屠利民
- 作品数：4 被引量：19H指数：1
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- 安徽三黄鸡β-防御素2(gal-2)在毕赤酵母细胞内的表达
- 2010年
- 目的:构建安徽三黄鸡β-防御素2(gal-2)基因的真核表达载体,表达gal-2蛋白。方法:提取鸡肺组织中总RNA,应用RT-PCR技术获得鸡β-防御素2(gal-2)全长cDNA基因片段,经PCR获得gal-2的成熟肽基因片段,并将其克隆入真核表达载体pPIC3.5K中,构建重组表达质粒pPIC3.5K-gal-2;经测序鉴定正确后,电转化巴斯德毕赤酵母菌GS115。经甲醇诱导表达gal-2蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果:通过电转化方法成功将经酶切线性化的重组表达质粒整合入宿主菌基因组中,并在甲醇诱导的条件下成功表达出了目的蛋白。结论:成功构建了重组真核表达质粒pPIC3.5K-gal-2;并借助巴斯德毕赤酵母细胞表达出了gal-2的蛋白,其分子量大约为4.1kDa。该研究为下一步应用基因工程和蛋白质工程技术进行gal-2蛋白的规模化生产奠定了基础。
- 屠利民彭开松涂健王强王莹莹祁克宗
- 关键词：蛋白表达
- 防御素肽研究进展被引量：1
- 2010年
- 防御素是近年来发现的一类具有广谱抗微生物活性的阳离子小肽,由38～100个氨基酸残基组成,且分子内富含二硫键,在天然性免疫和获得性免疫中发挥着重要的作用。由于其具有牢固的分子骨架、广泛的分布及生物活性功能,通过研究开发其在药用方面的价值,为人们替代传统抗生素提供了新途径。作者简述了防御素的结构特征与功能、分布、生物学活性、模拟肽的设计及应用前景。
- 屠利民彭开松王莹莹祁克宗
- 关键词：防御素生物学活性
- Gallinacin-2在毕赤酵母中的分泌表达
- 2011年
- 利用RT-PCR技术,从鸡肺脏总RNA中克隆了Gal-2 cDNA全序列,以克隆载体为模板PCR扩增Gal-2成熟肽cDNA,将成熟肽cDNA插入到分泌型表达载体pPIC9k中,构建pPIC9k-Gal-2成熟肽表达载体;通过电转化方法将表达质粒导入到毕赤酵母GS115体内,阳性克隆菌经甲醇诱导表达,SDS-PAGE蛋白电泳检测在3.9ku附近出现预期大小的条带,灰度扫描显示蛋白表达量占总分泌蛋白量的63.7%。抑菌试验结果表明,表达的防御素对大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑菌活性。
- 王强彭开松严兵涂健屠利民祁克宗
- 关键词：Β-防御素PPIC9K毕赤酵母
- 枯草芽孢杆菌源抗生素研究进展被引量：18
- 2010年
- 枯草芽孢杆菌为革兰阳性菌,其基因组结构复杂,能产生多种抗生素,主要包括肽类物质和非肽类物质。肽类物质可分为两类,一类由核糖体途径合成,另一类由非核糖体途径合成;非肽类物质包括聚酮化合物、氨基糖和磷脂。论文介绍了已知的枯草芽孢杆菌抗生素的结构和生物合成过程,给出一些抗生素的调控途径。概述了枯草芽孢杆菌抗生素除抗菌活性以外其他的生物学活性,为枯草芽孢杆菌抗生素的研究提供参考。
- 王强彭开松严兵屠利民涂健祁克宗
- 关键词：枯草芽孢杆菌抗生素活性基因
