邹冰
- 作品数:5 被引量:16H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 生存素反义核酸诱导肝癌细胞株SMMC-7721凋亡和增加其对抗肿瘤药物敏感性的研究被引量:11
- 2003年
- 背景:生存素是凋亡抑制蛋白家族的重要成员,生存素基因有可能成为肿瘤反义基因治疗的理想靶基因。目的:研究生存素反义核酸诱导肝癌细胞株SMMC-7721凋亡和增加其对常用抗肿瘤药物敏感性的作用,探讨生存素反义核酸用于肿瘤基因治疗的可能性。方法:应用基因重组技术构建pEGFP-C1-生存素反义核酸重组质粒,以脂质体转染法转染SMMC-7721细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存素mRNA的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡。将生存素反义核酸分别与7种常用抗肿瘤药物共同作用于SMMC-7721细胞,用四唑蓝(MTT)比色法测定细胞杀伤率。结果:生存素反义核酸可抑制SMMC-7721细胞中生存素mRNA的表达,从而导致细胞凋亡增加,其作用呈剂量依赖性。生存素反义核酸可增加SMMC-7721细胞对7种常用抗肿瘤药物的敏感性,明显增强药物的杀伤作用。结论:生存素反义核酸能靶向抑制野生型生存素基因的表达,提高肝癌细胞对常用抗肿瘤药物的敏感性,有可能成为肿瘤基因治疗的新方法。
- 张晨莉邹冰谭继宏涂水平马天乐钟捷孙璟乔敏敏江石湖
- 关键词:生存素反义核酸肝癌细胞株SMMC-7721细胞敏感性
- 生存素反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞株凋亡的实验研究
- 2004年
- 背景:生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白家族的成员之一,在肿瘤组织和人类胚胎组织中有高水平表达,在分化成熟的组织中不表达或低水平表达。有研究显示,64.5%~85%的结肠癌组织中存在生存素基因表达,其表达与结肠癌患者的不良预后有关。目的:观察生存素反义寡核苷酸对结肠癌细胞株凋亡的影响。方法:通过基因工程技术构建生存素反义寡核苷酸质粒pcDNA3鄄sur鄄As,以脂质体转染的方法将质粒DNA转入结肠癌细胞株。应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)检测结肠癌细胞株中生存素mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪和碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡,比色测定检测caspase鄄3活性的变化。结果:SW1116、COLO205、HT鄄29和SW1417四株结肠癌细胞株中均有生存素mRNA和蛋白表达。瞬时转染生存素反义寡核苷酸后,4株结肠癌细胞株的细胞凋亡率均明显增加,并呈剂量依赖性(P<0.01);结肠癌细胞株SW1116在荧光显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞中生存素蛋白表达水平明显降低,caspase鄄3活性显著增加(P<0.01)。结论:应用生存素反义寡核苷酸抑制生存素基因的表达能诱导结肠癌细胞株凋亡,以生存素为靶基因的治疗方案可能有助于结肠癌患者的治疗。
- 谭继宏涂水平邹冰马天乐江石湖
- 关键词:生存素基因结肠癌细胞反义寡核苷酸凋亡质粒DNAPCDNA3
- Survivin基因与胃癌细胞凋亡关系的初步研究
- 2001年
- 邹冰涂水平等
- 关键词:SURVIVIN基因胃癌胃癌细胞凋亡分子生物学
- survivin基因介导肿瘤耐药机制及逆转研究
- 江石湖涂水平谭继宏邹冰马天乐钟捷张晨莉史冬梅乔敏敏章永平
- 该课题为survivin基因介导肿瘤耐药机制及逆转研究。该研究结果证实在胃癌细胞株和胃癌组织中生存素(survivin)基因高表达,同样在结肠癌细胞株和结肠癌组织中也存在高表达;成功构建了生存素反义寡核苷酸和Cys84A...
- 关键词:
- 关键词:SURVIVIN基因消化道肿瘤耐药机制
- pEGFP-C1-反义生存素重组质粒的构建和转染被引量:5
- 2002年
- 目的 构建pEGFP C1 反义生存素 (survivin)重组质粒 ,并转染入人MKN 45低分化胃腺癌细胞株。观察转染前后生存素基因的表达及对凋亡的影响 ,从基因水平探讨反义生存素核酸治疗胃癌的分子生物学机制 ,为今后利用反义基因治疗肿瘤提供实验和理论依据。方法 应用基因重组技术构建 pEGFP C1 反义生存素重组质粒 ,通过脂质体转染法转染人MKN 45胃腺癌细胞株 ,以流式细胞仪方法检测细胞凋亡 ,以RT PCR技术检测质粒转染前后生存素基因mRNA的表达。结果 pEGFP C1 反义生存素重组质粒转染MKN 45低分化胃腺癌细胞株后细胞凋亡明显增加 ,G2 /M期细胞减少 ,同时生存素基因在mRNA水平被抑制。结论 反义生存素核酸能抑制细胞增殖 ,减少生存素基因的mRNA表达而促进胃癌细胞凋亡目的 构建pEGFP C1 反义生存素 (survivin)重组质粒 ,并转染入人MKN 45低分化胃腺癌细胞株。观察转染前后生存素基因的表达及对凋亡的影响 ,从基因水平探讨反义生存素核酸治疗胃癌的分子生物学机制 ,为今后利用反义基因治疗肿瘤提供实验和理论依据。方法 应用基因重组技术构建 pEGFP C1 反义生存素重组质粒 ,通过脂质体转染法转染人MKN 45胃腺癌细胞株 ,以流式细胞仪方法检测细胞凋亡 ,以RT
- 邹冰涂水平谭继宏马天乐钟捷乔敏敏付华江石湖
- 关键词:基因重组胃癌细胞凋亡PEGFP-C1重组质粒