郭霭光
- 作品数：16 被引量：69H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 重组蛋白sHLA-G1的原核表达与纯化被引量：4
- 2007年
- 为了进一步在蛋白质水平对人白细胞抗原HLA-G进行分析,利用已经构建好的克隆质粒pGEM-T-HLA-G1,进一步构建了重组原核表达质粒pET28a-sHLA-G1。SDS-PAGE检测表明,重组蛋白sHLA-G1在大肠杆菌(E.coli)中得到稳定表达,原核表达的重组蛋白sHLA-G1主要以包涵体形式存在。包涵体蛋白经充分洗涤、尿素溶解后用钴离子树脂纯化,并用SDS-PAGE和Western印迹进行了分析,鉴定结果表明,该蛋白纯度达到90%以上,并能与HLA-G特异性抗体87G反应。该研究结果为进一步的复性工作奠定了基础。
- 张劲郭霭光丰美福
- 关键词：HLA-G重组蛋白包涵体
- 二硫键稳定单链抗体融合PE38免疫毒素的构建及活性分析被引量：10
- 2006年
- 目的构建二硫键稳定单链抗体(B3dsscFv)融合PE38原核表达载体,实现其高效表达,并对初步纯化后的复性产物的稳定性、对肿瘤细胞的结合和杀伤活性进行测定。方法重叠PCR连接B3抗体的VH和VL片段,并将PCR产物克隆至pET22b表达载体(B3dsscFv-pET22b)。测序正确的PE38基因片段经酶切连接至B3dsscFv-pET22b,构建B3dsscFv-PE38-pET22b表达载体。IPTG诱导转化菌,将表达的包涵体进行变性、复性后用阳离子柱Q-Sepharose进行了初步纯化,ELISA测定此融合蛋白中单链抗体的结合活性及其在37℃的稳定性,并采用MTT法检测其对B3抗原表面阳性细胞HT-29的杀伤作用。结果双酶切鉴定表明成功地构建了B3dsscFv-PE38-pET表达载体,表达产物以包涵体形式存在,占总蛋白量的45%左右。复性后的B3dsscFv-PE38保持单链抗体的结合活性,并且对结肠癌HT-29细胞具有一定的杀伤作用,最大杀伤率可达96%。该蛋白在37℃孵育16h后,仍能保持大部分活性。结论所获B3dsscFv-PE38免疫毒素具备导向和杀伤肿瘤细胞的双重功能和良好的稳定性,为其研制有效的肿瘤免疫治疗靶向药物提供一定的基础。
- 王建丽郑玉玲王保莉郭霭光马茹姜永强
- 关键词：单克隆抗体PE38
- 温度对‘嘎啦’苹果电参数的影响被引量：3
- 2012年
- 研究0℃贮藏‘嘎啦’苹果温度回升到室温(25℃)条件下果实电参数的影响,测定并分析复阻抗等4个电参数随果实温度升高过程的变化。结果表明:在所测试的24个频率下,在0～25℃内,Z、Ls和Rs值的变化趋势相同,都随温度的升高而减小。而Cs值变化与之相反。果实升温到25℃与起始0℃相比,Z和Rs下降显著(P<0.05),而Cs有显著上升(P<0.05)。
- 杜光源唐燕郭霭光张继澍
- 关键词：嘎啦苹果温度电特性
- 太空诱变哈密瓜两性花性状连锁标记的RAPD分析被引量：2
- 2009年
- 以哈密瓜品种‘早皇后’、太空诱变后两性花株突变体及其后代分离群体为试材,采用BSA方法对哈密瓜两性花性状进行了RAPD分析。研究结果表明:在所筛选的490条10-mer随机引物中,只有S1254在两性花株基因池中扩增到750 bp的多态性条带,而在其它基因型的群体中未扩增到此条带。通过对分离群体及其姐妹系进行单株验证,均获得相同的扩增结果,说明S1254750与两性花性状连锁,该标记与两性花性状的遗传距离为4.5 cM。
- 丁群英王涛张瑞廖新福郭霭光
- 关键词：太空诱变哈密瓜RAPD
- 空间诱变育种选育哈密瓜完全花株系的研究被引量：2
- 2009年
- 利用返地式卫星搭载哈密瓜种子"早皇后",对其诱变后代花性型的分离进行了观察,并经田间多代自交,选育出哈密瓜完全花株系材料,为甜瓜育种及其性别分化的作用机理研究奠定一定的种质基础。
- 丁群英张瑞廖新福郭霭光
- 关键词：哈密瓜空间诱变育种
- 人SUMO-2基因原核表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人SUMO-2基因的原核表达载体,纯化融合蛋白GST-SUMO2-SUMO2并以其为抗原免疫家兔,制备人SUMO-2多克隆抗体。方法:用PCR的方法得到人SUMO-2基因并克隆至pET41a(+)原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS诱导融合蛋白GST-SUMO2-SUMO2表达;所获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE电泳鉴定后,免疫家兔制备抗血清,分别采用ELISA、Western blot检测抗体效价和特异性。结果:测序证实重组质粒pET41a(+)-SU-MO2-SUMO2构建成功;SDS-PAGE结果证实获得Mr为52000的GST-SUMO2-SUMO2融合蛋白且为可溶性蛋白;经过GST亲和层析有效纯化;以该融合蛋白免疫家兔制备得到的抗血清经Western blot检测证实能与目的蛋白发生特异性结合,ELISA检测为阳性。结论:获得了人SUMO-2蛋白及特异性多克隆抗体,对进一步研究人SUMO-2及SUMO第二类家族的功能提供了有用工具。
- 杨振宋振安宁王劼郭霭光雷鸣郭泽坤
- 关键词：原核表达蛋白纯化抗血清
- 东亚钳蝎神经毒素基因BmKCT的克隆与表达被引量：3
- 2002年
- 从蝎毒腺中提取总RNA,通过RT-PCR得到东亚钳蝎神经毒素BmKCT的cDNA,将其连接到pUCm-T载体中。序列分析表明,该基因开放阅读框架编码59个氨基酸残基,其中24个为信号肽,其余35个为成熟肽,与Genebank上登录的相同。将蝎神经毒素cDNA再经PCR扩增除去信号肽序列,克隆到pTrcHisA表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导可高效表达分子质量为10ku左右的融合蛋白。表达产物约占菌体总蛋白的25%。
- 张守涛郭霭光肖乐义董建军赵天增薛歧庚孔天翰郭唯
- 关键词：东亚钳蝎克隆蝎毒素CDNA
- 不结球白菜雄蕊心皮化雄性不育系HGMSⅡ特性研究被引量：1
- 2010年
- 对不结球白菜雄蕊心皮化雄性不育系HGMS和HGMSⅡ进行花器形态比较、同功酶分析及结实性研究。结果表明:HGMSⅡ较好地保留了HGMS花瓣萼片化、雄蕊心皮化鲜明特征,而且花瓣EST和POD同功酶酶带与萼片酶带基本相同,心皮化器官EST和POD同功酶酶带与雌蕊酶带相同。与完全雄蕊心皮化的HGMS相比,HGMSⅡ雄蕊心皮化突变主要发生在花药部位,导致花药丧失了产生花粉的能力,从而保留了HGMS不育性稳定、彻底的优良特性。与HGMS相比,HGMSⅡ开花习性明显改善,柱头表面花粉明显增多,雌蕊发育基本正常,单株平均籽粒产量达到8.96 g,较HGMS增加了7.17 g,增幅达401%,结实性得到了显著提高。
- 张彦锋王学芳张新田华丽王俊生郭霭光李殿荣
- 关键词：不结球白菜雄性不育
- SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色新方法的研究被引量：19
- 2001年
- 通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成之后也十分稳定。
- 程冬梅邓志勇郭霭光
- 关键词：染色氯化钙
- 高亲和力抗膀胱癌单链抗体筛选及亲和力测定
- 2009年
- 以膀胱癌细胞系BIU-87膜抗原为亲和底物,从抗膀胱癌噬菌体人源化单链抗体库中筛选出4个高亲和力改形单链抗体.ELISA结果和NH4SCN洗脱法数据显示,它们对膀胱癌细胞膜抗原的亲和活性显著高于鼠源单链抗体.同时以多种蛋白检验了其亲和作用的特异性.
- 晁开黄华樑郭霭光
