李晓东
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第二军医大学国际合作肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗CD3人源化抗体恒定区突变体的制备及其生物学活性被引量：1
- 2004年
- 为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中获得了表达 .竞争抑制实验证实hu12F6m具有与原鼠源抗体及hu12F6相似的特异性和亲和力 .增殖实验表明hu12F6m对T细胞的刺激作用明显弱于hu12F6 .实验结果为深入探讨hu12F6m的生物学特性奠定了基础 .
- 李博华王皓杨扬陆斌王华菁张大鹏钱卫珠季军捷李晓东郭亚军
- 关键词：CD3人源化抗体定点突变首剂效应
- Smac对骨肉瘤细胞系Saos-2生长及耐药性的影响被引量：1
- 2003年
- 目的:观察Smac表达对骨肉瘤细胞Saos-2生长和耐药性的影响。方法:构建smac和反义smac表达载体pcDNA-smac 和pcDNA-anti-smac,G418筛选出分别稳定转染pcDNA-smac和pcDNA-anti-smac的骨肉瘤细胞Saos-2。利用流式细胞仪检测各转染细胞的细胞周期分布;绘制各细胞在6 d内的生长曲线以观察各细胞生长情况的变化。同时采用MTT法检测各转染Saos-2细胞对依托泊苷的敏感性。结果:与转染空载体pcDNA3.0的Saos-2细胞相比,转染反义smac的Saos-2细胞G1/G0期比例升高,细胞生长自第4天起明显加快。转染smac的Saos-2细胞的细胞周期及生长曲线无明显差别;依托泊苷作用细胞后,与转染空载体pcDNA3.0的Saos-2细胞相比,转染反义smac的Saos-2细胞的存活率增高;而转染smac的Saos-2细胞的存活率降低。结论:抑制Smac在细胞中表达,可使Saos-2细胞生长加快,增强对依托泊苷的耐受性,Smac在细胞中的过表达可提高Saos-2对依托泊苷的敏感性。
- 金军赵健张霞张瑞萍石梅李晓东吕岩郭亚军
- 关键词：SMAC骨肉瘤细胞系SAOS-2细胞细胞生长耐药性
- Ad.smac腺病毒的构建及其体外抗肿瘤效应的初步研究被引量：3
- 2003年
- 目的 通过细菌内同源重组 ,制备表达全长smac基因的腺病毒 ,初步观察其体外对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 构建含smac基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack smac ,与骨架载体 pAdEasy1在细菌内重组为pAd .smac,经 2 93细胞包装为增殖缺陷性腺病毒。体外感染各种肿瘤细胞 ,用苔盼蓝拒染法观察其对肿瘤细胞的杀伤作用。结果 利用AdEasyTM 系统成功构建了Ad .smac及对照腺病毒Ad .GFP ,多种肿瘤细胞感染Ad .smac后均出现细胞凋亡现象 ,对肿瘤细胞的杀伤率达 30 %以上。结论 利用细菌内质粒同源重组法可快速简捷地制备表达外源基因的腺病毒 ,Ad .smac在体外通过诱导细胞凋亡而有效地杀伤肿瘤细胞 ,为Smac在肿瘤治疗的应用提供了一定的试验参考依据。
- 金军赵健张霞张瑞萍石梅李晓东吕岩郭亚军
- 关键词：腺病毒体外抗肿瘤效应细胞凋亡
- 激活淋巴细胞中TRAIL及其受体表达的初步研究被引量：2
- 2002年
- 的 :探讨静止及激活状态外周血淋巴细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL )及其受体的表达和它们在淋巴细胞生长、增殖中的作用。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测和基因测序确定不同状态淋巴细胞 TRAIL及其受体的表达。结果 :在静止状态外周血淋巴细胞 TRAIL及其受体皆不表达 ,而在激活状态 TRAIL及其受体都存在不同程度的表达。 结论 :TRAIL 及其受体在激活的淋巴细胞中表达增强 ,可能参与其激活调控机制。
- 季军捷卫立辛李晓东吴孟超郭亚军
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体聚合酶链反应DNA淋巴细胞
- Smac在TRAIL诱导人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。 方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流式细胞术及细胞计数法比较 Smac或 Bcl- 2表达不同的细胞的凋亡程度 ,同时以 Western印迹半定量检测细胞胞质内Sm ac表达水平。结果 :Saos- 2细胞在 TRAIL 的作用下出现典型的凋亡样改变。在 TRAIL 作用 Saos- 2细胞时 ,Smac在胞质中的含量明显增加。在 TRAIL 作用 2 4 h后 ,Smac在 Saos- 2细胞中过表达 ,细胞凋亡率由 1 2 .7%增加到 31 .4 %。TRAIL 作用 Saos- 2细胞 4 8h后 ,转染 Bcl- 2的细胞与转染空载体的 Saos- 2细胞相比 ,凋亡率显著降低 (由 2 4 %降至 1 5 % ) ,且胞质中Sm ac的表达水平也明显降低。 结论 :在 TRAIL 诱导的凋亡中 Sm ac起促进作用 ,Bcl- 2可以通过阻止 Sm
- 金军赵健李博华张霞张瑞萍李晓东钱卫珠郭亚军
- 关键词：SMAC人骨肉瘤SAOS-2细胞凋亡凋亡诱导配体
