柯珍恋
- 作品数：6 被引量：39H指数：4
- 供职机构：厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 胸腺素α1抗体的制备和鉴定被引量：11
- 2001年
- 目的 :制备用于检测转胸腺素基因蓝藻表达产物的特异性抗体。方法 :用提纯的小肽 (2 8个氨基酸 )胸腺素α1与牛血清白蛋白偶联后作为抗原 ,采用皮下多点注射免疫的方法免疫大鼠。经过 3个月的免疫 ,获得抗Tα的多克隆抗体。结果 :用间接酶联免疫吸附 (ELISA)方法 ,测得抗体效价超过 40 96。蛋白印迹 (Westernblot)检测结果显示 ,该抗体能特异性地与胸腺素α1抗原产生明显免疫亲和反应。结论
- 周克夫章军陈天圣徐虹秦燕殴阳青楼士林刘仁海柯珍恋
- 关键词：酶联免疫吸附反应蛋白印迹
- 抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究被引量：7
- 2003年
- 螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺旋藻培养基培养72h以上 ,都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低 ;低于28℃(如24℃)培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。根据实验结果 ,建议在螺旋藻转化前72h开始低温、无Mg2 +培养 ,转化前16h提高培养基中EDTA的浓度至2mmol/L,就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻 ,有利于外源基因的转化。
- 柯珍恋徐虹章军
- 关键词：螺旋藻基因转化
- 钝顶螺旋藻转化与表达系统的建立
- 螺旋藻内高活性的胞内核酸酶是外源基因转化螺旋藻的主要障碍.我们以供体质粒pEUTISI为主要的酶消化底物,通过多种方法处理螺旋藻细胞,然后检测其胞内核酸酶初提液对pEUTISI的降解作用.用整合型质粒载体pEUTISI和...
- 柯珍恋
- 关键词：钝顶螺旋藻基因整合胸腺素Α1
- 文献传递
- 胸腺素Tα1基因在螺旋藻Spirulina platensis中的表达
- 螺旋藻(Spirulina)为一类丝状蓝藻,含有大量的蛋白质及多种生物学活性物质,具有较高的营养价值和独特的药理作用,是众所周知的优良天然营养源。由于螺旋藻细胞具有使蛋白质高效表达的机制,且能容受高浓度的单一蛋白,内源蛋...
- 徐虹柯珍恋章军周克夫陈天圣楼士林
- 关键词：螺旋藻胸腺素Α1
- 文献传递
- 螺旋藻的系统分类学及基因工程研究进展被引量：16
- 2001年
- 徐虹柯珍恋章军
- 关键词：螺旋藻系统分类学基因工程
- 胸腺素α_1基因在钝顶螺旋藻中的表达被引量：11
- 2002年
- 将钝顶螺旋藻 (Spirulinaplatensis)在 2 4℃培养 ,并经 2mmol/LEDTA预处理16～ 2 4h ,以本实验室构建的基因整合平台系统供体质粒 pEUTISI进行超声波转化螺旋藻 ,经筛选获得了具G4 18抗性的转化藻株。通过PCR扩增和Southern杂交证实 ,pEUTISI中目的基因UB Tα1和nptII基因已整合到钝顶螺旋藻染色体上。转化藻株经4 5℃热诱导 4 0min后 ,进行蛋白质SDS PAGE电泳和Westernblot,杂交结果证实 ,外源胸腺素α1基因在螺旋藻中得到有效表达。
- 徐虹章军柯珍恋周克夫刘仁海楼士林
- 关键词：钝顶螺旋藻胸腺素Α1基因表达转基因
