蔡艺钦
- 作品数：8 被引量：4H指数：1
- 供职机构：集美大学更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项国家自然科学基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种新的海洋微藻病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其活性分析被引量：1
- 2014年
- 从海洋球石藻 Emiliania huxleyi 病毒 EhV99B1的基因组中克隆了丝氨酸蛋白酶（Sp）基因（GenBank 登录号：KC161207），对该基因的开放阅读框（ORF）进行系统的生物信息学分析，并在大肠杆菌中融合表达，通过亲和层析法获得了纯化的重组 Sp。结果表明：EhV99B1-Sp 基因的 ORF 为1110 bp，编码368个氨基酸，蛋白相对分子质量为39．5 kDa；该基因片段与 GenBank 中 EhV86-Sp 的同源性很高，核苷酸及其对应的氨基酸序列同源性分别为95％和97％，而与其他物种 Sp 序列的同源性仅为28％～32％，说明其可能是丝氨酸蛋白酶家族中的一个新成员；预测的二级结构特征显示EhV99B1-Sp 的蛋白结构域中具有典型的 LTAGHC （组氨酸活性位点区域）和 AICNGDSGGPLF（丝氨酸活性位点区域）两个丝氨酸蛋白酶催化活性位点的氨基酸基序，是一个两次跨膜蛋白；将该基因在大肠杆菌中进行低温诱导表达，得到分子量为60 kDa 的重组蛋白，经鲤鱼肌肉丝氨酸蛋白酶（MB-SP）抗体检测证实为 Sp，且重组蛋白在大肠杆菌细胞中具有明显的生物学活性。本研究结果为进一步探讨 EhV99B1-Sp 在病毒与宿主相互作用过程中的调节作用及其功能与应用奠定基础。
- 李丽华邱健健蔡艺钦于鹏刘静雯
- 关键词：丝氨酸蛋白酶基因克隆活性分析
- 病毒介导的海洋球石藻(Coccolithophores)鞘脂类代谢调控被引量：1
- 2016年
- 海洋球石藻(Coccolithophores)是一种全球广泛分布且具有重要生态功能的真核浮游植物,有些种类是大洋和近岸常见的赤潮种。自然海域中,病毒感染是导致球石藻死亡和赤潮消亡的一个关键因素。基于一株海洋球石藻Emiliania huxleyi及其特异性裂解病毒全基因组测序注释的结果,研究者们发现病毒可能通过基因横向转移从宿主基因组中获取了一系列与鞘脂类代谢相关的关键酶基因,进而在一定程度上掌控了宿主鞘脂类代谢,大量合成、积累病毒性鞘脂类物质,并最终诱导宿主细胞以凋亡的形式死亡。因此,病毒介导的宿主鞘脂类代谢在调节病毒与宿主间相互作用中具有重要意义。本文着重综述海洋球石藻病毒与宿主间的基因横向转移、病毒介导的宿主鞘脂类代谢特点及其生态学意义,以期深入了解海洋球石藻病毒与宿主间复杂的相互作用关系。
- 马亚瑞刘旭宏蔡艺钦李健刘静雯
- 关键词：生态学意义
- 一种高产神经酰胺基因工程海洋球石藻株的构建方法
- 本发明公开了一种高产神经酰胺基因工程海洋球石藻株的构建方法，包括以下步骤：步骤一、PCR扩增海洋球石藻病毒EhV99B1丝氨酸棕榈酰转移酶；步骤二、重组质粒pMD19?T?SPT的制备：PCR电泳产物经DNA回收试剂盒回...
- 刘静雯薛婷蔡艺钦李健
- 文献传递
- 海洋球石藻病毒(Coccolithovirus)硫氧还蛋白(Trx)在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的表达及其活性分析被引量：1
- 2012年
- 从实验室保存的pBS-Trx重组质粒中克隆球石藻病毒EhV-Trx基因,构建毕赤酵母重组表达载体pPIC9K-EhV-Trx,将重组质粒电转化毕赤酵母GS115,诱导分泌表达并对重组蛋白进行二硫键还原酶活性分析。结果表明,EhV-Trx基因开放阅读框为591bp,编码197个氨基酸;在毕赤酵母GS115中成功诱导表达重组EhV-Trx,经SDS-PAGE分析目的蛋白分子量约为27.8kDa;重组EhV-Trx具有二硫键还原酶的活性,能有效打开胰岛素A、B两条链的二硫键,有望开发成一种新型的硫氧还蛋白脱敏制剂应用于食品安全领域。
- 蔡艺钦张稚兰罗邦彬刘静雯
- 关键词：硫氧还蛋白毕赤酵母活性分析
- 一种高产神经酰胺基因工程海洋球石藻株的构建方法
- 本发明公开了一种高产神经酰胺基因工程海洋球石藻株的构建方法，包括以下步骤：步骤一、PCR扩增海洋球石藻病毒EhV99B1丝氨酸棕榈酰转移酶；步骤二、重组质粒pMD19‑T‑SPT的制备：PCR电泳产物经DNA回收试剂盒回...
- 刘静雯薛婷蔡艺钦李健
- 文献传递
- 海洋球石藻（Emiliania huxleyi）遗传转化系统的建立及初步功能分析
- 海洋球石藻（Coccolithophores）是一类单细胞海洋微型浮游植物,广泛分布于世界范围的近海和大洋水域中,在地质学、生物地理学、古气候学、生态生理学、材料科学和医学等领域中具有重要的研究价值。作为大洋环境中重要的...
- 蔡艺钦
- 关键词：神经酰胺
- 文献传递
- 海洋球石藻(Emiliania huxleyi)通用表达载体的构建与电转化
- 2016年
- 海洋球石藻Emiliania huxleyi是一种全球广泛分布的真核浮游植物,该种不仅是海洋碳、硫循环和全球气候变化的重要指示物种,而且能够产生丰富的次级代谢生物活性物质,在生物技术领域也具有很好的应用前景。本文通过分析氨苄青霉素、卡那霉素、G418、氯霉素、链霉素、新生霉素及嘌呤霉素等7种常用抗生素对海洋球石藻生长的影响,确定G418可作为该藻阳性转化藻株的抗性筛选试剂,其对应的抗性基因neo则作为该藻表达载体构建中的抗性筛选标记。在此基础上克隆了绿色荧光蛋白基因gfp、抗性标记基因neo及E.huxleyi BOF92内源性岩藻黄素-叶绿素a/c结合蛋白基因的启动子fcp,以pUC18为基础载体,构建了pUC18-fcp-gfp和pUC18-fcp-neo两个重组表达载体,以电转化方法共转化球石藻细胞并结合选择性固体培养基筛选,成功获得了被转化的球石藻细胞。海洋球石藻遗传转化系统的建立为进一步开展该种相关的基础生物学研究及其在生物技术领域的应用奠定了基础。
- 王薛婷郭强强蔡艺钦陈志福李健刘静雯
- 关键词：电转化
- 海洋球石藻真核表达载体的构建方法
- 海洋球石藻真核表达载体的构建方法，涉及一种海洋微型浮游植物。提供一种海洋球石藻真核表达载体的构建方法，构建的真核表达载体能够运用于对海洋球石藻体内代谢途径研究、作为构建高产神经酰胺基因工程藻株的基础载体。通过构建海洋球石...
- 刘静雯蔡慧农蔡艺钦
- 文献传递
