耿凤珍
- 作品数：12 被引量：17H指数：3
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- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程文化科学生物学更多>>
- 基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌被引量：5
- 2022年
- 将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.8723(R^(2)=0.9925),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。
- 刘健慧张先舟张蕴哲李兰茹王红静高洁耿凤珍檀建新
- 关键词：聚合酶链式反应沙门氏菌
- 跨越式滚环等温扩增试剂盒检测沙门氏菌的研究
- 2024年
- 沙门氏菌可引起食源性疾病,严重危害食品安全和人类健康。因此,开发新的检测方法尤为重要。本研究基于自主研发的新型核酸扩增方法--跨越式滚环等温扩增,研制了检测沙门氏菌的试剂盒,并对该试剂盒相关性能进行评估。结果显示,试剂盒检测沙门氏菌的特异性良好,灵敏度为4.1×10^(1)CFU·mL^(-1),有效期可达90 d,表明该试剂盒可靠、灵敏、稳定,可满足食品中沙门氏菌快速检测的需求。
- 杨倩张欣张金库耿凤珍王明玉李艳玲
- 关键词：沙门氏菌检测试剂盒
- G-四链体与As-PCR联用可视化检测沙门氏菌被引量：1
- 2023年
- 沙门氏菌是食源性病原菌,常在食品媒介中传播,因此快速检测是控制该病原菌的关键。本研究用沙门氏菌基因组DNA作模板,通过对不对称PCR(As-PCR)扩增条件的优化,证明当非限制性引物HF终浓度0.4μmol/L,与限制性引物GR终浓度比10∶1、退火温度58℃,扩增40个循环时可获得最大浓度的单链DNA(ssDNA)产物。带有G-四链体序列的ssDNA与40μmol/L氯化血红素作用60 min时,G-四链体显示出最高的过氧化物酶活性。在此基础上,将As-PCR和G-四链体联用,实现了可视化检测沙门氏菌invH基因,在2 pg/μL~258 ng/μL的质量浓度区间,质量浓度对数与吸光值A421nm呈线性关系(y=0.0691x+0.3085,R2=0.9729)。对污染的牛奶样品检测,检出灵敏度高,为35 CFU/mL,且操作便捷,为病原微生物检测提供了新技术支撑。
- 刘健慧张先舟张蕴哲王红静李雪瑶耿凤珍檀建新
- 关键词：沙门氏菌
- 关于用Powerpoint制作演示文稿的策略与教学效果的探讨
- 2002年
- 耿凤珍刘冬泉曹丽君
- 关键词：POWERPOINT教学效果多媒体教学计算机辅助教学课件制作
- 食品安全中食源性致病菌现代检测技术的研究进展被引量：3
- 2017年
- 食源性致病菌是影响食品安全的主要因素之一,检测食源性致病菌的传统方法具有操作复杂、周期较长等缺点,因此快速、灵敏的现代检测技术已经成为研究的热点。文章系统地介绍了一些食源性致病菌现代常用的检测方法及新进展,并在此基础上对食源性致病菌检测的研究前景进行了展望。
- 张鹏辉郭梦冉耿凤珍檀建新
- 关键词：食品安全食源性致病菌
- G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌被引量：2
- 2021年
- 建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-四联体的双链DNA,变性后与氯高铁血红素结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶(DNAzyme),并催化H_(2)O_(2)与2,2’-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺盐由无色变为绿色,实现G-四联体与PCR联用对沙门氏菌的可视化检测。在优化的检测体系下,沙门氏菌基因组的质量浓度对数与421 nm处的吸光度具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.1299x+0.2179,R^(2)=0.9945,线性范围0.07~771.6 ng/μL,灵敏度为0.07 ng/μL。特异性分析表明:此方法适用于沙门氏菌属的检测,可成功应用于人工污染沙门氏菌牛奶的检测,检出限为1.2×10^(2) CFU/mL。通过检测30种市售样品,发现其结果与国标检测方法结果一致。本研究为食源性致病菌的检测提供了新的策略。
- 刘健慧耿凤珍张先舟高浩李聪高洁檀建新
- 关键词：沙门氏菌
- 呼吸系统感染的常见致病菌及其药敏分析
- 1996年
- 呼吸系统感染在就诊患者中较为常见,通过对我院(1993～1995)三年间574例呼吸系统感染患者的病原学调查,结果表明:常见致病菌中,革兰氏阳性菌约占9.4％,革兰氏阴性因约占90.6％,这些致病菌对常用抗生素的耐药性呈不同程度的变化.
- 耿凤珍曹丽君胡丽儒
- 关键词：致病菌抗生素
- 携带NDM-1阴沟肠杆菌尿路感染株临床特点回顾性报告被引量：4
- 2014年
- 目的对2012年7月分离自住院患者尿液标本携带NDM-1阴沟肠杆菌的临床特点、检测过程进行回顾性分析,探讨其耐药特征及产生机制,对控制"超级细菌"的流行提出意见。方法依照CLSI标准,采用K-B法和MIC法检测耐药性,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序。结果此株阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南等15种7个类别抗生素均显示耐药,改良Hodge试验阳性,金属酶表型初筛试验阳性,经基因扩增并测序后,与Genebank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性,并经河北省CDC确证报告该菌株为携带NDM-1阴沟肠杆菌。结论该尿路感染携带NDM-1基因金属酶的阴沟肠杆菌株,其产生可能与患者年老体差、恶性肿瘤伴长时滞留尿管并长时多次应用过多种抗生素有关,因此特别强调严格侵入性导尿及滞留时限指征、规范抗生素使用,做好重点消毒、隔离,控制多重耐药株发生。
- 曹丽军杨靖耿凤珍李慧卿史峥时东彦
- 关键词：阴沟肠杆菌碳青霉烯类抗生素
- 两株携带NDM-1型金属β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的临床特征研究被引量：2
- 2015年
- 目的调查分析两株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌临床资料,探讨NDM-1产生的根源及预防和控制的措施。方法收集2012年7月医院培养两株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序。结果两株阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均>8μg/ml,改良Hodge试验阳性,金属酶表型初筛试验阳性,经基因扩增并测序后,与Genebank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性,临床资料显示,该两株菌有一定的同源性,可能有共同的传播途径。结论对碳青霉烯类抗菌药物高度耐药的阴沟肠杆菌有传播的趋势,通过消毒等措施能得到控制。
- 曹丽军李慧卿耿凤珍史峥时东彦
- 关键词：阴沟肠杆菌碳青霉烯类抗菌药物
- 尿液常规分析中假阴性的探讨及应注意的问题
- 2002年
- 耿凤珍曹丽君孙立红
- 关键词：尿液分析干化学法假阴性
