段建华
- 作品数：83 被引量：117H指数：6
- 供职机构：第三军医大学基础部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队科研计划项目四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 斯氏按蚊PPO1基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究被引量：1
- 2005年
- 目的克隆和分析斯氏按蚊前酚氧化酶基因与约氏疟原虫卵囊黑化关系。方法根据其他昆虫前酚氧化酶基因的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊RNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm-T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定。根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下前酚氧化酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位及与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析。结果获得了1种斯氏按蚊血淋巴前酚氧化酶基因cDNA部分序列,即AsPPO1(600bp),分别与冈比亚按蚊PPO1和大劣按蚊PPO2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含PO保守的铜结合位点CuA(HHWHWHLVYP)序列。在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血淋巴有AsPPO1mRNA表达。结论As-PPO1很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关。
- 杨松黄复生段建华
- 关键词：按蚊疟原虫原位核酸分子杂交
- 2例牛带绦虫病的驱虫治疗疗效观察被引量：1
- 2010年
- 周桃莉陈琳段建华张锡林
- 关键词：牛带绦虫病驱虫治疗
- IL-6对约氏疟原虫配子体感染力的影响被引量：1
- 1997年
- 在血传感染约氏疟原虫后第５４ｈ、７０ｈ分别皮下注射１０００Ｕ人ＩＬ－６或血传感染后第７０ｈ静注２０００Ｕ人ＩＬ－６，在第７２ｈ分别被斯氏按蚊吸血，吸血后第７ｄ解剖蚊胃，观察其感染率、感染度。结果表明：按不同途径、不同时间给感染小鼠注入ＩＬ－６２０００Ｕ，与对照组相比，对按蚊的感染率和感染度无明显影响。
- 黄复生王兴相段建华况明书
- 关键词：IL-6约氏疟原虫配子体感染力疟疾
- 大劣按蚊核糖体蛋白S7cDNA克隆被引量：5
- 2001年
- 徐文岳黄复生张敬如段建华
- 关键词：大劣按蚊核糖体蛋白克隆血细胞
- 斯氏按蚊血淋巴酚氧化酶与约氏疟原虫卵囊黑化的关系被引量：7
- 2000年
- [目的 ]探讨酚氧化酶 (phenoloxidase,PO)与疟原虫卵囊黑化的关系。 [方法 ]以斯氏按蚊 /约氏疟原虫为模型 ,对 4组斯氏按蚊 (不吸血组、吸正常血组、吸感染血组和硝喹组 )血淋巴进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)和凝胶图像分析 ,检测单酚氧化酶 (monophenoloxidase ,MPO)和二酚氧化酶 (diphenoloxidase,DPO)活性。 [结果 ]吸正常血组和不吸血组蚊血淋巴中MPO及o DPO活性无明显差异 ;与吸正常血组或不吸血组相比 ,感染组MPO及o DPO活性无明显变化 ,但用药组d1 0 则显著增加 ,d1 5 显著降低。 [结论 ]斯氏按蚊血淋巴中PO活性变化与约氏疟原虫卵囊黑化在时间上一致。
- 时超美黄复生况明书段建华
- 关键词：约氏疟原虫斯氏按蚊血淋巴酚氧化酶
- 斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆及由体定位被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,并研究该酶在斯氏狸殖吸虫的表达部位。方法 通过RT-PCR方法扩增斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,TA克隆入pUCm-T载体,鉴定、测序;利用DNASIS程序推导其编码氨基酸序列,并比较分析与其相关虫种半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列同源性。采用地高辛标记原位杂交技术检测该酶基因在斯氏狸殖吸虫成虫的表达及组织定位。结果 经RT-PCR和对阳性克隆鉴定、测序后获得一cDNA序列,长495bp;同源性分析结果显示,该序列与相关虫种的半胱氨酸蛋白酶存在较高同源性,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。原位杂交结果显示斯氏狸殖吸虫成虫的肠管上皮呈阳性着色。结论 克隆获得了斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶的表达部位主要为肠管上皮。
- 王英张锡林张艳玲段建华张敬如黄复生
- 关键词：斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆
- 约氏疟原虫感染后大劣按蚊血淋巴的初步分析
- 2006年
- 王英张锡林段建华许颖张健黄复生
- 关键词：大劣按蚊血淋巴SDS-PAGE电泳
- 斯氏按蚊总RNA的提取与标本保存方法的研究被引量：5
- 2002年
- 本研究利用Tripure试剂盒 ,成功地提取了斯氏按蚊总RNA ,并对不同方法保存的标本所提RNA的质量进行了比较 ,结果显示新鲜标本所提RNA质量最高 ,将标本在Tripure提取液中匀浆后置于 4℃保存的方法 ,较其它两种方法保存效果更好 ,此方法保存的标本 5天内进行RNA提取 ,能够保证质量。
- 王英张锡林徐文岳段建华
- 关键词：斯氏按蚊总RNA标本
- 大劣按蚊血淋巴酚氧化酶与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究被引量：14
- 2001年
- 目的 探讨大劣按蚊血淋巴酚氧化酶 (PO)与约氏疟原虫卵囊黑化的关系。方法 以大劣按蚊 /约氏疟原虫模型 ,利用聚丙酰凝胶电泳后的酶底物显色法 ,比较、分析血餐后 5、7、11、15d时不吸血组、吸正常血组和感染组 3组的雌大劣按蚊血淋巴酚氧化酶的单酚氧化酶 (MPO)和双酚氧化酶 (o DPO)活性 ;同时观察感染组约氏疟原虫的感染度及其卵囊黑化比率。结果 感染组的血淋巴MPO和o DPO酶活性明显高于不吸血组和吸正常血组 (P <0 .0 5 ) ;但是随着约氏疟原虫卵囊黑化比率的增高 ,感染组血淋巴MPO和o DPO活性逐渐下降。另外 ,吸正常血组的MPO和o DPO酶活性明显高于不吸血组 (P <0 .0 5 )。结论 吸血和约氏疟原虫的感染均能激活大劣按蚊前酚氧化酶级联反应 。
- 徐文岳黄复生张锡林况明书段建华
- 关键词：约氏疟原虫大劣按蚊血淋巴酚氧化酶
- 大劣按蚊血淋巴中疟原虫感染相关蛋白的cDNA克隆
- 2007年
- 疟疾是一种严重的传染病,大劣按蚊是我国及东南亚地区的重要传疟媒介。对大劣按蚊抗疟原虫感染分子机制的研究,具有重要意义。我们先前已成功分离了大劣按蚊血淋巴中约氏疟原虫感染相关蛋白(PIRP1),并对该蛋白进行了质谱检测。本研究在已获得PIRP1质谱检测信息的基础上,利用分子生物学技术,成功克隆了该相关蛋白的部分cDNA序列(GenBank序列号为EF409973)。为下一步对该蛋白的功能研究奠定了基础。
- 王英黄复生段建华周桃莉陈继德
- 关键词：大劣按蚊约氏疟原虫克隆血淋巴
