黄志成
- 作品数：41 被引量：106H指数：6
- 供职机构：杭州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：杭州市科技发展计划项目浙江省医药卫生科学研究基金杭州市医药卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大肠埃希菌LEE毒力岛的临床流行病学调查被引量：12
- 2001年
- [目的 ]了解携 L EE毒力岛大肠埃希菌在杭州不同人群中的流行状况。 [方法 ]应用 PCR技术检测不同临床来源的大肠埃希菌菌株的 L EE毒力岛 ,并对检出的 intimin基因 3'端部分以 PCR法和限制性酶切分析法进一步分型。[结果 ]在杭州市区 2周岁以下的腹泻婴幼儿中 ,携 L EE毒力岛的大肠埃希菌的检出率高达 2 0 .0 % ,而在 2岁以上的腹泻人群中检出率仅为 3.0 %。检获的大肠埃希菌 L EE毒力岛的 intimin基因以 β型为主 (占 45 .0 % ) ,并有 2 0 .0 %不能按本文 PCR方法分型。限制酶切分析表明 ,β型可进一步分为 2个亚型 ,本文分离菌株的 γ型 intimin基因与 EHEC O15 7∶H7933株的 γ型 intimin基因酶切图谱差异较大。检获的携 L EE毒力岛的大肠埃希菌菌株中 ,仅有 1/ 5能用国内目前的致泻性大肠埃希菌诊断血清确定 O抗原。 [结论 ]携 L EE毒力岛大肠埃希菌为杭州市致婴幼儿腹泻的主要细菌性病原。L EE毒力岛的检测应成为 EPEC的诊断和流行病学调查主要手段。
- 潘劲草孟冬梅黄志成斯国静祝水芬姚怀芳王衡施世锋
- 关键词：大肠埃希菌流行病学婴幼儿腹泻
- 市售含对二氯苯防蛀剂对大鼠吸入毒性的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究含对二氯苯防蛀剂对大鼠的吸入毒性。方法急性吸入毒性选用60只大鼠(SD),随机分为6组,每组10只,雌雄各半,组距按1.5倍设计剂量系列。亚急性吸入毒性选用大鼠(SD)随机分组,每组10只,雌雄各半。用静式呼吸道染毒法,分别设700、1 400、2 400 mg/m3剂量染毒,2 h/d染毒,阴性对照为空柜。观察动物行为状态,每实验组末次染毒24 h后进行血液检测,处死动物,取其肝、肾、脾、肺、心脏称重,计算脏体系数,并取相应的组织制备病理切片。结果大鼠急性吸入毒性LC50为8 858 mg/m3。血液检测差异无统计学意义;高剂量组肝肾重量增加;病理切片肝细胞浊肿,肾小管上皮细胞肿胀。结论中、高剂量染毒组对大鼠有一定的毒性影响。
- 寇宇夏勇于新芬项华黄志成
- 关键词：吸入毒性病理
- 杆状病毒和分批补料发酵联用高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D
- 2011年
- 目的利用Bac-to-Bac表达系统和分批补料式培养技术在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中高效表达重组单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2 gD2)。方法 以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因,利用Bac-to-Bac表达系统构建含目的基因的重组杆状病毒。同时采用分批补料式培养技术高密度培养Sf9细胞实现重组gD2蛋白的高效表达。构建豚鼠生殖器疱疹模型,研究重组HSV-2 gD2蛋白的免疫活性。结果在一个5 L生物反应器内,在15 mmol/L葡萄糖、0.4 g/L谷氨酰胺以及45%溶解氧的培养条件下,重组gD2蛋白的产量高达192 mg/L。此外,纯化后的重组gD2免疫能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状。结论 重组HSV-2 gD2蛋白利用杆状病毒和分批补料发酵联用得到高效表达,并表现出良好的免疫原性,为发展HSV-2疫苗奠定了基础。
- 刘涛董惠钧黄志成郑伟祝水芬
- 关键词：昆虫杆状病毒表达系统糖蛋白D分批补料发酵
- SARS防制对策及应急技术应用被引量：1
- 2003年
- 项海青施世锋黄诚孝倪晓平程彬黄志成潘劲草邓晶王建华
- 关键词：SARS防制对策应急技术非典型肺炎
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白在杆状病毒昆虫表达体系中的表达及其免疫效应研究
- 刘涛黄志成刘继峰祝水芬郑伟
- 该项目为杭州市科技局重点专病专科项目(资助课题编号：20080333Q29)。单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)是引起人类生殖器疱疹(genitalherpes，GH)的主要病因，GH90%的病原体为HSV-2。GH近年来发...
- 关键词：
- 关键词：杆状病毒免疫效应
- 埃可病毒9型VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2015年
- 目的原核表达并纯化埃可病毒9型(ECHO9)VP1蛋白,免疫兔子制备多克隆抗体,鉴定重组蛋白的免疫活性,为ECHO9血清学检测试剂和疫苗研究提供依据。方法 PCR方法扩增VP1基因,构建原核表达质粒p ET28a-VP1并转化到大肠杆菌(E.coli BL21),诱导表达并纯化VP1重组蛋白,免疫兔子制备抗VP1多克隆抗体,ELISA检测抗VP1抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性。病毒中和试验鉴定抗体中和ECHO9病毒的能力。结果 VP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP1抗体效价为1∶105。Western blot检测结果显示,抗VP1多克隆抗体可以识别原核表达的VP1蛋白。中和试验显示抗体对ECHO9病毒有中和作用,其效价为1∶10。结论本研究成功原核表达了ECHO9的VP1蛋白并制备出抗VP1多克隆抗体,有助于ECHO9的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究。
- 邱晓枫黄志成张国忠濮小英潘劲草王咪咪
- 关键词：病毒性脑炎VP1基因多克隆抗体
- 聚合酶链反应检测与鉴定人流行性感冒病毒被引量：1
- 2002年
- 目的 建立一个快速、简单、敏感、特异的实验室检测流感病毒的方法。方法 采用RT-PCR、复合RT-PCR方法和HI试验对流行性感冒病毒的参考株（甲1、甲3和乙型各两株）和分离毒株（甲1型1株、甲3型3株）以及可疑流感患者的喉嗽液标本进行检测。结果 采用RT-PCR方法和复合RT-PCR方法均能检测甲1、甲3、乙型的流感病毒参考株和分离毒株,且能根据扩增物的分子量鉴定出其型别与亚型,其结果与HI法完全相符。复合RT-PCR方法从3例可疑流感患者的喉嗽液标本中检测到阳性结果1例,结果同传统鸡胚分离、HI分型方法相同。结论本文建立的RT-PCR或复合RT-PCR方法可应用于常见流感病毒的快速检测及初步分型,复合RT-PCR方法具更高的工作效率。
- 黄志成潘劲草闻洪根王明法
- 关键词：流行性感冒病毒血凝抑制试验
- 杭州地区新生儿腹泻A组轮状病毒VP7型别分析被引量：2
- 2013年
- 目的:研究杭州地区一起新生儿腹泻疫情A组轮状病毒(RV)的VP7基因型。方法:收集杭州某医院2011年7月-2011年8月住院的新生儿腹泻粪便标本10份。采用轮状病毒抗体胶体金试剂盒快速检测RV抗原,荧光RT-PCR方法检测RVRNA,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及巢式聚合酶链反应(net-PCR)进行RV VP7基因分型。结果:检出3份阳性标本,阳性率30%。RV VP7(G)血清型为G1G4G9混合型。结论:此次杭州地区新生儿腹泻疫情RV VP7(G)血清型为G1G4G9混合型。
- 邱晓枫张国忠孙昼黄志成胡国涛潘劲草
- 关键词：轮状病毒腹泻患儿逆转录聚合酶链反应
- 埃可病毒9型荧光RT-PCR快速检测方法的建立及应用被引量：2
- 2017年
- 为了建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测埃可病毒9型病毒核酸,并初步应用于埃可病毒9型的临床标本检测。根据GenBank登录的埃可病毒9型毒株VP1基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan探针。对反应条件进行优化,验证方法的特异性、灵敏度和重复性,同时对疑似埃可病毒9型病例标本进行检测。该方法对埃可病毒9型的检出有高度特异性,与EV71、CA16、CA24v、CA6、CA10、埃可病毒30型等均无交叉反应,检测灵敏度均达0.1TCID50/mL,可从疑似埃可病例粪便标本中直接检测病毒核酸,检测仅需3~4h。本研究建立的埃可病毒9型TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异、灵敏,适用于临床早期诊断。
- 邱晓枫张国忠黄志成潘劲草于新芬
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 临床来源nct-CTXΦ样霍乱弧菌基因的多样性分析被引量：3
- 2007年
- 目的 了解临床来源霍乱弧菌nct-CTXΦ（不含霍乱毒素基因的CTXΦ）样基因特征。方法 对6株于2000-2004年自杭州散发腹泻患者分离的ctxA^-、tcpA^＋ 01群霍乱弧菌核糖体基因分型，PCR检测zot、noe、cep基因及串联CTXΦ基因组拷贝问的相邻片段；以zot、ace、cep基因探针South-ernblot分别检测nct-CTXΦ样基因的PstⅠ、HindⅢ、MluⅠ、BglⅡ酶切及HindⅢ、MluⅠ双酶切的限制性酶切长度多态性，结合拷贝间相邻片段HindⅢ酶切位点分析，构建nct-CTXΦ样基因组物理图谱。结果 6株01群霍乱弧菌中，核糖体基因分型为2种型别；1株无CTXΦ或nct-CTXΦ样基因组，5株存在nct-CTXΦ样基因组，且此5株菌株中存在3种类型nct-CTXΦ样基因组组成，分别为单拷贝长约6kb串联双拷贝、单拷贝长约5．8kb的串联双拷贝和串联4拷贝（2个单拷贝长约6kb，另2个单拷贝长约5．8kb）。结论 nct-CTXΦ霍乱弧菌可能具有引起腹泻的能力；临床和环境来源的霍乱弧菌中存在着一类多样性的nct-CTXΦ样噬菌体家族。
- 濮小英潘劲草孟冬梅叶榕黄志成
- 关键词：霍乱弧菌霍乱毒素
