备抗丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）－ＮＳ５ａ重组蛋白的单克隆抗体（单抗），并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法通过常规细胞融合技术制备分泌单抗的杂交瘤细胞株，用含该杂交瘤细胞的腹水对石蜡包埋肝组织细胞中的ＨＣＶ－ＮＳ５ａ抗原进行免疫组化测定，同时用抑制法检测６７例丙肝血清中的ＨＣＶＮＳ５ａ和ＮＳ３抗体分布，并与ＮＳ３单抗的结果进行比较。结果融合后的阳性克隆中筛选出４株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株，命名为８Ｂ２，６Ｆ１１，４Ｃ６和７Ｄ９。这４株单抗与ＮＳ５ａ抗原有良好的反应性；与ＨＣＶ核心区多肽，ＮＳ３区表达多肽及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的表面抗原均无反应。免疫组织化学检测显示，在ＨＣＶ感染肝组织中，ＮＳ５ａ抗原阳性占５４．９％（１７／３１），而ＮＳ３抗原阳性占５１．６％（１６／３１），抗原分布多呈包涵体分布，少数病例为胞浆型，１例ＮＳ５抗原呈核型表达。在６７例抗ＨＣＶ阳性血清中，ＮＳ５抗体阳性４０例，占５９．７％，而ＮＳ３阳性４７例，占７０％。结论此法制备的单抗有强特异性，在开展ＨＣＶ免疫组织化学研究上具有广阔应用前景。
- 高建恩纪和平纪和平季颖冯百芳郎振为
- 关键词：丙型肝炎病毒单克隆抗体杂交瘤
- Ortho第2代酶联诊断试剂对北京地区丙肝病毒阳性献血者检出效果评价被引量：4
- 1996年
- Ｏｒｔｈｏ第２代酶联诊断试剂对北京地区丙肝病毒阳性献血者检出效果评价１０００８３北京医科大学人民医院肝病研究所王宇，赵海燕，纪和平，季颖，陶其敏ＨＣＶ在被感染者体内含量很低，不易用常规方法直接检测到，目前广泛应用的血清学检测方法（用基因重组或人工合成...
- 王宇赵海燕纪和平季颖陶其敏
- 关键词：丙型肝炎病毒阳性献血者
- 丙型肝炎病毒NS3蛋白单克隆杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定被引量：4
- 1995年
- 应用国产基因工程表达的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３区抗原免疫小鼠，然后取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系ＳＰ２／０融合，筛选出４株稳定分泌抗ＨＣＶＮＳ３区蛋白单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｂ６，２Ｆ３，３Ｄ８，３Ｄ９，经初步研究表明这４株单抗与ＮＳ３抗原具有良好的反应性，与ＨＣＶ核心区多肽及乙型肝炎病毒表面抗原和ｅ抗原均无反应。抑制实验表明这４株抗体分别针对ＮＳ３抗原分子上的２个不同的抗原决定簇。
- 高建恩郭建平纪和平季颖陶其敏
- 关键词：丙型肝炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 用单克隆－ＰｒｅＳ[*v2*]抗体建立ＰｒｅＳ[*v2*]检测试剂的研究及其质控的初步探讨
- 张正李新富纪和平
- 关键词：复制(分子生物学)免疫诊断抗体清蛋白
- 丙型肝炎病毒 HCV E1区基因的真核表达载体构建及序列分析被引量：2
- 1999年
- 建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体，并通过对其序列分析阐明其作为基因接种的可能性。方法：经常规ＲＴ－ＰＣＲ法从ＨＣＶ ＲＮＡ阳性病人的血清中扩增出ＨＣＶ Ｅ１区的基因片段，经ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ双酶发后将其克隆到真核表达载体ＰｃＤＮＡ３中，阳性克隆经ＳｍａⅠ和ＸｂａⅠ双酶切鉴定以脱氧终止法测序，同时利用计算机软件对其推定的氨基酸序列进行分析。
- 高建恩蒋栋陶其敏纪和平季颖冯百芳
- 关键词：丙型肝炎病毒基因表达
- HCV E1基因序列的原核高效表达及表达产物的初步应用
- 2001年
- 目的 在原核表达系统中对HCVE1基因进行克隆和高效表达 ,并初步探讨表达产物在抗 HCV筛选中的作用。方法 通过RT PCR法从HCVRNA阳性的血清标本中扩增出HCVEI片段 ,并在扩增用的引物中引入克隆所需的酶切位点 ,克隆产物经XbaⅠ和EcoRⅠ酶切后 ,在T4DNA连接酶的作用下克降入经同样双酶切的原核表达载体PMS 31b中 ,并用此连接产物转化大肠埃希菌POP2 136 ,挑取具有氨苄抗性的菌落扩大培养后提取质粒进行酶切鉴定 ,鉴定出的阳性菌经42℃诱导后用SDS PAGE检查其表达状况 ,并用Westernblot鉴定表达产物的特异性 ,同时用初步纯化的表达产物用ELISA法检测病人血清。结果 经SmaⅠ酶切后PCR产物被切成 144bp和 35 6bp的两个片段 ,在具有氨苄抗性的菌中提取的质粒经SmaⅠ和XbaⅠ酶切后产生了一 35 6bp的片段 ;42℃诱导后在SDS PAGE中出现了一条相对分子质量为 310 0 0的条带 ,其表达量约为 17% ,经West ernblot鉴定后在该处出现了阳性信号 ;ELISA实验显示在抗HCV阳性的血清中的阳性率约为2 9 8% (2 6 /90 ) ,而在抗HCV阴性的血清中其阳性率约为 3 9% (3/76 )。结论 通过RT PCR方法将HCVE1基因从HCVRNA阳性的血清标本中调出 ,构建了HCVE1的原核表达载体—PMS E1,其表达量为 17% ,表达产物具有良好的特异性 ,有?
- 高建恩陶其敏马大龙冯百芳纪和平季颖
- 关键词：丙型肝炎病毒病毒包膜蛋白质粒
