郭勇晖
- 作品数：27 被引量：79H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术农业科学更多>>
- 白念珠菌Csa2蛋白双抗原夹心ELISA方法的建立及诊断价值被引量：2
- 2019年
- 目的建立以白念珠菌Csa2蛋白抗体为靶标的双抗原夹心ELISA,初步评价其鉴别诊断白念珠菌尿道感染的应用价值。方法通过间接免疫荧光染色定位Csa2蛋白在白念珠菌菌体分布情况;应用棋盘滴度法优化反应条件,建立双抗原夹心ELISA并进行方法学评价;检测324例健康体检者血清,确定该方法的cutoff值;检测120例健康体检者及30例念珠菌属尿路感染患者血清,分析其诊断的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果 Csa2蛋白是一种特异性分布在白念珠菌菌丝态表面的蛋白;以0.1 μg/mL的rCsa2蛋白为包被抗原,1∶1 000稀释的rCsa2-HRP蛋白为检测抗原,建立双抗原夹心ELISA,可最低检测1∶16 000稀释的rCsa2蛋白免疫兔血清并不与正常兔血清发生反应;该方法的cutoff值为0.072,诊断白念珠菌尿路感染敏感性为65.2%(15/23),特异性为98.4%(125/127),阳性预测值88.2%(15/17),阴性预测值为94.0%(125/133)。结论成功建立检测白念珠菌特异性Csa2蛋白抗体双抗原夹心ELISA;初步评价该方法对诊断白念珠菌尿路感染具有较高的特异性,得出较高阳性预测值和阴性预测值;Csa2抗体靶标对区分白念珠菌感染和定植具有一定价值。
- 刘玲丽蔡建飘郭勇晖王艳芳车小燕
- 关键词：白念珠菌
- 登革病毒重组包膜蛋白表达及其应用的研究进展被引量：2
- 2012年
- 登革病毒（dengue virus,DV）是当前严重影响人类健康的虫媒传播病毒,无特效的疫苗和药物。目前在DV的诊断、疫苗的研发以及对抗体依赖性增强效应（ADE效应）机制的研究上,DV包膜蛋白越来越受到人们的关注。研究人员通过不同的载体表达不同形式的DV包膜蛋白,对研究目的以及研究结果的应用有着巨大的影响。本文主要就DV包膜蛋白在不同表达系统中的表达方式进行综述,
- 郭勇晖
- 关键词：病毒重组包膜蛋白登革病毒传播病毒
- 手足口病相关肠道病毒感染血清中交叉抗体反应的初步鉴定被引量：4
- 2015年
- 目的了解我国手足口病常见病毒感染患者血清中抗体交叉反应及保护性,为揭示手足口病二次感染保护机制提供依据。方法收集2010-2014年珠江医院经荧光定量PCR确诊为手足口病患儿血清,用间接免疫荧光鉴定非EV71肠道病毒感染血清与EV71病毒感染细胞间结合,及EV71感染恢复期血清和抗EV71单克隆抗体与非EV71肠道病毒感染细胞的结合,对存在交叉结合反应的血清检测其交叉中和保护性。结果共收集149例非EV71肠道病毒感染血清,经鉴定其中54份标本无EV71混合感染及既往感染,血清型分别为CA6、CA10、CA9、CA5、CA16、CB3、CB5及未分型肠道病毒。46份(85.2%)非EV71感染血清Ig G抗体与EV71病毒感染细胞结合,具统计学意义(Z=-2.39,P=0.017),并对EV71病毒具弱中和活性。EV71感染血清及5株抗EV71单克隆抗体仅与CA16感染细胞结合。结论初步确定多种非EV71肠道病毒感染血清与EV71病毒存在交叉反应,且具有弱中和活性;而EV71感染血清对其他肠道病毒无交叉保护作用。首次证明抗EV71 VP2、VP4单抗可结合CA16病毒。
- 薛霖余楠郭勇晖潘玉先陈满君郭敏富宁
- 关键词：手足口病肠道病毒属
- RVPFast与实时荧光PCR/RT-PCR检测呼吸道病毒结果的比较被引量：4
- 2014年
- 目的评价xTAG呼吸道病毒群快速检测(Respiratory Virus Panel Fast Array,RVP Fast)技术检测呼吸道病毒的临床应用价值。方法选取经实时荧光定量PCR/RT-PCR筛查的74份呼吸道病毒阳性和4份阴性鼻拭子标本,用RVP Fast和RTPCR同时检测78份标本的8种呼吸道病毒及其亚型(共19型),运用McNemarχ2检验,Kappa检验和线性回归方法对检测结果进行统计处理。结果两种方法检测78份标本有71份结果完全相符,包括55份单个病毒感染标本,12份混合病毒感染标本和4份阴性标本。两种方法检测结果总体比较无统计学差异(P>0.05),一致性较好(Kappa=0.960,P<0.01),RVP Fast荧光强度中位数(MFI)与实时荧光PCR/RT-PCR阈值循环数(Ct)呈负相关(r=-0.529,P<0.01)。结论 RVP Fast芯片技术的检测性能准确可靠,可应用于国内呼吸道病毒感染的快速、高通量检测,具有推广价值。
- 余志武王压娣陈钰静郭勇晖丁细霞余楠车小燕
- 关键词：呼吸道病毒聚合酶链反应FAST
- 西尼罗病毒NS1单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的以西尼罗病毒非结构蛋白(nonstructural protein1,NS1)为免疫原制备西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法在表达具有良好抗原性的重组西尼罗病毒NS1蛋白基础上免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光(IFA)和免疫印迹对所获得单克隆抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制试验对m Ab识别的抗原位点进行分析。结果获得39株特异性针对西尼罗病毒NS1蛋白的单克隆抗体,Ig亚类测定结果Ig G3和Ig G2a单抗各2株,Ig G2b单抗5株,Ig G单抗1株,另外29株均为Ig G1。结论成功获得了特异性针对西尼罗病毒NS1蛋白的单克隆抗体,将为进一步建立西尼罗病毒NS1抗原检测方法及探讨NS1蛋白及抗体在西尼罗病毒发病机制中提供依据。
- 丁细霞丘立文郭勇晖
- 关键词：西尼罗病毒非结构蛋白单克隆抗体
- 临床公共实验室平台信息化管理建设探索被引量：3
- 2013年
- 结合南方医科大学珠江医院检验医学部医学实验中心的实际情况,总结了临床公共实验室信息化管理中安防管理系统、仪器预约管理系统以及临床样本库管理系统的设计理念和建设情况,强调了信息化管理对临床公共实验室平台发展的重要意义和作用。
- 郭勇晖郝卫余楠王艳芳丁细霞温坤曾里车小燕
- 关键词：信息化管理
- 1型登革病毒包膜蛋白功能区在293T细胞中的表达与鉴定
- 2015年
- 目的在293T细胞中获得可溶性表达的1型登革病毒（DENV1）包膜（E）蛋白。方法PCR扩增DENV1-E蛋白功能区（1～394aa）基因并克隆到Psectag2B-Fc真核表达载体中构建表达质粒，脂质体法转染293T细胞，经2mg／ml Zeocin筛选，免疫荧光法鉴定所获细胞克隆：Protein-G亲和层析纯化DENV1-E-Fc重组融合蛋白，间接免疫荧光和蛋白免疫印迹法鉴定蛋白的完整性和抗原性。结果获得稳定可溶性表达重组融合蛋白的细胞克隆，蛋白产量约为25μg／1×107个细胞，纯化得到的DENV1-E-Fc蛋白相对分子质量约90×103，该蛋白可与识别天然构象E蛋白的单克隆抗体结合，并与免疫动物血清有良好的反应性。结论在真核细胞中成功获得可溶性表达的DENV1-E-Fc重组融合蛋白，E蛋白功能区保持完整且具备天然的构象表位和良好的抗原性，为包膜蛋白的保护性抗原表位和功能研究奠定了基础。
- 郭勇晖易海粟陈静丁细霞狄飚车小燕温坤
- 关键词：包膜蛋白真核表达
- 白念珠菌感染特异性Csa2蛋白双抗体夹心ELISA体系的建立与评价被引量：1
- 2014年
- 目的以白念珠菌Csa2蛋白为靶标,建立双抗体夹心ELISA检测体系,评价该方法的检测灵敏度和特异性。方法构建pPIC9K-Csa2重组表达载体,电转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达、纯化重组蛋白rCsa2。rCsa2蛋白分别免疫新西兰大白兔和豚鼠制备免疫血清。以纯化兔多抗和豚鼠抗血清配对,利用棋盘滴定法,确定最佳实验条件,建立双抗体夹心ELISA检测系统。检测rCsa2和白念珠菌不同培养时间的上清,确定检测方法的灵敏度;检测其他3种念珠菌、5种曲霉、新型隐球菌和马尔尼菲青霉的培养上清,评价检测方法的特异性。结果成功构建表达载体并获得真核表达重组蛋白rCsa2,经SDS-PAGE鉴定相对分子质量(Mr)为13 300,符合预期值;Western blot法证实该蛋白可与特异性抗体结合。免疫动物获得高效价免疫血清,并以此成功建立双抗体夹心ELISA,可检测rCsa2蛋白的灵敏度约为240 pg/mL,并最早可检测到培养18 h的白念珠菌培养上清,与其他10种临床常见真菌的培养上清无交叉反应。结论建立了有较高的检测灵敏度和特异性的Csa2的双抗体夹心ELISA,为区别诊断白念珠菌感染提供新的方法。
- 刘玲丽蔡建飘刘彩怡郭勇晖潘玉先王艳芳车小燕
- 关键词：白念珠菌双抗体夹心ELISA
- 获得性凝血因子Ⅴ抑制物致消化道出血1例及诊断思路
- 2023年
- 获得性凝血因子抑制物是一种病理性循环抗凝物质,其所致的凝血障碍临床少见。多数抑制物针对凝血因子Ⅷ(FactorⅧ,FⅧ),而针对凝血因子Ⅴ(FactorⅤ,FⅤ)者罕见,年发生率达(0.09~0.29)/100万,文献报道200余例[1]。患者可伴有或不伴有严重出血症状[2],常因无法找到明确原因而被漏诊、误诊。实验室检查如凝血酶原时间(pro-thrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)明显延长后,临床不知其中原因,常输注血浆处理;即使发现FⅤ活性降低,治疗效果也往往不佳;只有检测到FⅤ抑制物,才可明确诊断并对症处理。因此,实验室主动追查异常检验结果的原因,推动临床和实验室联合诊断模式,可能是探讨解决这类罕见或复杂出凝血疾病的有效策略。本院收治1例获得性FⅤ抑制物致消化道出血患者,现报道其诊疗过程。
- 李慧许剑辉许剑辉何国林陈钰静郭勇晖
- 登革病毒NS1蛋白及其抗体在重症登革发病机制中作用的初步研究
- 全球受到登革病毒(Dengue virus，DENV)感染威胁的人群近39亿，我国近年感染率增高，仅广东省2014年就达45000例。登革病毒有4个血清型，主要致自限性的登革热(Dengue Fever，DF)，少数情况...
- 郭勇晖
- 关键词：病毒感染发病机制IGG抗体
- 文献传递
