颜其贵
- 作品数：242 被引量：860H指数：15
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划成都大熊猫繁育研究基金国家科技部科技人员服务企业行动项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株的分离鉴定被引量：6
- 2006年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属,是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。本研究以出现繁殖障碍的母猪并通过ELISA检测为抗体阳性者的血清为材料,于2000年首次从重庆地区分离出PRRS病毒。母猪血清接种Marc-145单层细胞,经盲传至第四代时出现典型的细胞病变效应(CPE);细胞培养物经电镜观察,发现其中有球形的病毒粒子,粒子大小为40～80nm,核心直径为20～40nm;病毒TCID50为10-4.46/0.05mL;用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒,中和指数为100,并将该地方分离株命名为PRRSV-SCQ株。根据Genbank中PRRSV北美洲株ATCCVR-2332的序列设计一对特异性引物,以PRRSV-SCQRNA为模板,通过RT-PCR扩增其GP5基因片段,并将该片段插入克隆载体pMD18-T的EcoRV位点;测序结果表明该GP5基因序列与PRRSV-VR2332、LV株的GP5基因核苷酸序列同源性分别为99.34%和62.14%,GP5蛋白氨基酸推导序列的同源性分别为97.51%和54.37%,揭示SCQ地方分离株与VR2332株在基因型上更为接近,应属于美洲型。
- 颜其贵郭万柱陈斌袁孟伟王晓玉刘菲唐琼陈永舟李林刚费海军勾朝军袁刚建
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型
- 养殖池塘底泥水体中适用于TaqMan荧光定量PCR的不同DNA提取方法
- 2016年
- 通过人工模拟即在养殖池塘底泥和水样中加入阳性组织处理样品,对人工模拟的底泥样品分别采用磁珠法、酚氯仿法以及吸附柱法进行核酸提取,结果发现底泥含量对磁珠法和吸附柱法病毒DNA提取效果影响较小,而对酚氯仿法病毒DNA提取效果影响较大,且底泥含量较少提取相对较好。3种病毒DNA提取方法中采用混样提取核酸的效果均好于用上清液提取的效果。吸附柱法和磁珠法对病毒DNA提取效果较接近且明显好于酚氯仿法。通过对不同浓度的PEG6000进行浓缩后提取核酸,结果发现原始水样中未检测到Cy HV-2或其含量极低未达到检测限。PEG6000浓度为13%时,核酸浓缩提取效果最佳。本研究为实时监测养殖池塘中的底泥和水体中是否存在病毒提供了一种参考方法,从而更好地维护水产养殖环境的生态安全和促进我国水产养殖业健康可持续发展。
- 佘容郝中香罗丹林华张凤枰廖红陈世界刘耀敏杨苗薛昌华赵珊颜其贵
- 关键词：DNA提取
- 斑点叉尾鮐α-干扰素基因的克隆和原核表达
- 根据GENBANK中发表的斑点又尾鲴干扰素基因序列设计一对引物,采用RT-PCR在斑点叉尾鮐淋巴细胞中克隆出了α-干扰素基因。序列分析显示与已发表的序列同源性在96.5％以上。同时将基因连接到原核表达载体PET-32A(...
- 冯婷颜其贵冯迎春林涛张晓菲
- 关键词：Α-干扰素原核表达基因克隆
- 文献传递网络资源链接
- 斑点叉尾鮰生长激素基因的克隆、进化分析
- 以提取的斑点叉尾鲴脑垂体总RNA为模板,用Oligo(dT)作为引物逆转录(RT)出cDNA后以生长激素的特异引物进行PCR扩增,成功扩增出其生长激素基因。将此基因克隆于pMD18-T vector并经质粒PCR和Xho...
- 颜其贵冯迎春林涛冯婷于辉李华
- 关键词：斑点叉尾鮰生长激素基因克隆进化分析
- 斑点叉尾鮐生长激素基因的克隆、进化分析
- 以提取的斑点叉尾鲴脑垂体总RNA为模板,用OLIGO(DT)作为引物逆转录(RT)出CDNA后以生长激素的特异引物进行PCR扩增,成功扩增出其生长激素基因。将此基因克隆于PMD18-T VECTOR并经质粒PCR和XHO...
- 颜其贵冯迎春林涛冯婷于辉李华
- 关键词：生长激素基因克隆进化分析
- 文献传递网络资源链接
- 猪流行性腹泻的预防与控制被引量：5
- 2010年
- 猪流行性腹泻又称流行性病毒性腹泻,是由冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒引起猪的一种高度接触性肠道传染病。冬季气温变化异常易诱发本病,以呕吐、严重腹泻和脱水为主要特征,给养猪业带来巨大的经济损失。笔者主要从流行病学、临床综合诊断、实验室诊断、疫苗研究等方面,浅谈猪流行性腹泻预防与控制。
- 任玉鹏王利娜颜其贵郭万柱王小玉韩国全
- 关键词：猪流行性腹泻流行病学疫苗研究
- 致林麝猝死的病原豚鼠气单胞菌的分离与鉴定被引量：5
- 2017年
- 为了确定引起两头圈养林麝猝死的主要病原菌,确定合理的临床用药和预防方案,本研究采用血平板对死亡林麝的心、肝、脾、肺、肾等组织器官中可疑病原进行分离,通过菌落形态学观察、革兰染色镜检、16S rDNA序列测定分析、生化试验、致病性试验及药敏试验(DST)进行鉴定。通过16S rDNA基因的系统进化研究发现,从猝死林麝体内分离的细菌与豚鼠气单胞菌S5-3株的同源性高达99.9%,结合生化试验结果进行综合分析,确定致林麝猝死的致病菌为豚鼠气单胞菌。药敏试验结果显示,该菌株对氨苄西林、卡那霉素、链霉素、环丙沙星、头孢哌酮较敏感,对头孢他啶、哌拉西林、庆大霉素、复方新诺明、四环素为中敏,对红霉素、青霉素、利福平、头孢拉定、呋喃妥因存在多重耐药性;通过PCR检测分析,发现该菌株携带耐药基因bla-OXA和bla-PER;动物试验表明,给予小鼠接种3.9×10~8 CFU/0.3 m L的剂量会导致小鼠全部死亡,说明该菌株具有较强致病性。本研究结果对林麝养殖生产中临床用药具有一定的指导意义。
- 龚永平王洪永杨光友郗立新陈珍容任露文继锋易可可颜其贵
- 关键词：林麝豚鼠气单胞菌RDNA致病性试验
- 猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染的实验室诊断及细菌耐药性分析被引量：1
- 2014年
- 2014年8月,四川成都某猪场断奶仔猪表现下痢,眼睑水肿,进行性消瘦,生长迟缓,呼吸困难,呈明显的腹式呼吸,皮肤出现紫红色隆起病变,中央部位还有一个黑点。病死猪剖检可见腹股沟淋巴结肿大出血,腹腔粘连十分严重且有纤维素性渗出;肺脏外观灰色至褐色呈斑驳状并伴有出血,间质增宽、水肿,对称性肉变;肾脏苍白有出血点;脾梗死、质脆;肠道鼓气出血,肠系膜出血;关节肿大,关节液增多。
- 郗立新文彩芳张曼丽颜其贵
- 关键词：猪圆环病毒2型副猪嗜血杆菌耐药性分析细菌眼睑水肿
- 四川宜宾地区规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌耐药性监测及血清型鉴定被引量：8
- 2015年
- 为有效监测四川宜宾地区规模化猪场仔猪大肠杆菌耐药性及优势血清型变化,对采自该地区腹泻仔猪的38株大肠杆菌进行药物敏感性检测和O抗原血清型鉴定。结果表明,菌株对14种药物存在不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、林可霉素、四环素和磺胺嘧啶极度耐药,耐药率分别为100%、100%、92.11%、89.47%;敏感性最高的是庆大霉素,敏感率为68.42%,氧氟沙星、丁胺卡那、环丙沙星和氟苯尼考相对比较敏感;所有菌株至少对4种药物耐受(4耐),最高达14耐。通过血清型鉴定,确定了15种血清型,共27株大肠杆菌,其中以O60、O101和O8为优势血清型。
- 文彩芳郗立新赵珊陈珍容颜其贵
- 关键词：大肠杆菌耐药性血清型
- 源于亲本株PRV Fa的3个基因缺失病毒株PRV TK^-、PRV gE^-/gI^-和PRV TK^-/gE^-/gI^-抵抗强毒攻击的比较研究(英文)被引量：5
- 2008年
- 目的4周龄仔猪24头随机分成4个组(A、B、C和对照组),前3组中各5头分别对应接种对应的缺失毒力基因TK(A)、缺失毒力基因gE/gI(B)和缺失毒力基因TK/gE/gI(C)3个基因缺失株,接种剂量均为105PFU,留1头不接种作为同居猪。免疫14d后以107PFU PRV Fa株滴鼻攻毒所有试验猪,7d后屠宰猪只,采集大脑、小脑、心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、扁桃体、下颌淋巴结和三叉神经节,用光镜和电镜技术观察PRV攻毒后仔猪的器官损伤程度。收集免疫接种后3d内和强毒攻击后5d内的所有猪只鼻腔拭纸,以Southern blots方法测定PRV的组织分布情况。结果表明,收集的10种组织中出现病变的组织比例分别为:对照组为9/10,免疫A组为4/10、B组为3/10、C组为4/10。病理学和超微病例观察表明,对照组和A组中肺脏损伤严重,其他组轻微;对照组中大脑、小脑、三叉神经损伤严重,免疫组轻微;A、B和C疫苗株对潜伏感染的主要靶器官扁桃体损伤程度依次加重。Southern blots分析表明,所有接种缺失病毒的试验猪均可通过鼻腔分泌物散毒,但是排出的病毒不能成功感染同居猪;A、B和C疫苗株免疫后均不能有效阻止PRV Fa攻击后的散毒,但在仔猪大脑和小脑中不能检出病毒。结论接种3个不同基因缺失株A、B和C均能阻止强毒株Fa感染后向大脑和小脑的入侵,并减少强毒对多个器官的损害作用,其中C株的抗强毒感染能力和抗强毒所致损伤能力更佳。
- 颜其贵阳爱国郭万柱徐志文石谦殷华平
- 关键词：伪狂犬病毒
