余晶仪
- 作品数：8 被引量：21H指数：2
- 供职机构：南方医科大学更多>>
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- 肠道病毒71型感染人脑微血管内皮细胞的初步研究被引量：6
- 2014年
- 目的 初步探讨肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）穿血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）的相关机制.方法 用人脑微血管内皮细胞（human brain microvascular endothelial cells,HBMECs）建立体外BBB模型,采用EV71毒株感染HBMECs,并设置阴性对照.通过形态学观察、免疫荧光、透射电镜及实时荧光定量PCR方法探讨EV71能否感染HBMECs,激光共聚焦方法观察EV71能否诱导HBMECs微丝骨架的重排.结果 EV71感染后能诱导HBMECs的细胞病变,细胞内可见EV71抗原红色荧光表达及直径为20～30 nm的EV71颗粒存在,实时荧光定量PCR方法证实EV71能在HBMECs内复制,不同时间水平差异有统计学意义（P＜0.01）.细胞感染EV71后失去正常形态,变得极不规则,胞内微丝排列紊乱,极性消失,微丝聚集在细胞边缘.结论 本研究首次证明EV71可以感染HBMECs并复制,并且可以诱导部分HBMECs的骨架重排.
- 罗文英赵卫彭亮余晶仪张立科张文炳曹虹
- 关键词：肠道病毒71型血脑屏障人脑微血管内皮细胞细胞骨架
- 血小板活化因子受体在伴放线放线杆菌致病过程中的作用
- 2016年
- 目的研究血小板活化因子受体(PAFR)在磷脂酰胆碱(PC)阳性伴放线放线杆菌(Aa)黏附侵袭人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)过程中的作用。方法利用PAFR拮抗剂(CV3988)和抗PAFR抗体作用于HUVEC 30 min后,观察PC阳性Aa对HUVEC黏附和侵袭的影响;并采用MTT法分析PC阳性和阴性Aa诱导细胞损伤的情况。结果采用100、200、500 nmol/L的PAFR拮抗剂预处理HUVEC,显著减少了PC阳性Aa对HUVEC的黏附和侵袭(P<0.001),黏附率分别为对照组的(36.29±3.52)%,(19.04±3.35)%和(7.69±3.19)%;侵袭率分别为对照组的(12.12±1.58)%,(7.08±0.29)%和(2.60±2.26)%。用抗PAFR抗体预处理HUVEC后Aa对HUVEC的黏附率和侵袭率分别为(50.05±5.28)%和(39.09±6.50)%,显著降低了Aa对宿主细胞的黏附和侵入(P<0.001)。采用200 nmol/L和500 nmol/L的PAFR拮抗剂和25μg/m L抗PAFR抗体预处理HUVEC后,PC阳性的Aa与细胞作用以后,细胞的存活率显著升高(P<0.001),从(25.39±9.33)%分别升高到(91.12±3.14)%,(94.12±2.15)%和(65.5±1.87)%。而PC阴性的Aa菌株中,预处理组与未预处理的组相比,细胞活力并没有显著增加(P>0.05)。结论我们发现PAFR在PC阳性的Aa对宿主细胞的粘附、侵袭及诱导胞死亡的过程中发挥了重要作用。
- 王勤轩东英钟德钰屈娅荣余晶仪曹虹章锦才
- 关键词：伴放线放线杆菌血小板活化因子受体人脐静脉血管内皮细胞
- 大肠埃希菌外膜蛋白T水解人防御素-4作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨外膜蛋白T(OmpT)在大肠埃希菌CFT073致尿路感染中的作用机制。方法以人膀胱癌上皮细胞5637的cDNA为模版,扩增人防御素-4(HBD-4)基因,连接至质粒pET-28a,重组质粒经转化、诱导和纯化处理后获得His-HBD-4融合蛋白;采用琼脂糖扩散法和最小抑菌浓度方法检测HBD-4对ompT野生株、敲除株和回补株的抗菌活性,并分别观察比较ompT野生株CFT073、敲除株和回补株水解HBD-4的差异。结果通过测序鉴定及双酶切电泳证实成功构建HBD-4原核表达载体pET-28a-HBD-4,获得HBD-4体外表达菌株;HBD-4对CFT073与ompT敲除株的最小抑菌浓度不同,野生株为10μg/mL,敲除株为6μg/mL;与HBD-4共同孵育后,敲除株的生长状态受到抑制,但对野生株的影响较小。结论初步证实ompT作为毒力因子参与对人固有免疫系统成分的水解,在大肠杆菌致尿路感染的过程中发挥重要作用。
- 屈娅荣赵铁曹曦尤帅余晶仪温扬明张立科曹虹
- 关键词：大肠埃希菌尿路感染
- MUC2基因表达与益生菌抑制大肠杆菌K1株黏附侵袭肠上皮细胞的关系研究
- 一、研究背景
黏蛋白(Mucin)是由体内多种上皮细胞分泌的大分子量糖蛋白。根据其结构的不同可分为分泌型和膜结合型。在正常情况下，黏蛋白除了对上皮细胞组织起保护作用外，还参与上皮细胞的分类和更新，细胞黏附和细胞信号...
- 余晶仪
- 关键词：黏蛋白基因表达益生菌大肠杆菌
- MUC2基因表达对益生菌调节肠屏障作用的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察益生菌诱导的乳鼠结肠MUC2基因的表达及其对益生菌抑制E.coli K1株E44黏附侵袭肠屏障作用的影响。方法 SD乳鼠分别用益生菌、E44株和益生菌+E44株三组灌胃7 d后,RT-PCR法观察益生菌和E44株诱导结肠MUC2基因的表达;靶向MUC2基因的shRNA真核质粒表达载体(shRNA MUC2)和阴性对照shRNA NC转染人结肠癌Lovo细胞,荧光定量PCR法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测MUC2基因对益生菌拮抗致病菌E44粘附侵袭的影响。结果灌胃益生菌组SD乳鼠肠道MUC2基因明显上调,而E44组则显著降低。用shRNA MUC2转染Lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7%;益生菌对E44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,E44相对粘附率为56.64%,相对侵袭率为66.64%。结论益生菌诱导的MUC2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一;MUC2基因沉默后,益生菌对E44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低。
- 余晶仪郝小燕龙敏王勤屈娅荣温扬明张文炳罗军曹虹
- 关键词：MUC2SHRNA益生菌E.COLI
- 宿主抑菌剂美金刚抑制多重耐药菌肠外致病性大肠埃希氏菌（O75:K1:H5）的研究
- 本研究拟通过研究一株临床分离自婴幼儿脑脊液的多重耐药的大肠埃希氏菌（IHE2015）的多重耐药特点（MDR）及系统进化分析,在细胞和动物水平探究作为一种新发现的宿主抑菌剂——美金刚是否可以有效治疗IHE2015感染引起的...
- 王世富何晓龙余晶仪张乐海彭亮盖中涛黄胜和
- 关键词：美金刚
- 文献传递
- 宿主受体α7 nAChR阻断剂盐酸美金刚防治新生儿败血症与脑膜炎的效果与机制研究
- 目的： 新生儿败血症和脑膜炎(neonatal sepsis and meningitis，NSM)是新生儿期感染性疾病中最常见和最严重的疾病，其发病率和死亡率均较高，尤其在早产及低出生体重、极低出生体重婴儿中发病率更...
- 余晶仪
- 关键词：脑膜炎Α7烟碱型乙酰胆碱受体盐酸美金刚
- 应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库被引量：1
- 2013年
- 目的应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库。方法采集登革确诊患者恢复期外周血,分离外周血淋巴细胞并提取其总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库;将抗体基因库转染CHO细胞、用流式细胞仪分析抗体在CHO细胞表面的表达。结果以1.2μg总RNA为模板,用6套引物扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,轻链基因库容量为1.45×104,重链基因库容量为1.8×105;随机挑选的10个轻链克隆和10个重链克隆,经过测序鉴定,轻链有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,重链有7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析含有正确阅读框架的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达,抗体库中可表达的抗体多样性达到109。结论以1.2μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建可表达库容量达到109的登革病毒特异性全长人抗体基因库。
- 温扬明蓝开健王俊洁余晶仪屈娅荣赵卫张复春谭万龙曹虹周辰
- 关键词：登革病毒
