蒋雯
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
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- 心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子对兔骨髓间充质干细胞自体移植的影响
- 2004年
- 目的:了解骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性,及同时心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)对此过程的影响。方法:将21只兔结扎左前降支制作急性心肌梗死模型,骨穿抽取骨髓,分离培养扩增MSCs。随机分成3组,术后2周进行心肌梗死瘢痕内移植5-溴脱氧尿嘧啶(bromodeoxyuridine,BrdU)标记的MSCs(加或不加bFGF)(MSCs组、MSCs+bFGF组),对照组注射培养基。心肌梗死手术前、手术后3d及移植后4周做超声心动图检测心功能,处死动物取左室标本作冷冻切片,采用免疫荧光法鉴定植入细胞,并检测VIII因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果:两细胞移植组左室切片中均可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞。对照组未见BrdU染色阳性细胞。VIII因子阳性内皮细胞计数表明MSCs组及MSCs+bFGF组毛细血管密度分别为每高倍视野29±8和31±6,显著高于对照组(21±5)(F=11.971,P<0.01),超声心动图检测证实MSCs组及MSCs+bFGF组移植后4周射血分数显著大于对照组(F=5.850,P<0.05),两细胞移植组间上述各项差异无显著性意义(P>0.05)。结论:缺血心肌内注射MSCs可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌,促进血管新生从而改善心功能。
- 蒋雯林国生李庚山徐红新钱海燕吕菁君王晶周青
- 关键词：骨髓细胞自体成纤维细胞生长因子
- 不同诱导条件对小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究
- 2004年
- 目的 :比较小鼠胚胎干细胞 (ESC)在不同诱导条件下分化为心肌细胞的分化比率。方法 :用鼠胚成纤维细胞(MEF)作为饲养层促进 ESC增殖并抑制其分化 ,用维甲酸 (RA )、二甲基亚砜 (DMSO)、转化生长因子β1 (TGF-β1 )、激活素 - A(activin- A)为分化诱导剂 ,采用三步法诱导 ESC分化为心肌样细胞 ,并比较各组分化比率。结果 :各组实验用的各种诱导剂均能诱导 ESC分化为心肌样细胞 ,尤以 TGF- β1 (2 ng/m l)、activin- A(2 0 ng/ml)及 2 0 %胎牛血清 (FCS)组成的分化培养基可以使其分化比率高达 88% ,显著高于其它各组 (P<0 .0 1)。结论 :以 MEF饲养层培养 ,TGF- β1 、activin- A作分化诱导剂可作为一种比较简便、稳定、高效的 ESC分化条件。
- 钱海燕李庚山徐红新吕菁君蒋雯王晶
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化
- 兔骨髓间充质干细胞自体移植治疗急性心肌梗塞被引量：2
- 2004年
- 目的 :了解骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)在缺血心肌中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法 :结扎兔左前降支制作急性心肌梗塞 (acutemyocardiuminfarction ,AMI)模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离、培养、扩增骨髓间充质干细胞。术后 2周进行心肌梗塞瘢痕处移植 5 溴脱氧尿嘧啶 (Bromodeoxyuridine,Br dU)标记的骨髓间充质干细胞 ,对照组注射培养基。AMI术前、AMI术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周用导管检查法测左室压力变化 ,随后处死动物取左室标本切片 ,采用免疫荧光方法鉴定植入细胞。结果 :细胞移植组左室切片中可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。超声心动图检查证实MSCs移植后 4周左室收缩末期直径 (LVESD)、舒张末期直径 (LVEDD)均小于对照组 (分别为P <0 .0 1及P <0 .0 5 ) ,小轴缩短率 (△D % )、射血分数 (EF)均大于对照组 (均为P <0 .0 1 )。导管测压显示MSCs移植组左室舒张末期压 (LVEDP)低于对照组、左室压上升及下降最大速率 (±dp/dt)高于对照组 (均为P <0 .0 1 )。 结论 :缺血心肌内注射骨髓间充质干细胞可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗塞心肌 ,显著改善心功能 ,可用于心肌梗塞的治疗。
- 蒋雯林国生李庚山王晶徐红新吕菁君钱海燕周青
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞移植心肌梗塞
- 兔骨髓间充质干细胞自体移植对缺血心肌心功能的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 :了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死 (MI)的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法 :结扎兔左前降支制作急性MI模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增MSCs ,其中一组于培养基中加入 5 氮胞苷 (5 aza) 10 μmol/L。术后 2周进行MI瘢痕内移植 5 溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)标记的MSCs,对照组注射培养基。MI术前、术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物取左室标本作冰冻切片 ,采用免疫荧光方法鉴定植入细胞。结果 :细胞移植组左室切片中均可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。超声心动图检测证实移植后 4周细胞移植组左室收缩末期直径、舒张末期直径均小于对照组 (分别为P <0 .0 1及P <0 .0 5 ) ,小轴缩短率、射血分数均大于对照组 (均P <0 .0 1)。导管测压显示细胞移植组的左室舒张末期压低于对照组、左室压上升及下降最大速率高于对照组 (均P <0 .0 1)。加 5 aza细胞移植组与不加 5 aza组上述各指标差异无统计学意义。结论 :缺血心肌内注射MSCs可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,显著改善心功能 ,可用于MI的治疗。
- 蒋雯林国生李庚山王晶徐红新钱海燕吕菁君周青
- 关键词：骨髓间充质干细胞干细胞移植心功能
- 诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :分别使用布法罗大鼠肝细胞 (buffaloratsliver,BRL)条件培养基或鼠胚成纤维细胞 (mouseembry onicfibroblast,MEF)饲养层体外培养 ,比较不同培养条件对胚胎干细胞 (embryonicstemcells,ESC)分化为心肌细胞的影响。方法 :用BRL条件培养基或MEF饲养层抑制ESC分化并保持其增殖 ,以维甲酸 (retinoicacid ,RA)、二甲基亚砜 (DMSO)、转化生长因子 β1(TGF β1)、激活素 A(activin A)为分化诱导剂 ,组合成 6种分化培养基 ,采用悬滴、悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞 ,比较各组分化比率。结果 :BRL及MEF饲养层两种条件均能促进ESC增殖 ,6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞 ;其中以BRL条件培养基培养 ,TGF β1(2ng·ml-1)、activin A(2 0ng·ml-1)及 2 0 %胎牛血清 (fetuscalfserium ,FCS)组成的分化培养基可以使 (92 .8± 2 .2 ) %的ESC分化为心肌细胞 ,分化比率显著高于其它各组 (P <0 .0 1)。结论 :以BRL条件培养基培养 ,TGF β1、activin A细胞因子组合是一种理想的ESC体外分化体系。
- 钱海燕李庚山徐红新吕菁君蒋雯王晶
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化成纤维细胞
- 兔骨髓间充质干细胞自体移植及血管新生修复梗死心肌的实验研究被引量：3
- 2003年
- 目的 了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法 结扎兔左前降支 (LAD)制作急性心肌梗死(AMI)模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增骨髓间充质干细胞。术后 2周进行心肌梗死瘢痕内移植 5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的骨髓间充质干细胞 ,对照组注射培养基。AMI术前、AMI术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物模型 ,取左室标本做冰冻切片 ,采用免疫荧光方法检测BrdU鉴定植入细胞并检测Ⅷ因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果 细胞移植组左室切片中可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。Ⅷ因子阳性内皮细胞计数表明细胞移植组毛细血管密度大于对照组 (P <0 0 5 )。超声心动图检查证实MSCs移植后 4周左室收缩末期直径 (LVESD)、舒张末期直径 (LVEDD)均小于对照组 (分别为P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,小轴缩短率 (ΔD % )、射血分数 (EF)均大于对照组 (均P <0 0 1)。结论 兔缺血心肌内注射骨髓间充质干细胞可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,可能伴有移植区域新生血管形成 ,能显著改善心功能 ,可用于心肌梗死的治疗。
- 蒋雯林国生李庚山王晶徐红新吕菁君钱海燕周青
- 关键词：心肌梗死骨髓间充质干细胞移植血管新生细胞分化
- 比较体外不同条件诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究被引量：4
- 2004年
- 目的比较体外不同分化条件下胚胎干细胞(ESC)分化为心肌细胞的分化比率。方法用布法罗大鼠肝细胞(BRL)条件培养基抑制ESC分化及保持其增殖,以维甲酸(RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)及激活素-A(activin-A)为分化诱导剂,组合成6种分化培养基,采用悬滴悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞,比较各组分化比率。结果6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞,其中以TGF-β1(2μg/L)、activin-A(20μg/L)及20%胎牛血清(FCS)组成的分化培养基可以使高达9280%±222%的ESC分化为心肌细胞,分化比率显著高于其它各组(P<001)。结论以BRL条件培养基培养,TGF-β1、activin-A作分化诱导剂可作为一种理想的ESC体外分化体系。
- 钱海燕李庚山徐红新吕菁君蒋雯王晶
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化
- 转染与未转染phVEGF165的骨髓单个核细胞移植对心功能影响的实验研究
- 2007年
- 目的:观察转染与未转染phVEGF165的骨髓单个核细胞(BM-MNC)移植对心肌梗死后心功能的影响。方法:结扎家兔冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死(AMI)模型。随机分为3组:①BM-MNC+ph-VEGF165组(n=7):梗死心肌边缘注射转染了phVEGF165的自体骨髓细胞;②BM-MNC组(n=7):梗死心肌边缘注射未转染phVEGF165的自体骨髓细胞;③AMI对照组(n=7):梗死心肌边缘注射等量无血清培养基;④假手术组(n=5):只穿线,不结扎。AMI后第3天抽取股骨骨髓,分离单个核细胞培养。并于AMI后14d进行细胞移植。细胞移植后28d,采用超声心动图,并结合心脏重量指数及血流动力学等参数评价转染与未转染ph-VEGF165的骨髓细胞移植对心功能的影响。结果:与假手术组相比,AMI组左室舒张末期压明显升高(P<0.05),而左室短轴缩短率、左室壁厚度/左室内径、射血分数以及左室收缩压、压力变化率最大值均显著降低(P<0.05),然而,与AMI对照组相比,细胞移植组左室舒张末期压显著降低,而左室短轴缩短率、左室壁厚度/左室内径、射血分数以及左室收缩压、压力变化率最大值明显升高。同时我们发现,与未转染phVEGF165的骨髓单个核细胞移植相比,转染了phVEGF165的骨髓单个核细胞移植对心肌梗死后心功能的改善更为显著。结论:骨髓单个核细胞移植能明显改善心功能,并防止AMI后左室重构发生。转染phVEGF165的骨髓单个核细胞移植更加有效。
- 徐红新江洪蒋学俊吕菁君蒋雯钱海燕周青李庚山
- 关键词：心肌梗死骨髓细胞心功能
