汤瑾
- 作品数：59 被引量：701H指数：17
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 大肠杆菌-类中性粒细胞-金属片共培养模型的构建
- 2019年
- 目的建立稳定发光的类中性粒细胞-大肠杆菌-金属片双荧光三相共培养动态模型,并研究其可行性和应用价值。方法抽提pUC57-mCherry质粒,电转入大肠杆菌临床株ST131,构建稳定发光的ST131-mCherry大肠杆菌。通过活体成像(IVIS)系统对构建的ST131-mCherry大肠杆菌进行筛选。通过稀释涂板法比较ST131-mCherry与ST131的生长曲线,通过结晶紫染色比较ST131-mCherry与ST131的生物膜形成能力。将ST131-mCherry与钛片共培养,荧光显像观察不同时间点成膜情况,并通过超声震荡稀释涂板法对钛片表面生物膜计量。采用全反式维甲酸(ARTA)诱导HL60-eGFP细胞分化为类中性粒细胞。使用诱导分化的HL60-eGFP细胞、ST131-mCherry与金属片共培养,构建双荧光三相共培养模型,通过荧光显微镜观察以及稀释涂板计数评价不同金属表面的类中性白细胞抗菌能力。使用独立样本t检验对OD值和活菌数等定量数据进行统计。结果经临床株筛选,质粒电转获得红色荧光菌株"ST131-mCherry",在体外连续培养48 h,ST131-mCherry可稳定发光。ST131-mCherry与野生株ST131相比,两者的生长曲线没有统计学差异。在胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)中,ST131与ST131-mCherry生物膜结晶紫染色490nm的OD值分别为(1. 04±0. 06)和(1. 04±0. 05)(t=0. 890,P> 0. 05);在0. 5%葡萄糖胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSBG)中,分别为(1. 55±0. 06)和(1. 49±0. 17)(t=0. 822,P> 0. 05);在10%滑液(SF)中,分别为(2. 13±0. 16)和(2. 124±0. 13)(t=0. 833,P>0. 05)。ST131-mCherry可以在钛片表面成膜,其荧光强度随着成膜量的增加而变强。诱导分化的HL60-eGFP细胞、ST131-mCherry与钛片或钽片共培养结果显示,经过60 min的共培养,钽金属体系内的HL60-eGFP细胞能够吞噬更多的ST131-mCherry大肠杆菌,钛片体系和钽片体系内细菌存活率分别为(33±2. 5)%和(15. 7±1. 2)%(t=10. 47,P <0. 01)。结论本研究成功构建了大肠杆菌-类中性粒细胞-金�
- 杨闯朱崇尊何人可郭阁永汤瑾沈灏
- 关键词：大肠杆菌荧光中性粒细胞
- 2010年上海地区细菌耐药性监测被引量：65
- 2011年
- 目的了解上海地区16所医院2010年临床分离细菌的耐药情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)对临床分离菌株作药敏试验。采用CLSI 2010年版标准判断结果。结果 41 326株临床分离株中,革兰阳性菌占30.3%,革兰阴性菌占69.7%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率各自为57.9%和78.9%,未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。656株肺炎链球菌中7株为脑脊液分离的肺炎链球菌,其余为非脑膜炎分离株。儿童分离株中PSSP占71.2%,PISP和PRSP分别占17.0%和11.8%。成人分离株中97.0%为PSSP,1株为PISP。发现15株万古霉素耐药屎肠球菌和6株万古霉素耐药粪肠球菌,其中分别有11株和5株为vanA型耐药,其余均为vanB型耐药。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌+产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs分别占56.8%、40.8%和19.7%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率<5%。不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南耐药率仍继续增高,耐药率分别为49.6%和51.2%。肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌中泛耐药菌株较2009年显著增多。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,对临床构成严重威胁,采取积极有效防控措施为当务之急。
- 朱德妹张婴元汪复郭燕蒋晓飞倪语星孙景勇应春妹汪雅萍王传清王爱敏蒋燕群汤瑾张泓孔菁王蓉沈燕雅周庭银陈险峰傅启华黄卫春杨海慧卫颖珏汤荣丁星袁轶群武楠汪瑞忠房华刘瑛陈峰张正银孙晴戴俊华吴蓉
- 关键词：细菌耐药性抗菌药药敏试验泛耐药菌
- 泌尿生殖道支原体感染的优化检测方案研究被引量：10
- 2015年
- 目的通过优化支原体培养的方法和流程建立新的检查方案,提高检测解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染的准确性。方法优化支原体固体和液体组合培养的检测模式,制定了一套可操作性的标准化实验方案,遴选11家二级以上医疗机构,对随机入选病例的泌尿生殖道分泌物样本开展联合研究。相关的实验数据进行统计分析,评价临床应用前景。结果 747例样本总体阳性率45.1%(337/747),其中Uu阳性率41.1%(307/747),Mh阳性率13.9%(104/747)。Uu和Mh原始样本接种的阳性符合率分别为92.6%和94.0%(P均<0.01)。Uu和Mh转种后的阳性符合率分别为97.5%和96.1%(P均>0.05)。液体培养变色后转种提高了固体培养的敏感性。有17例液体培养阳性的样本经过原代和转种2次固体培养,均没有观察到菌落。固体培养降低了液体培养的假阳性。固体培养与液体培养同时接种样本,明显缩短了固体培养的检测周期。超过85%的支原体在24 h以内观察到菌落,而48 h以内固体培养与液体培养的阳性率几乎没有差别。结论以固体和液体组合培养的检测模式,尽管增加了检验成本,但对泌尿生殖道支原体感染的检测具有更高的敏感性和特异性,新检测方案可以在临床推广应用。
- 吴磊周运恒陈向明王国江刘瑛陈峰冯景唐群力汪瑞忠房华赵虎方毅周春妹黄声雷唐振华陆庭嫣汤瑾王坚镪韩立中肖淑珍胡伟忠杨阳顾伟鸣
- 关键词：支原体解脲脲原体人型支原体
- 2009年上海地区细菌耐药性监测被引量：36
- 2010年
- 目的了解上海地区2009年14所医院临床分离株的耐药情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)对临床分离株进行药敏试验。采用CLSI2009年版判断标准。结果 37167株细菌中革兰阳性菌占30.0%,革兰阴性菌占70.0%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为56.5%和72.2%。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。671株肺炎链球菌中5株为脑膜炎患儿分离的肺炎链球菌,称为儿童株。非脑膜炎儿童患者分离的617株肺炎链球菌中青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)的检出率为68.4%(422/617),青霉素不敏感株(PISP和PRSP)的检出率分别为17.0%(105/617)和14.6%(90/617)。49株成人患者非脑膜炎肺炎链球菌均为PSSP,无青霉素不敏感株。发现7株万古霉素耐药屎肠球菌和1株粪肠球菌,前者均为vanA型耐药,后者为vanB型耐药。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌+产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为60.2%、46.4%和15.4%。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为24.5%和17.9%。不动杆菌属(含90.4%鲍曼不动杆菌)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为37.8%和40.5%。新出现少数大肠埃希菌(0.04%,3/7049)和肠杆菌属细菌(0.3%,4/1459)的泛耐药株。泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率(14.2%,505/3567)较2008年(5.9%,180/3069)明显上升。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,新出现少数泛耐药肠杆菌科细菌,泛耐药鲍曼不动杆菌较往年又有较显著的增加。加强对泛耐药菌株的流行病学和耐药机制的研究,并采取积极有效的防控措施为当务之急。
- 朱德妹张婴元汪复郭燕蒋晓飞倪语星孙景勇应春妹汪雅萍王传清王爱敏蒋燕群汤瑾张泓李万华沈燕雅金文敏周庭银陈险峰张蓓黄卫春杨海慧卫颖珏汤荣丁星吴丽桂武楠汪瑞忠房华吕新华朱爱英
- 关键词：细菌耐药性抗菌药药敏试验泛耐药菌
- 优菌多颗粒对人体肠道益生菌影响的初步研究
- 2005年
- 目的探讨服用微生态制剂对人体肠道益生菌的影响.方法通过优菌多颗粒人群试食,对服用前后胃肠道症状、代谢、排便情况和食欲表现及菌群变化等指标进行统计分析,并结合肠道菌群DNA指纹图谱分析,评价优菌多颗粒对人体肠道菌群的调节功能.结果试食人群食欲表现和胃肠道症状在服用优菌多颗粒4～8 d后得到显著改善,12 d后极显著改善;在服用优菌多颗粒20 d后,人体肠道菌群中双歧杆菌和乳酸杆菌与服用前相比有极显著提高,而肠道致病菌产气荚膜梭菌却极显著下降;在服用20 d优菌多颗粒后,人体肠道菌群比服用前更具多样性.结论优菌多颗粒具有调节人体肠道菌群的作用,使人体肠道细菌种群更具多样性.
- 蒋燕群张和春王坚镪汤瑾
- 关键词：益生菌
- 复发性尿路感染的细菌检验和药敏情况及治疗分析被引量：49
- 2013年
- 目的:分析复发性尿路感染的细菌检验和药敏对治疗影响并探讨治疗对策。方法:86例复发性尿路感染患者分析其尿细菌培养及药敏情况,并把患者分成培养阳性组和阴性组,分析对治疗的影响。采用分期长疗程治疗及根据尿细菌培养及敏感试验和临床验证选用抗生素,并观察其疗效。结果:86例患者中30例(34.9%)尿细菌培养阳性,其中大肠埃希菌24例(80%)。总治愈率为89.5%(77/86),治愈的26例细菌培养阳性组和51例细菌培养阴性组在治疗期、巩固期、维持期和总疗程方面均差异无统计学意义。共进行药敏试验587药次,能用于门诊作长疗程的口服药计137药次。口服药中敏感和中介的68药次中,临床表现敏感的仅58药次(9.88%)。结论:复发性尿路感染的尿细菌检验对指导长疗程治疗有局限性,应采用分期治疗方法、并根据药敏试验及临床验证方法选用抗生素。
- 简桂花贾平汪年松李军辉汤瑾
- 关键词：复发性尿路感染细菌培养药敏试验
- 革兰阴性菌中1类整合子的分布及其与耐药的关系被引量：9
- 2005年
- 目的在革兰阴性细菌中检测1～3类整合子,并分析整合子对细菌耐药性的影响.方法应用聚合酶链反应对临床分离的340株革兰阴性细菌进行整合子的初筛,对于整合子阳性的菌株,再利用限制性片段长度多态性技术(RFLP)进行分型.结果 340株菌中有87株(25.6%)含有1类整合子,其中有1株同时含有2类整合子,它们对10种抗菌药物的耐药率依次为亚胺培南(9.2%)、哌拉西林/他唑巴坦(34.5%)、阿米卡星(34.5%)、头孢吡肟(35.6%)、头孢他啶(41.4%)、头孢噻肟(65.5%)、庆大霉素(66.7%)、头孢曲松(67.8%),替卡西林/克拉维酸(72.4%)、环丙沙星(73.6%).结论 1类整合子广泛地存在革兰阴性细菌中,1类整合子阳性菌株对多种抗生素的耐药率大于整合子阴性的菌株.
- 蒋燕群韩立中汤瑾孙景勇倪语星
- 关键词：整合子革兰阴性细菌耐药率革兰阴性菌初筛头孢噻肟
- 骨科创伤后伤口感染和手术部位感染季节趋势的回顾性研究被引量：10
- 2018年
- 目的·探究骨科创伤后伤口感染(post-traumatic wound infection,PWI)和手术部位感染(surgery site infection,SSI)的季节性变化以及各自的微生物分布情况。方法·对上海交通大学附属第六人民医院骨科2013—2015年的2 177例四肢开放性创伤患者及11 809例择期手术患者的数据进行统计,分析各季节中PWI和SSI的发生率。通过多元线性回归分析PWI发生率和气象学参数的相关性,统计并分析PWI和SSI的微生物季节性分布。结果·2013—2015年上述患者PWI发生率为2.20%,且具有季节差异性,夏、秋季高,冬、春季低(P=0.004);SSI发生率为0.21%,未发现季节差异性(P=0.809)。多元线性回归分析中,气温与PWI发生率相关(P=0.002,β=0.016)。在微生物季节性分布的研究中,SSI夏秋季以革兰阴性菌为主(P=0.021),PWI中分离培养的微生物无季节性分布差异(P=0.694)。结论·PWI存在季节性差异,夏、秋季发生率高,与气温具有相关性;SSI发生率未发现季节性差异,但SSI在微生物季节分布中存在差异,夏秋季以革兰阴性菌感染为主。
- 胡庆翔戚文潇汤瑾何耀华
- 关键词：手术部位感染气温革兰阴性菌
- 双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的评价被引量：23
- 2012年
- 目的评价双套血培养在提高血流感染检出率及鉴别污染的临床价值。方法统计2010—2011年上海交通大学附属第六人民医院双套血培养的双次阳性率和单次阳性率,评价双次阳性和单次阳性在鉴别血培养污染中的差异。结果我院2010—2011年共送检双套血培养3 151例,占全年送检病例数的71.2%。共检出483例阳性,阳性率15.33%。其中双次阳性192例,阳性率6.09%;单次阳性291例,阳性率9.23%。结论双套血培养能够提高血流感染检出率并能鉴别分离菌的定植或污染,建议临床在诊断血流感染时送检双套血培养。
- 王坚镪汤瑾庄亦晖陈瑜高锋
- 关键词：血流感染检出率
- 一种新的假体关节感染金黄色葡萄球菌工具菌的表型及基因特性分析
- 2018年
- 目的探讨一株分离自关节假体周围感染（periprosthetic joint infections，PJI）患者假体的临床金黄色葡菌球菌是否适合作为PJI致病机制研究的工具菌。方法利用Illumina Hiseq平台对一株临床PJI假体分离所得金黄色葡萄球菌ST1792进行全基因组测序，明确该菌株的分子遗传背景。依据基因本体（gene ontology，GO）与京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）数据库对该菌株基因进行功能富集分析；分别检测该菌株在引流液、滑液和血浆三种体液中的成膜特性，并以胰酪胨大豆肉汤培养基（TSB）为对照组分析体液环境与培养基环境中成膜的差异性；利用Illumina Hiseq平台对该菌株在不同体液中的基因差异进行全转录组测序研究，并依据GO与KEGG数据库对体液环境中差异表达基因行功能富集分析，同时结合成膜特点分析该金黄色葡菌球菌ST1792在不同体液下的总体适应性。结果全基因组测序结果显示，该金黄色葡菌球菌菌株基因组共包含2718个编码序列，包括主要毒力基因与调节基因。功能富集分析显示基因组结构未出现明显缺失或重大重组。成膜实验表明，该菌株在血浆中的成膜量最高，其次是滑液，均显著高于TSB组；在引流液中成膜量相对TSB组无显著差异；表明该菌株在体内、外环境中成膜行为差异显著。转录组测序结果显示金黄色葡萄球菌ST1792在三种体液环境中大量基因均发生差异性表达；功能富集分析显示其基因表达状态在不同体液环境中具有显著差异，表明细菌可以适应复杂的体液环境。结论菌株ST1792是从PJI患者分离得到的临床金黄色葡菌球菌，其在体内环境中表现出与体外培养基环境全然不同的表型和适应行为；该菌株可作为研究金黄色葡菌球菌相关PJI体内致病机制良好的工具菌。
- 谈佳琪王津郭阁永杨闯朱崇尊王坚镪汤瑾沈灏
- 关键词：生物膜金黄色葡萄球菌基因组学
