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秦焕焕
作品数:
1
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供职机构:
暨南大学
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
高学娟
暨南大学
刘朗夏
暨南大学
刘小会
暨南大学
淡松松
暨南大学
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秦焕焕
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高学娟
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2012
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PCNA蛋白突变体的真核表达载体构建及鉴定
2012年
目的构建带FLAG标签的细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白Y211A、Y211D突变型重组质粒,真核表达及鉴定。方法以FLAG-PCNA野生型基因为模板,运用PCR定点突变技术扩增出带突变位点的基因序列,将其插入真核表达载体pCMV-N-FLAG,进行双酶切实验和测序验证。然后,利用脂质体将重组质粒转染至293T细胞,Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果 FLAG-PCNA(Y211A)、FLAG-PCNA(Y211D)重组质粒测序结果正确,获得PCNA蛋白突变体。结论成功构建了带FLAG标签的PCNA蛋白Y211A、Y211D真核表达载体,验证了突变型PCNA融合蛋白的表达,为PCNA蛋白功能的深入研究奠定了基础。
刘小会
淡松松
秦焕焕
高学娟
刘朗夏
关键词:
PCNA蛋白
突变体
真核表达
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