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涂健: 作品数：166 被引量：361H指数：9; 供职机构：安徽农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划安徽省优秀青年科技基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>

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执业兽医背景下《兽医病理学》教学改革与实践被引量：3: 2020年; 为适应国家对兽医学专业人才执业化的发展需求,对兽医专业相关课程进行了有效改革。该文分析了《兽医病理学》课程对于兽医学专业的重要性及教学过程中存在的问题,提出了利用兽医病理学数字化网络教学平台,从改善教学模式、优化教学方法及调整实践教学等3个方面进行了教学改革与实践。; 刘红梅邵颖任春环宋祥军涂健; 关键词：执业兽医兽医病理学教学改革

鸡β-防御素Gallinacin-8基因片段的克隆与序列分析被引量：1: 2008年; 本试验从鸡的肝脏中提取总RNA,根据GenBank公布的鸡β-防御素Gallinacin-8(简称gal-8)基因序列设计2对引物,运用RT-PCR技术扩增出大小为201bp的鸡β-防御素gal-8的基因片段。通过序列分析得知其由66个氨基酸组成,包括20个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸的原片肽及41个氨基酸的成熟肽。BLAST分析表明与GenBank中已公布的序列相比较缺失2个碱基,其同源性达到98%。将该基因克隆进pGEM-T Easy载体中,并转化大肠杆菌感受态DH5α,经筛选和测序鉴定获得了阳性重组质粒。从重组质粒中扩增出的成熟肽,大小约123bp。试验为进一步构建重组核蛋白及表达具有广谱抗微生物活性的防御素提供了实验基础。; 杨涛祁克宗彭开松涂健高恒江龙海; 关键词：Β防御素克隆

APEC感染雏鸡小肠炎症相关基因的RNA-Seq分析被引量：1: 2017年; 【目的】研究禽致病性大肠杆菌(APEC)感染雏鸡小肠炎症相关基因表达的变化。【方法】对14日龄雏鸡腿部肌肉注射0.5mL/羽1×106 CFU/mL的APEC菌液,观察雏鸡的发病情况,并取病变严重雏鸡空肠为测序样品,同时以注射等量生理盐水为对照,采用RNA高通量测序(RNA-Seq)技术,筛选分析感染和未感染APEC雏鸡小肠炎症相关基因表达的变化。【结果】以差异倍数在2倍及以上为标准,从试验组与对照组共筛选出差异表达基因131个。GO分类结果显示,有87个差异基因得到491个GO功能注释,这些基因主要富集在炎症反应、肝素整合、白细胞介素-6的生物合成等过程。基于KEGG分析,仅有29个差异基因得到注释,涉及41个信号通路,主要参与的信号通路有PPAR、花生四烯酸代谢、MAPK等。【结论】APEC感染雏鸡后会引起机体炎症相关基因表达的变化,从中筛选出10个可能在炎症反应中具有重要影响的炎症相关基因。; 王琦祁克宗涂健薛挺王惠珂徐柳柳; 关键词：禽致病性大肠杆菌

鸡β防御素2在毕赤酵母中的组成型表达及其发酵条件的优化被引量：3: 2015年; 合成鸡β防御素2(AvBD2)成熟肽基因,构建重组质粒pGHK-AvBD2;将其电转化至毕赤酵母GS115;Tricine-SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物,琼脂扩散法测定产物的抑菌活性,并测定产物的溶血活性;响应面法优化接种量、装液量和发酵温度。Tricine-SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,在5.8ku位置出现目的蛋白质条带;抑菌活性检测表明,表达产物对粪肠球菌(ATCC29212)、大肠杆菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和巴氏杆菌具有明显的抑菌活性;发酵产物在500mg/L时的溶血活性仅2.17%。由建立的响应面模型得到重组酵母最佳发酵条件为:接种量528mg/100mL、装液量8.43%、发酵温度27.8℃,产物蛋白浓度较优化前提高20%。本研究实现了AvBD2在毕赤酵母中的组成型表达,表达产物有较好的抗菌活性,为AvBD2作为新型饲料添加剂的应用奠定了基础。; 魏海婷祁克宗王尔群吕小龙涂健周秀红刘红梅; 关键词：巴斯德毕赤酵母组成型表达响应面法优化

鸡β-防御素AvBD6基因及其乳酸菌载体的构建方法: 本发明公开了鸡β-防御素AvBD6基因，其序列如序列表所示。参照乳酸乳球菌密码子的偏爱性进行密码子优化处理，将稀有密码子agg、cgg、tgc等优化为偏爱密码子cgt、tgt，设计并合成后命名为Op-AvBD6。本发明还...; 祁克宗汪雪雁段慧周秀红彭开松涂健刘红梅陈玎玎张明付瑞燕薛秀恒; 文献传递

安徽部分地区猪伪狂犬病PCR诊断及流行病学调查被引量：4: 2008年; 针对安徽省部分地区猪伪狂犬病发病率较高,给全省的养猪业造成较大危害的状况,应用聚合酶链反应(PCR)对安徽省7个地区21个养猪场的187头疑似发病猪的血清进行伪狂犬病病毒(PRV)的检测,并对阳性猪的流行病学分布情况进行统计分析。结果显示,安徽省猪PRV平均阳性率为34.2%;其中安徽省南部地区PRV阳性率最高,北部地区最低,规模养殖场PRV阳性率明显低于散养户,其结果为安徽省猪伪狂犬病流行病学调查及防控提供参考资料。; 涂健祁克宗冯梅; 关键词：猪伪狂犬病聚合酶链反应流行病学调查

APEC毒力岛核心基因irp2、fyua缺失对其致病性的影响: 禽致病性大肠杆菌病(Avian Pathogenic Escherichia coli.APEC)是引起禽类高死亡率的重要传染病之一,给养禽业的发展带来了严重危害.而耶尔森菌强毒力岛(high pathogenicity...; 涂健邵颖祁克宗刘红梅黄博言尹磊

内毒素对仔鸡血浆SOD活性及MDA水平的影响被引量：24: 2006年; 为了探讨大肠埃希菌O55∶B5的内毒素(LPS)对仔鸡的损伤机理,将168只仔鸡随机分成4组(n=42),即对照组,100 mg/kgLPS组,200 mg/kg LPS组,300 mg/kg LPS组。灌服内毒素后,分别于2,4,8,12,24,48 h和72 h处死鸡(各时间点均为6只),测定血浆SOD活性和MDA浓度。结果表明,与对照组相比,各剂量组鸡血浆SOD活性均明显降低,MDA含量均明显升高(P<0.05)。且各剂量组之间SOD活性随攻毒剂量的增加而降低,随时间的延长先降低后升高;MDA含量随攻毒剂量的增加而升高,随时间的延长先升高后降低。表明一定量内毒素能诱发鸡体内氧自由基的产生,显著降低机体中SOD的活性和提高MDA的含量。; 王艳萍祁克宗涂健施祖灏刘华陆运战李娜; 关键词：仔鸡内毒素血浆过氧化物歧化酶

基于非标记定量蛋白质组学技术研究RyhB调控禽致病性大肠杆菌酸性耐受力被引量：1: 2017年; 为从蛋白水平上探究ryhb对大肠杆菌酸性耐受力相关基因的影响,本研究采用非标记定量(Label-free)蛋白质组学技术对禽致病性大肠杆菌(APEC)野生株和△ryhb基因突变株进行蛋白质组学的差异性比较,并利用荧光定量PCR技术进行验证。本实验共检测到121个差异表达蛋白,其中44个蛋白的表达水平上调,19个蛋白的表达水平下调。为研究ryhb对表达蛋白的影响情况,并鉴定受其调控的相关基因,从上述差异蛋白中筛选出了hdea、hdeb、gada、gadb等与酸性耐受力相关的蛋白,并在基因水平进行验证。本研究表明,ryhb基因的缺失可能与上述4个耐酸基因转录水平上调相关,进而增强APEC耐酸性。本实验为初步探究ryhb调控通路,对APEC致病性影响提供了一定的实验依据。; 涂健张煜李春晓薛媚王琦祁克宗; 关键词：禽致病性大肠杆菌 RYHB