张振
- 作品数：14 被引量：56H指数：5
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队“十一五”科技攻关课题陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠低氧诱导因子-1α基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的:将大鼠低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)基因转染到骨髓间充质干细胞(Bone marrow mes-enchymal stem cells,BMSCs),为后续基因修饰的BMSCs移植治疗脊髓缺血再灌注损伤提供必要的理论依据。方法:采用直接贴壁法分离,传代培养出纯化的大鼠BMSCs;用电穿孔的方法将构建好的大鼠HIF-1α基因表达载体转染入BMSCs中;通过免疫细胞化学法,鉴定HIF-1α能否成功转染进入BMSCs;RT-PCR检测转染前后HIF-1α在细胞中的表达效果。结果:直接贴壁法能有效分离、纯化大鼠BMSCs;免疫细胞化学法显示转染后BMSCs内充满蓝紫色深染颗粒;RT-PCR结果显示,转染后细胞内HIF-1α基因表达量明显增高。结论:大鼠HIF-1α基因通过电穿孔方法可成功转染到符合试验标准的BMSCs中,并且稳定表达,为进一步研究修饰后HIF-1α基因对BMSCs增殖带来的影响以及治疗相关疾病等方面奠定基础。
- 王君张振张玉明吕苗苗肖志斌高昌俊孙绪德
- 关键词：低氧诱导因子-1Α脊髓缺血再灌注损伤骨髓间充质干细胞电转染
- HIF—1α基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤的效果
- 2013年
- 目的评价低氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因修饰骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤的效果。方法成年健康雄性SD大鼠135只，2月龄，体重200～300g，采用随机数字表法，将其分为4组：假手术组（S组，n=20）、缺血再灌注组（I／R组，n=20）、BMSCs组（n=20）和HIF-1α基因修饰BMSCs组（HIF-1α—BMSCs组，n=75）。采用阻断腹主动脉45min行再灌注的方法制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型，于术后3h时HIF-1α—BMSCs组鞘内注射HIF-1α修饰的BMSCs1×10^6个／5脚，BMSCs组给予BMSCs 1×10^6个／5脚。分别于治疗后1、3、7、14、28d时进行BBB运动等级评分，然后取k。；脊髓组织，测定HIF—lamRNA及其蛋白表达。结果与S组比较，I／R组治疗后1、3、7、14、28d时BBB运动等级评分降低，BMSCs组和HIF-1α—BMSCs组治疗后1、3、7、14d时BBB运动等级评分降低（P〈0．05）；与I／R组比较，BMSCs组和HIF-1α—BMSCs组治疗后3、7、14、28d时BBB运动等级评分升高，脊髓组织HIF-1αmRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）；与BMSCs组比较，HIF-1α—BMSCs组治疗后3、7、14d时BBB运动等级评分升高，脊髓组织HIF-1αmRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）。结论HIF-1α基因修饰BMSCs移植治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤的效果较好。
- 田丽颖王君吕苗苗张玉明张振吕海港蔡承魁张志培高昌俊柴伟徐礼鲜孙绪德
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基间质干细胞移植脊髓
- 丙泊酚对家兔脊髓缺血-再灌注损伤的保护作用被引量：4
- 2009年
- 目的观察丙泊酚对脊髓组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的变化以及神经行为学和脊髓组织病理学改变,探讨丙泊酚对脊髓缺血-再灌注损伤的保护作用。方法60只新西兰大白兔随机均分为三组:缺血-再灌注组(A组)、缺血-再灌注+英脱利匹特组(B组)、缺血-再灌注+丙泊酚组(C组)。采用球囊压迫法建立兔脊髓缺血-再灌注模型。采用Tarlov评分法评价兔复灌后48h神经行为学功能,显微镜下观察L4～L6脊髓组织的病理生理学改变,采用免疫组化法监测复灌后48、72h及1周HIF-1α的变化。结果C组48h神经行为学Tarlov评分[(3.0±1.3)分]明显高于A组[(1.0±1.2)分]和B组[(1.0±1.1)分](P<0.05),A组与B组差异无统计学意义。神经元计数C组(8.5±3.5)显著高于A组(2.3±2.1)和B组(2.2.±2.0)。C组HIF-1α表达较其它两组明显增加(P<0.05)。结论丙泊酚能增加脊髓组织HIF-1α的表达,可能促进下游靶基因的表达,使受损组织的血管再生与重建,从而发挥对脊髓缺血-再灌注损伤的保护作用。
- 吕苗苗孙绪德高昌俊柴伟张贵和赵辉张振
- 关键词：丙泊酚低氧诱导因子-1Α脊髓缺血-再灌注损伤
- HIF-1基因转染骨髓间充质干细胞治疗脊髓缺血再灌注损伤的展望
- @@脊髓缺血再灌注损伤（spinal cord ischemic reperfusion injury，scⅡ)是指一些导致脊髓缺血因素去除后，脊髓恢复血供，神经功能不仅得不到改善，反而在原缺血损伤基础上进一步加重，甚至...
- 王君张玉明张振
- 关键词：骨髓间充质干细胞治疗脊髓缺血再灌注损伤
- 文献传递
- 大鼠骨髓间充质干细胞经低氧诱导因子-1α基因转染后的生物学特性被引量：1
- 2011年
- 目的评价大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）经低氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因转染后的生物学特性。方法将构建好的HIF-la基因表达载体（pcDNA3．1-HIF—1α）运用电穿孔法转染入第3代BMSCs中得到稳定表达HIF-1α的BMSCs（BMSCs-HIF-1α细胞）。以单纯BMSCs和电转染pcDNA3．1的BMSCs（BMSCs-pcDNA3．1细胞）作为对照。采用免疫细胞化学法鉴定HIF-1α基因表达载体是否转染成功；低氧培养后，采用Westernblot法测定HIF-1α表达；流式细胞术对转染后细胞进行周期与凋亡的检测，记录G，期、G2期和S期细胞比例，计算增殖指数（PI）；MTT法绘制细胞生长曲线，记录细胞数目。结果BMSCs-HIF-1α细胞核内充满蓝紫色深染颗粒，其余两种细胞未见深染颗粒。与BMSCs和BMSCs-pcDNA3．1细胞比较，BMSCs—HIF-1α细胞HIF-1α表达上调，细胞凋亡率降低，S期和G2期细胞比例和PI升高，G．期细胞比例降低，细胞数目增多（P〈0．05）。BMSCs和BMSCs—pcDNA3．1细胞上述各指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HIF-1α基因成功转染人大鼠BMSCs。
- 张玉明王君张振吕苗苗肖志斌高昌俊柴伟徐礼鲜孙绪德
- 关键词：间质干细胞缺氧诱导因子1Α亚基生物学特性
- HIF-1α与BMSCs治疗SCII的研究现状与展望被引量：1
- 2013年
- 脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia reperfusion injury,SCII)是一种不可逆性脊髓损伤,其临床治疗效果差以及致残率高的特点给人们的工作和生活带来了巨大负担。因缺血而导致的局部组织低氧进而造成细胞受损是发生SCII的主要原因,低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在细胞的低氧应答过程中起到重要调控作用,其功能主要为增强缺氧细胞的代谢,从而对抗低氧对细胞的破坏。另外,采用干细胞移植技术治疗脊髓缺血再灌注损伤在动物实验中取得了可喜的效果,这给截瘫患者带来了康复的希望。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)不仅具有多向分化潜能,还可接受外源性基因并稳定表达基因产物,且其表达具有组织特异性。因此,它在组织工程创伤修复、细胞替代治疗、基因治疗等方面具有很好的临床应用价值和广阔的应用前景。因此,HIF-1α联合BMSCs治疗SCII,有望取得更好的治疗效果。
- 田丽颖张振王君张玉明蔡承魁高昌俊张贵和孙绪德
- 关键词：低氧诱导因子-1Α骨髓间充质干细胞脊髓缺血再灌注损伤
- 阿普唑仑对创伤后应激障碍的预防作用被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨阿普唑仑(alprazolam,APZ)对PTSD(post traumatic stress disorder)模型大鼠的条件恐惧反应、空间学习记忆能力下降的预防作用。方法:将大鼠随机分为空白对照组、单纯给药组(APZ0.125mg/kg/d,APZ2)、单纯应激组,即单次延长结合足底电击应激(single prolonged stress & foot shock,SPS&S)、应激给药小剂量组(SPS&S+APZ0.06mg/kg/d,SPS&S+APZ1)和大剂量组(SPS&S+APZ0.125mg/kg/d,SPS&S+APZ2)。采用SPS&S动物模型,应激后早期将两种不同浓度的APZ饲喂大鼠14d。第14d在电击箱中检测大鼠的条件性恐惧反应,第15～20d在Morris水迷宫中测大鼠的学习记忆能力。结果:同SPS&S组相比,应激后早期使用APZ干预14d不能改善大鼠空间学习记忆能力的下降趋势,不能显著缩短大鼠上台的潜伏期和增加大鼠在目标象限的时间百分比(%),可以明显缓解应激大鼠的恐惧行为(P<0.05)。结论:应激后早期及时给予APZ干预可明显减轻创伤后应激障碍大鼠的恐惧反应,而对应激造成大鼠的学习记忆能力损伤无缓解作用,这一结果可为临床有效防治创伤后应激障碍提供一条新思路。
- 党少康罗晓星张振谭庆荣刘渝
- 关键词：阿普唑仑MORRIS水迷宫
- 米库氯铵用于全麻手术40例的临床分析被引量：5
- 2016年
- 目的：观察米库氯铵分别复合七氟醚、丙泊酚用于全麻手术的肌松效果和安全性,以及对米库氯铵剂量的影响。方法：选择妇科手术患者40例,随机分为七氟醚组和丙泊酚组。诱导期单次静注米库氯铵,肌松开始恢复时开始泵注,手术结束前约20 min停药。记录诱导起效时间、无反应期,停止泵注米库氯铵后TOF比值恢复至25%、50%、75%、90%时间、恢复指数,维持期米库氯铵平均泵注速度、平均追加次数。结果：S组有2例、P组有1例出现轻度皮肤潮红,P组有1例插管时出现轻度呛咳,血压、心率未见明显异常,插管条件均满意。两组诱导起效时间、无反应期、恢复指数无统计学差异,停药后TOF比值恢复至25%、50%、75%、90%时间S组长于P组,差异有统计学意义。S组维持期米库氯铵平均泵注速度、平均追加次数小于P组,差异有统计学意义。结论：米库氯铵用于全麻诱导及维持,肌松满意,恢复迅速,安全性值得肯定。与丙泊酚相比,七氟醚对米库氯铵的需要量大约可以减少20%～30%,丙泊酚对米库氯铵剂量的具体影响有待进一步研究。
- 肖海峰张振田丽颖孙美艳高佳栋高昌俊赵晖孙绪德
- 关键词：七氟醚丙泊酚肌松监测
- 大鼠低氧诱导因子-1α基因克隆和表达载体的构建被引量：4
- 2010年
- 目的:对低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因进行克隆及载体构建,为进一步研究HIF-1基因转染骨髓基质细胞移植治疗脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据。方法:制备大鼠脊髓缺血再灌注模型,提取脊髓组织mRNA,进行逆转录聚合酶链式反应(RT-PR)合成HIF-1α cDNA,并对其进行PCR扩增,对PCR产物进行纯化及连接T载体、转化感受态和双酶切鉴定,并将HIF-lα克隆入pcDNA3.l载体。结果:PCR扩增的片段长度为2472bp与预期结果一致;利用BamHI和XbaI双酶切能够切出大小约2472bP的目的片段,与PCR产物片段大小相等,经测序证实无碱基改变。结论:成功克隆HIF-lα,并被构建到载体pcDNA3.l中,为进一步研究基因转染奠定了基础。
- 张振王君吕苗苗肖志彬张玉明高昌俊孙绪德
- 关键词：低氧诱导因子-1Α脊髓缺血再灌注损伤基因克隆
- 异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时TLR4和MyD88表达的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 评价异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时Toll样受体4（TLR4）和髓样分化因子88（MyD88）表达的影响.方法 雄性成年SD大鼠54只,体重250～300 g,随机分为3组（n=18）：假手术组（S组）仅分离血管,不留置线栓;脑缺血再灌注组（IR组）采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h;异氟醚预处理（IP组）吸入2%异氟醚,1h/d,连续5 d,处理结束后24 h时制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.再灌注24 h时进行神经功能缺陷评分,然后每组处死3只大鼠,测定脑梗死体积.分别于再灌注24、48和72 h时,处死5只大鼠,取右侧大脑缺血部位额叶皮质,采用Western blot法测定TLR4、MyD88和NF-κB的表达水平.结果 与S组比较,IR组和IP组神经功能缺陷评分升高,脑梗死体积增大,IR组TLR4、MyD88和NF-κB的表达均上调,IP组MyD88和NF-κB的表达上调（P＜0.05）;与IR组比较,IP组神经功能缺陷评分降低,脑梗死体积减小,TLR4、MyD88和NF-κB的表达均下调（P＜0.05）.结论 异氟烷预处理可通过抑制脑组织TLR4和MyD88的表达,减轻炎性反应,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.
- 肖志彬高昌俊唐晓旭张振王君张玉明柴伟孙绪德
- 关键词：异氟醚缺血预处理TOLL样受体4髓样分化因子88
