王软林
- 作品数：11 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山西大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生理学轻工技术与工程更多>>
- 游仆虫肽链释放因子eRF1对编程性翻译移码的影响被引量：4
- 2014年
- 编程性翻译移码是mRNA翻译为多肽链时核糖体沿mRNA正向或反向滑动1个碱基才能表达出1个完整多肽链的现象.人的肽链释放因子eRF1对HIV-1病毒的编程性-1移码有直接的影响.而且在频繁发生编程性+1移码的单细胞真核生物游仆虫中,肽链释放因子eRF1对编程性移码也有明显的影响.为进一步研究eRF1中影响编程性翻译移码的关键序列及调控机理,本研究将含有不同终止密码子的移码序列和已报道的游仆虫移码基因Ndr2分别插入双荧光素酶报告基因中,成功建立了可在酵母中进行研究的编程性移码报告检测体系.利用游仆虫肽链释放因子Eo-eRF1b的N结构域和酵母肽链释放因子Sc eRF1的MC结构域构建了杂合肽链释放因子(Eo/Sc eRF1),检测Eo-eRF1b N结构域中的不同突变位点对移码效率的影响.结果表明,游仆虫肽链释放因子eRF1b中YCF区的突变能明显促进含终止密码UAA的移码序列的移码,推测这可能是由于eRF1突变体降低了对UAA的识别所导致.此外,杂合肽链释放因子Eo/Sc eRF1能够有效地提高移码基因Ndr2的移码效率.eRF1b中YCF区的突变同样能明显促进Ndr2的移码.因此,游仆虫肽链释放因子YCF区的特殊序列可能是这种生物中发生编程性移码频率较高的原因之一.本研究为探讨纤毛虫编程性翻译移码调控机制提供了实验数据.
- 李禄琴胡苗清王软林柴宝峰梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫肽链释放因子
- 一种重组杆状病毒及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种重组杆状病毒及其构建方法和应用，所述重组杆状病毒为将gp64<Sup>TM</Sup><Sup>double</Sup>‑egfp基因通过转座重组整合到杆状病毒－苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV(A...
- 付月君王欢王伟王软林宋莉
- 人mRNA输出因子Gle1与肽链释放因子相互作用上调HeLa细胞中蛋白质翻译终止活性
- 2013年
- Gle1蛋白是一种mRNA核输出因子.最近有研究报道Gle1蛋白参与了酿酒酵母的蛋白质翻译终止过程.为了探讨Gle1蛋白是否在其它生物中也具有同样的功能,本研究利用酵母双杂交、免疫共沉淀以及免疫共定位等方法证实了人Gle1蛋白与参与蛋白质合成终止的两类肽链释放因子均能够相互作用,提示hGle1蛋白可能在人细胞中参与了蛋白质的翻译终止过程.进一步在HeLa细胞中利用双荧光素酶报告系统分析人Gle1蛋白对蛋白质翻译终止的影响,结果显示,hGle1的过表达能促进细胞内蛋白质的翻译终止.为进一步探讨hGle1蛋白在蛋白质合成中的作用机制奠定了基础.
- 刘欢欢张志云王软林梁爱华
- 关键词：肽链释放因子酵母双杂交免疫共沉淀
- 八肋游仆虫胞质核糖体蛋白基因序列特征分析
- 2017年
- 为了探讨八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)核糖体蛋白基因的数目及其结构的特殊性,研究通过生物信息学方法,对八肋游仆虫胞质核糖体蛋白进行了系统的分析。共鉴定得到98个基因编码78种不同的胞质核糖体蛋白。其中19种胞质核糖体蛋白基因发生了复制,尽管都是有功能的,但其中一个基因的表达受到限制。通过与高等真核生物比较,我们发现:八肋游仆虫核糖体蛋白eS30缺失了N端的类泛素结构域,eL6缺失了N端的Ribosomal_L6e_N结构域。另外,不同于其他高等真核生物,八肋游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白uL 10为碱性蛋白。研究为进一步探讨低等真核生物核糖体的组装及功能奠定了基础。
- 王软林赵雪梅张志云梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫核糖体蛋白
- 八肋游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1有2个亚型被引量：3
- 2015年
- 真核生物酸性核糖体磷酸化蛋白(P0、P1、P2)位于核糖体60S大亚基上,它们在核糖体上共同组成一个向外侧凸出的五聚体的柄状复合物[P0·(P1·P2)2],该复合物在蛋白质合成延伸过程中起着重要作用.为了探讨单细胞真核生物核糖体柄状复合物的组成形式及在蛋白质合成中的作用,对八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)的P1进行了研究.通过生物信息学方法,分析八肋游仆虫基因组及转录组数据,找到2个酸性核糖体蛋白P1基因,从DNA和c DNA中都扩增到这2个P1基因,表明八肋游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1确实存在2个亚型.将2个基因克隆后分别构建重组表达质粒p ET28a-P1A和p GEX-6P-1-P1B,在大肠杆菌BL21中获得高效表达.经镍柱和GST柱亲和层析后,获得较高纯度的八肋游仆虫酸性核糖体蛋白Eo P1A和Eo P1B,表达产物经Western印迹检测为阳性.Pull-down分析了Eo P1A和Eo P1B之间的相互作用.结果表明,游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1的2个亚型Eo P1A和Eo P1B之间存在相互作用.
- 佘梅王软林张志云梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫基因克隆表达纯化
- 八肋游仆虫中编程性核糖体移码基因的鉴定及其分子机制研究
- 蛋白质的合成是所有生物体中的基本生命过程。核糖体维持正确的读框对于蛋白质的合成至关重要，一旦发生移码，将会导致截短的或无义蛋白的生成，从而造成翻译能量的损耗，加重细胞清除及质控机制的负担。然而，在某些特殊情况下，翻译中的...
- 王软林
- 关键词：八肋游仆虫转录组质谱分析分子机制
- 一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用，通过对已报道的植酸酶appA基因进行序列及结构分析，找出潜在的胰蛋白酶酶切位点，利用定点突变技术对该基因的胰蛋白酶酶切位点进行替换，获得突变基因appA‑M...
- 梁爱华王茜付月君张志云杜军王软林
- 文献传递
- 一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用，通过对已报道的植酸酶appA基因进行序列及结构分析，找出潜在的胰蛋白酶酶切位点，利用定点突变技术对该基因的胰蛋白酶酶切位点进行替换，获得突变基因appA‑M...
- 梁爱华王茜付月君张志云杜军王软林
