王树茂
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 麦洼牦牛乳腺上皮细胞系的建立及其生物学特性被引量：2
- 2012年
- 为建立麦洼牦牛乳腺上皮细胞的体外培养方法,采用组织块贴壁法及Ⅰ型胶原酶消化法,从麦洼牦牛乳腺组织中成功分离并获得纯化的乳腺上皮细胞,并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行鉴定。通过细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞接种存活率、细胞活力等生物学特性的检测,建立并鉴定麦洼牦牛乳腺上皮细胞系。结果显示,乳腺细胞形态良好,细胞接种存活率达91%,群体倍增时间26.97h,细胞生长曲线呈典型"S"型,细胞传至25代以上仍保持旺盛的增殖活力。可见,通过对细胞传代及反复冻存和复苏已成功建立麦洼牦牛乳腺上皮细胞系,获得大量的乳腺上皮细胞,使麦洼牦牛物种在细胞水平上得以保存,为建立牦牛乳腺生物反应器及泌乳调控机制研究提供基础。
- 符梅熊显荣高川李宇王树茂李键
- 关键词：麦洼牦牛乳腺上皮细胞生物学特性
- 牦牛HSPA1A和HSPA2基因组织分布的检测被引量：1
- 2013年
- 旨在建立一种检测牦牛HSP70家族应激型HSPA1A和HSPA2基因的实时荧光定量PCR方法。采用普通PCR,结合实时荧光定量PCR方法,检测正常情况下应激型HSPA1A和HSPA2基因在牦牛各组织中的表达分布。结果显示,HSPA1A基因在公牦牛与母牦牛中的表达基本一致,所有组织中均少量表达,肺中最低,肌肉相对表达较高;HSPA2基因在公牦牛与母牦牛中的表达也基本一致,所有组织均少量表达,肺中最低,脑、睾丸和卵巢相对表达较高。该研究结果提示正常情况下HSPA2基因可能在牦牛生殖繁育上发挥一定作用,为进一步研究HSPA1A基因和HSPA2基因在牦牛对环境的适应性方面提供基础资料和研究方法。
- 王树茂兰道亮陈亚冰林宝山李键
- 关键词：牦牛实时荧光定量PCR
- 一种基于SYBR Green I荧光定量的牦牛应激型HSPA1A基因组织表达谱建立
- 本发明公开了一种基于SYBRGreenI荧光定量方法的牦牛应激型HSPA1A基因组织表达谱建立。该表达谱建立包括了如下步骤：（1）牦牛各组织RNA的提取及cDNA合成；（2）引物设计；（3）标准曲线的建立；（4）荧光定量...
- 兰道亮李键陈亚冰王树茂
- 文献传递
- 基于荧光定量的牦牛应激型HSPA2基因表达谱建立
- 基于荧光定量的牦牛应激型HSPA2基因表达谱建立本发明公开了一种牦牛应激型HSPA2基因组织表达分布的SYBRGreenI荧光定量PCR检测方法。该方法包括如下步骤：（1）牦牛各组织RNA的提取及cDNA合成；（2）引物...
- 兰道亮李键王树茂陈亚冰
- 文献传递
- 牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2013年
- 为了解牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型HSPA1A和HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型HSPA1A基因全长2 134bp,开放阅读框全长1 926bp,编码641个氨基酸,分子质量为70.26ku;HSPA2基因全长1 911bp,开放阅读框全长1 911bp,编码636个氨基酸,分子质量为69.85ku。将HSPA1A和HSPA2基因开放阅读框编码的氨基酸序列进行ScanProsite分析,均得到3个HSP70蛋白家族标记。核苷酸序列同源性分析表明,HSPA1A和HSPA2基因具有较高的保守性,牦牛与牛的HSPA1A和HSPA2基因核苷酸序列同源性最高,分别为99.8%和99.1%。遗传进化关系分析表明,牦牛与牛的应激型HSPA1A和HSPA2基因亲缘关系最近。
- 王树茂兰道亮陈亚冰黄偲李键
- 关键词：牦牛
- 牦牛神经珠蛋白基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2014年
- 参照GenBank中牛神经珠蛋白(Ngb)基因序列,设计引物并从牦牛脑组织中克隆出牦牛Ngb基因。基因序列分析表明,牦牛Ngb基因编码区全长456bp,开放阅读框为456bp,编码氨基酸151个,分子质量16ku,理论等电点为4.859。蛋白预测结果表明,Ngb编码蛋白整体表现为亲水性。同源性分析表明,13条序列中牦牛与牛、藏羚羊、绵羊等物种具有较高的同源性,在系统发育树中距离最近,说明Ngb基因序列具有较高的保守性。牦牛Ngb基因序列的成功克隆为进一步对牦牛低氧适应的分子生物学机制的研究提供依据。
- 林宝山兰道亮王树茂陈亚冰黄偲李键
- 关键词：牦牛克隆
- 牦牛Cygb基因的克隆及序列分析
- 2015年
- 【目的】对牦牛Cygb基因进行克隆与序列分析,为进一步深入研究Cygb基因在牦牛对低氧环境适应性中的作用提供理论基础。【方法】参照GenBank中牛的Cygb基因序列设计引物,提取牦牛肝组织RNA,以反转录合成的cDNA为模版,克隆牦牛Cygb基因并进行测序,运用生物信息学软件对所得序列进行分析。【结果】牦牛Cygb基因编码区全长573bp,编码190个氨基酸,编码产物分子质量21.5ku,理论等电点为6.61。蛋白预测表明,Cygb编码蛋白整体表现为亲水性,蛋白质的二级结构主要由α螺旋及延伸链构成。同源性分析表明,11条序列当中牦牛与牛、绵羊等物种具有较高的同源性,在系统发育树中距离最近,其中牦牛与牛的同源性最高,达到99.0%。【结论】克隆到573bp的牦牛Cygb基因编码区全长序列,该序列在哺乳动物中具有很高的保守性。
- 黄偲兰道亮林宝山陈亚冰王树茂李键
- 关键词：牦牛克隆
- 猪NLRC5基因全长克隆及表达量的荧光定量检测方法
- 本发明涉及猪NLRC5基因全长克隆及表达量的荧光定量检测方法，通过材料的处理与准备、RNA的提取cDNA合成、RT-PCR及3’RACE技术获得了NLRC5基因，该基因cDNA全长为6638bp，基因开放阅读框为5538...
- 兰道亮陈亚冰李键熊显荣林宝山王树茂
- 文献传递
