张建华
- 作品数:16 被引量:34H指数:3
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 鸡β2-微球蛋白及其硒代衍生物的制备和晶体学研究被引量:3
- 2009年
- 禽流感的暴发使得禽类免疫系统的研究显得愈加迫切,而以其他种属的同源β2-微球蛋白作为模板进行结构解析,不能解析鸡β2-微球蛋白(Chβ2m)的晶体结构。为了利用硒原子的反常散射获取Chβ2m晶体X射线衍射的相位信息,本研究以pET21a为表达载体,E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中,用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸Chβ2m。包涵体经提取和稀释复性法复性之后,通过分子筛层析和Resource Q阴离子交换层析进行纯化,产物经SDS-PAGE检验纯度达98%以上。利用悬滴气相扩散法采用与Chβ2m蛋白晶体生长相同的条件,获得了衍生物可供衍射的晶体。通过北京同步辐射装置收集数据,最高分辨率至1.9。
- 张建华高峰彭浩夏春高福
- 一种调控辅助性T细胞功能的方法
- 本发明属于免疫技术领域,研究了一种调控辅助性T细胞CTLA‑4表达水平的新方法,通过在CD4+辅助性T细胞中过表达Th1,Th17型转录因子,研究这些转录因子对CD4+辅助性T细胞的CTLA‑4水平的调控的能力,而后进一...
- 周旭宇张雪洁张建华郭洁
- 一种调控Treg细胞活化的方法
- 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种调控Treg细胞活化的方法,研究结果显示MLL1并不影响胸腺T细胞的正常发育;并且MLL1的缺失并不影响常规T细胞的活化以及IFN‑γ的分泌水平,但是特异性的在Treg细胞中敲除ML...
- 周旭宇王婷张建华
- 文献传递
- 一种急性髓系白血病表位肽SH2B3-P242S的T细胞受体及其应用
- 本发明公开了一种急性髓系白血病表位肽SH2B3‑P242S的T细胞受体及其应用。本发明公开的T细胞受体含有α链和β链,可变区序列分别为SEQ ID No.2的第20‑112位与SEQ IDNo.4的第20‑112位。实验...
- 周旭宇 张秦张建华 徐威
- 分泌IL-35的Treg细胞对肠道炎症免疫应答的调节作用被引量:5
- 2018年
- 目的研究分泌白细胞介素35(IL-35)的新型效应性调节性T细胞(IL-35-Treg)在肠道免疫应答特别是肠炎反应过程中的调控作用。方法利用IL-35报告小鼠,通过流式细胞术分析肠道固有层中IL-35-Treg细胞的比例和特征;使用1.5%DSS自由饮水构建小鼠炎症性肠病(IBD)模型,分析剔除IL-35-Treg细胞对小鼠体重、病理损伤和IFN-1分泌的影响。结果发现肠道固有层中占有最大比例的IL-35-Treg细胞。该群细胞主要来源于胸腺发育的Treg细胞,并且高表达抑制性分子程序性死亡受体1(PD-1);剔除IL-35-Treg细胞后小鼠体内T细胞分泌大量的IFN-γ,加重了DSS诱导的肠炎发生。结论IL-35-Treg在肠炎免疫应答中起到重要的调控作用。
- 魏训东黄满马洁张建华
- 关键词:炎症性肠病调节性T细胞
- 一种优化型HLA-I类转基因小鼠的构建方法
- 本发明公开了一种优化型HLA-I转基因小鼠的构建方法。本发明提供了一种构建抗原提呈能力增强的HLA-I转基因小鼠模型的方法,包括如下步骤:构建hTAP双转基因小鼠;将HLA-I转基因小鼠与hTAP小鼠进行交配,所得双转基...
- 周旭宇张建华张伟黄满
- 文献传递
- 坚强芽孢杆菌三个淀粉酶基因的克隆和表达被引量:8
- 1997年
- 以pUC18为载体,用鸟枪法从产淀粉水解酶的坚强芽孢杆菌725菌株中得到三个产淀粉水解酶的重组质粒,在大肠杆菌中表达。用高压液相色谱分析了三个表达的酶的淀粉水解产物,其中pBA135和pBA150表达的酶的淀粉水解产物主要是麦芽糖,具β-淀粉酶的性质。pBA140表达的酶的淀粉水解主要产物除麦芽糖外还有一糖,三糖和四糖。pBA135编码的酶有较好的热稳定性,60℃保温30min,活性保留70%以上,最适反应温度55-60℃。而在同样条件下pBA150编码的酶仅保留37%的酶活,最适反应温度50℃。
- 陈炜何秉旺张建华陈乃用
- 关键词:坚强芽孢杆菌淀粉酶基因基因克隆基因表达
- 核仁复合孔相关蛋白4在活化T细胞中的功能探索
- 2024年
- 核仁复合孔相关蛋白4(nucleolar complex associated 4 homolog,NOC4L)是一种重要的核糖体生物发生因子。为从翻译调控方面初步探究其在活化后T细胞中的作用,本研究首先利用构建好的Noc4l~(mCherry)转基因报告小鼠,通过流式细胞术检测NOC4L在不同状态下的CD4^(+)T细胞中的表达水平;之后进一步检测在Th1和Th17细胞极化条件下,NOC4L随细胞增殖的表达情况;最后通过一系列体外实验检测在Th1和Th17细胞活化过程中与NOC4L相互作用的蛋白质,探究NOC4L发挥作用的可能机制。结果显示,NOC4L在活化的CD4^(+)T细胞中表达水平增加,并且NOC4L的表达与活化后T细胞的增殖水平及分裂特性密切相关;体外实验发现,在T细胞活化过程中,NOC4L与核糖体组装及增殖代谢相关蛋白之间存在相互作用。本研究为进一步探究辅助性T细胞的转录后调控奠定了基础,对深入理解T细胞的活化和调控机制具有重要意义。
- 尹家军郭洁张建华
- 关键词:活化T细胞翻译调控细胞增殖
- HLA-A11限制性乙型肝炎病毒HBc<Sub>141-151</Sub>表位肽的T细胞受体及其应用
- 本发明公开了HLA‑A11限制性乙型肝炎病毒HBc<Sub>141‑151</Sub>表位肽的T细胞受体及其应用。该T细胞受体包含α链和β链;α链包含三个互补决定区,氨基酸序列分别如SEQ ID No.2的第48‑53位...
- 周旭宇魏训东徐威张建华黄满
- 短芽孢杆菌a-乙酰乳酸脱羧酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达被引量:19
- 1997年
- 用PCR方法扩增短芽孢杆菌α—乙酰乳酸脱羧酶基因,引入原核表达载体pBV220中,得到重组质粒pALDl。pALDl中的ALDC基因在大肠杆菌中高效表达,每毫升发酵液产酶80单位以下,比原始菌株提高200余倍。SDS-PAGE蛋白质分析表明,大肠杆菌DH5α(pALDl)表达的ALDC占细胞总蛋白量的40%以上。研究了重组质粒稳定性,大肠杆菌DH5α(PALDl)和HB101(pALDl)分别在无选择压力下30℃连续培养50代以上,41℃诱导不同时间,DH5α(pALDl)在热诱导5h后,未发现质粒不稳定性,HB101(pALDl)在热诱导3h后,质粒基本稳定,但热诱导5h后,丢失质粒的细胞约占70%。
- 陈炜何秉旺张建华周健陈乃用
- 关键词:短芽孢杆菌乙酰乳酸脱羧酶基因表达大肠杆菌