吴兰香
- 作品数：23 被引量：24H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 吉非替尼获得性耐药非小细胞肺癌细胞中差异表达环状RNA分析被引量：4
- 2017年
- 目的 :建立吉非替尼获得性耐药非小细胞肺癌细胞株,并筛选和分析耐药前后差异表达的环状RNA(circular RNA,circ RNA)。方法:利用吉非替尼敏感性非小细胞肺癌细胞株H292(简称为H292_S),采用逐步加药法建立吉非替尼获得性耐药株(命名为H292_R)。CCK-8法检测吉非替尼对2种细胞增殖的抑制作用;RNA测序(RNA sequencing,RNA-seq)法筛选2种细胞中差异表达的circRNA;实时荧光定量PCR法验证RNA-seq结果,并结合统计学和生物信息学方法对差异circRNA来源基因的生物学功能进行分析。结果:吉非替尼对H292_S和H292_R细胞增殖的半数抑制浓度分别为(108.63±0.32)nmol/L和(982.37±2.62)nmol/L,2者间差异有统计学意义(P值均<0.05),耐药细胞H292_R对吉非替尼的耐药指数为9.04。2种细胞中存在36个差异表达circRNA,其中耐药细胞中24个circRNA表达上调(P值均<0.05),12个circRNA表达下调(P值均<0.05);GO富集分析发现,异常表达的circRNA主要涉及调节细胞生长增殖、蛋白转运和基因转录等生物学过程;KEGG通路分析发现,异常circRNA的信号通路主要涉及细胞质DNA感受通路、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、胞吞和凋亡等通路。实时荧光定量PCR法验证2种细胞中差异表达circRNA hsa_circ_0000567和hsa_circ_0000620的表达水平差异,结果显示耐药细胞中这2个circRNA水平均明显上调(P值均<0.05),与RNA-seq结果相符。结论:筛选出吉非替尼获得性耐药相关的差异表达circRNA,这有助于更深入地阐明非小细胞肺癌耐药的机制,并可能为其早期诊断提供生物学标志。
- 代谊黄羽棠黄家凤温纯洁周宏灏吴兰香
- 关键词：基因表达调控吉非替尼
- p75NTR在谷氨酸诱导海马神经元兴奋毒性损伤中的表达
- 2010年
- 目的:观察谷氨酸诱导海马神经元兴奋毒性损伤中神经营养因子受体p75(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)表达水平的变化。方法:建立谷氨酸诱导的新生大鼠海马神经元兴奋毒性损伤模型,RT-PCR和Western blot方法检测p75NTR在mRNA和蛋白质水平的表达变化。结果:谷氨酸刺激后,p75NTR在mRNA(P<0.01)和蛋白质(P<0.05)水平的表达较对照组明显增高;N-甲基-D-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)的特异性拮抗剂MK-801可明显减弱p75NTR在mRNA和蛋白质水平的表达上调(P<0.05)。结论:p75NTR的活化与谷氨酸兴奋毒性神经损伤过程密切相关。
- 吴兰香滕永真李春莉吴明军
- 关键词：谷氨酸兴奋毒性P75NTR
- 一种SPOP基因杂合性缺失的熔解曲线分析检测试剂盒及其检测方法和应用
- 本发明提供了一种SPOP基因杂合性缺失的熔解曲线分析检测试剂盒及其在卵巢癌检测中的应用，该试剂盒使用了卵巢癌抑癌基因SPOP，包括用于高分辨率熔解曲线分析的SPOP特异引物、DNA提取试剂、LC480 HRM maste...
- 杨竹于超余秋波黎刚吴兰香李春莉
- 文献传递
- CYP2C19基因多态性真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立
- 2012年
- 目的:构建细胞色素P450CYP2C19*1、*2、*3真核表达载体,并分别转染人肝癌细胞(HepG2),建立高表达目的基因的稳定转染细胞系。方法:应用化学合成法合成CYP2C19*1(野生型)序列,再以此为模板,体外定点突变PCR法构建*2、*3(突变型)。DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.l(-),经菌落PCR、酶切以及测序鉴定后,脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR、Western Blot分别检测CYP2C19*1、*2、*3 mRNA以及蛋白的表达。结果:成功构建了pcDNA3.1(-)-CYP2C19*1、*2、*3表达质粒,并建立了相应稳定转染细胞系。进一步的RT-PCR和Western Blot检测结果表明,目的基因均得到了稳定的表达。结论:人CYP2C19*1、*2、*3稳定表达细胞系为研究创新药物或新药先导化合物临床前代谢性质的筛选和预测以及为临床潜在药物相互作用提供了有效实验平台。
- 陈旺俞竟屈强张伟李智吴兰香温纯洁周宏灏
- 关键词：CYP2C19基因多态性真核表达转染
- 草酰乙酸对锂-匹罗卡品癫痫大鼠的神经保护作用
- 2012年
- 目的观察静脉注射草酰乙酸(oxaloacetate,OxAc)对氯化锂-匹罗卡品癫痫(lithium-pilocarpine seizures,LPS)模型大鼠的神经保护作用。方法 30只6～8周龄、体质量180～220 g的Sprague-Dawley雄性大鼠按随机数字表法分为5组:生理盐水对照组(用0.9%生理盐水代替匹罗卡品)、LPS模型对照组、LPS+OxAc组(癫痫持续状态终止时注射OxAc 3.5 mg/100 g)、LPS+OxAc+谷草转氨酶(glutamate-oxaloacetate transminase,GOT)组(癫痫持续状态终止时注射OxAc 3.5 mg/100 g+GOT 3.5μg/100 g)及LPS+OxAc+马来酸盐(Maleate)组(癫痫持续状态终止时注射OxAc3.5 mg/100 g+Maleate 6.3 mg/100 g)(n=6)。用氯化锂和匹罗卡品制备癫痫动物模型,诱发癫痫持续状态(status epi-lepticus,SE)60 min后注射安定终止发作。分别检测SE终止后不同时间点各实验组大鼠脑脊液与血液中的谷氨酸浓度、脑电图表现及神经元脱失情况。结果 LPS模型对照组大鼠SE终止后脑脊液与血液中的谷氨酸浓度显著升高,8 h左右达到最高峰,与生理盐水对照组相比,分别升高了约88%和54%,随后开始缓慢下降。在SE终止后静脉注射OxAc可以在8 h内明显降低癫痫大鼠脑脊液中的谷氨酸浓度(P<0.05),8 h后其作用基本消失;OxAc对癫痫大鼠血液中谷氨酸浓度的降低作用可以持续至注射后12 h(P<0.05)。OxAc对癫痫大鼠脑电图表现及海马、齿状回门区神经元脱失现象也有明显改善作用。在应用OxAc的同时,静脉注射GOT可以增强OxAc对LPS大鼠的神经保护作用,而同时应用GOT特异性抑制剂Maleate可以减弱OxAc的上述作用效果。结论静脉注射OxAc可通过促使血液中谷氨酸浓度下降而对氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠的神经起到保护作用。
- 吴兰香王果付利娟温纯洁杨竹王应雄于超
- 关键词：草酰乙酸谷氨酸谷草转氨酶癫痫
- 姜黄素对乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其机制研究被引量：7
- 2015年
- 目的:研究姜黄素对人乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其作用机制。方法:MTS比色法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR与Western Blot方法检测姜黄素处理后,MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白在mRNA与蛋白质水平的表达变化;流式荧光法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞中多柔比星药物浓度的影响;亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法检测姜黄素处理前后MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白编码基因多药耐药基因1(multidrug resistance protein1,MDR1)启动子区甲基化状态的改变。结果:与对照组相比,姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星IC50值显著下降(P<0.05);姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞中的P-糖蛋白在mRNA及蛋白质水平的表达均有显著上调(P<0.05),而细胞内多柔比星的药物浓度下降;MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1基因启动子区域的甲基化程度在姜黄素处理后明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素可增强乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,但同时可显著诱导P-糖蛋白表达水平增高,从而降低细胞内多柔比星药物浓度,此作用与其对MDR1基因去甲基化功能密切相关。
- 王寅声李晓智沈杰李絮温纯洁吴兰香周宏灏
- 关键词：姜黄素MCF-7细胞P-糖蛋白DNA甲基化
- 一种含有OATP1B1启动子和报告基因的重组质粒及筛选OATP1B1诱导剂的方法
- 本发明属于分子药理学领域，涉及一种通过激活孕烷受体(PXR)来调节其下游靶基因有机阴离子转运体1B1表达的诱导剂筛选方法。该方法是通过克隆有机阴离子转运体1B1(OATP1B1)基因的启动子特异性序列(-128to-11...
- 郭成贤吴兰香张伟周宏灏
- 文献传递
- 一种非小细胞肺癌奥希替尼获得性耐药的逆转方法及应用
- 本发明涉及一种非小细胞肺癌奥希替尼获得性耐药的逆转方法及应用。非小细胞肺癌奥希替尼获得性耐药的逆转方法为采用逆转药物与奥希替尼联用实现非小细胞肺癌奥希替尼获得性耐药的逆转，逆转药物选自帕比司他、硼替佐米、卡非佐米、伏立诺...
- 吴兰香王加琪李凌凌
- 姜黄素通过调控组蛋白乙酰化修饰上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1表达被引量：2
- 2017年
- 目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance protein 1,MDR1)表达水平的作用机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法观察姜黄素对MCF-7和MCF-7/DOX细胞生长增殖以及多柔比星敏感性的影响;Realtime PCR和Western blot方法检测姜黄素处理前后两种细胞中MDR1 mRNA和蛋白质表达水平的变化;染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)检测姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。结果:不同浓度姜黄素处理72 h对MCF-7和MCF-7/DOX细胞的生长增殖有显著抑制作用,其IC50值分别为22.03μmol/L和27.46μmol/L;10μmol/L姜黄素处理72 h可显著提高两种细胞多柔比星敏感性,多柔比星IC50值分别下降了57.14%和54.52%(P<0.05);姜黄素处理MCF-7和MCF-7/DOX细胞后,MDR1在mRNA水平分别上调(32.90±0.96)和(5.70±0.55)倍(P<0.05),在蛋白质水平分别上调(2.26±0.18)与(2.90±0.21)倍(P<0.05);CHIP结果显示姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平均有显著上调作用。结论:姜黄素在增强MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的同时,可通过调控MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平而上调MDR1的表达。
- 李絮代谊黄家凤温纯洁邹镇吴兰香王果周宏灏
- 关键词：姜黄素MCF-7多药耐药基因1
- 一种长链非编码RNA lncCSRNP3在非小细胞肺癌EGFR-TKI获得性耐药中的应用
- 本发明属于非小细胞肺癌治疗技术领域，具体涉及一种长链非编码RNA lncCSRNP3在非小细胞肺癌EGFR‑TKI获得性耐药中的应用。本发明的目的是为解决NSCLC治疗中的EGFR‑TKI耐药性提供一种新思路。本发明的技...
- 吴兰香黄羽棠温纯洁
