钟哲 作品数:13 被引量:169 H指数:7 供职机构: 新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 中国科学院西部之光基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
HPV16-E7在Pichia pastoris酵母中的分泌表达 2003年 本研究利用酵母Pichia pastoris真核表达系统表达人乳头瘤病毒16(HPV16)E7蛋白,试图解决新疆维吾尔妇女高发宫颈癌的诊断、疫苗的研究中抗原蛋白需要的问题.依据新疆维吾尔妇女宫颈癌组织克隆获得的HPV16-E7基因序列设计引物,并分别在5’引物和3’引物中引入了EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切位点,经PCR扩增后连接到pMD18-T载体上,再将HPV16-E7克隆至穿梭质粒pGAPZαA上,获得的重组穿梭质粒pGAPZαA-E7经线性化后.采用LiCl法将重组穿梭质粒转入酵母细胞内,Zeocin+筛选阳性克隆,经小瓶发酵后,取上清作SDS-PAGE,并做Western印迹检测表达的蛋白质,结果表明HPV16-E7成功地在酵母真核表达系统获得表达,表达产物的分子量分别是22KDa和88KDa,为深入开展HPV16-E7蛋白功能和应用的研究奠定了理论基础. 刘忠渊 张富春 赵干 钟哲 王宾关键词:人乳头瘤病毒16 SDS-PAGE WESTERN印迹 小鼠卵透明带3基因疫苗体外瞬时表达的研究 2002年 运用基因重组技术 ,将小鼠 ZP3c DNA片段克隆到真核表达载体 p CDNA3上 ,成功构建了 p CDNA3- ZP3真核表达质粒 ,转染 He L a细胞后 ,EL ISA法检测到 p CDNA3- ZP3真核表达质粒在 He L a细胞瞬时表达系统中能够特异性表达ZP3蛋白 ,结果表明 p CDNA3- 林仁勇 张富春 钱东 马正海 张渝疆 黄弋 钟哲 蹇晓红关键词:小鼠 卵透明带3 基因疫苗 人绒毛膜促性腺激素β-亚基基因疫苗在动物肌肉组织中的表达 被引量:1 2004年 为观察pCMV4-hCGβ重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达,本实验以昆明小白鼠为实验材料,将实验组鼠经后腿股四头肌注射重组质粒pCMV4-hCGβ100μg,对照组注射pCMV4100μg,于接种后第7d和第30d取小鼠股四头肌免疫组化染色.结果显示,在注射部位肌肉的肌膜和肌间隙处见到棕褐色分泌颗粒,对照组则未见阳性颗粒.本研究探索了hCGβ基因导入小鼠骨骼肌并在肌肉组织内进行表达的情况,为hCGβ基因疫苗的研制提供了体内表达的依据. 孙素荣 张富春 马正海 钟哲关键词:基因疫苗 肌肉组织 真核表达 标本采集 标本处理 猪多杀性巴氏杆菌对HeLa细胞附着能力的研究 被引量:10 2005年 本研究通过猪肺疫的活菌疫苗和死菌疫苗多杀性巴氏杆菌菌株(Pasteurella multocida,Pm)对小鼠的毒力试验测定它们的毒力性。结果表明,死菌疫苗Pm的毒力性比活菌疫苗Pm的强,即死亡率分别为10 0 %和0 %。通过两菌株对He L a细胞的附着试验测定它们的附着能力,结果证明强毒菌的附着能力明显地比弱毒菌强(P<0 .0 1) ,平均附着数分别为11.96和2 .4 4 ;从上述菌株细胞荚膜中分别提取荚膜蛋白,用SDS- PAGE分离测定两菌株荚膜蛋白质结构,结果表明39k Da荚膜蛋白是强毒菌的特异性蛋白。以上研究结果证明Pm的毒力与He L a细胞的附着能力是密切相关的,同时暗示本菌39k Da荚膜蛋白可能与它们的毒力和He L 恩特马克.布拉提白 晁群芳 吾鲁木汗.那扎尔别克 钟哲 张富春关键词:多杀性巴氏杆菌 毒力 手术应激反应的新概念——神经免疫内分泌学说 被引量:86 1995年 神经免疫内分泌学说认为神经内分泌系统与免疫系统间存在双向调节、交互影响的基础,更引人关注的是,免疫系统通过释放细胞因子、分泌内分泌激素、感受抗原刺激等三方面发挥调节神经内分泌反应的功能。在手术应激反应的研究中不能忽视免疫系统的参与作用及围术期多种因素对其影响。 刘忠渊 张富春 赵干 钟哲 王宾关键词:应激反应 神经系统 免疫系统 内分泌 新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)特性的研究 被引量:13 2004年 探讨了新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)的抗菌特性。根据琼脂糖孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,检测抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果表明新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1μg/ μl抗菌肽与 2 4 0 0 0单位的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,而对革兰氏阳性菌的抗菌活力高于革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 。 刘忠渊 张富春 蔡伦 赵干 单文娟 钟哲 王宾关键词:新疆家蚕抗菌肽 抗菌特性 热稳定性 鼠白细胞介素2真核表达质粒的构建及鉴定 被引量:1 2001年 利用小鼠 IL- 2基因构建真核表达质粒 ,筛选的阳性克隆经限制性内切酶酶切鉴定和基因测序 ,结果表明小鼠 IL- 2基因被正确地克隆到 p CDNA3 真核表达质粒上 ;将真核表达质粒 p CD-NA3 IL - 2 ,转化大肠杆菌细胞 ,增菌培养后大量提取 p CDNA3 IL - 2质粒 ,经紫外分光光度计检测其纯度和浓度 ,为加强控制鼠害 张富春 马正海 马纪 郭江勇 钟哲关键词:白细胞介素2 基因测序 免疫功能 枸杞干红酒对小鼠抗疲劳、抗氧化作用的影响 被引量:8 2004年 将枸杞干红酒、枸杞干红三倍浓缩液以及枸杞多糖分别灌胃小鼠,进行游泳疲劳实验,结果显示枸杞干红酒能明显降低运动时血清尿素氮水平,减少肝糖原的消耗量,并且它能使血清SOD的活性明显提高,说明枸杞干红酒具有明显的抗疲劳作用和抗衰老作用. 李轶杰 马纪 涂亦娴 钟哲 胡瑞 张富春关键词:小鼠 抗疲劳 抗氧化 枸杞多糖 血清尿素氮 肝糖 新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中乳头瘤病毒16型E6基因的克隆和序列分析 被引量:28 2001年 为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其进行基因全序列分析 .PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为 82 35 % (14/17) ;测序结果显示 ,新疆株HPV16E6基因全长 45 6bp ,大小与德国标准株一致 .E6基因的第 2 47位碱基发生T→G突变 ,并由此引起所编码的氨基酸亦发生改变 .上述结果表明 ,中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中HPV16E6的基因结构与德国标准株HPV16E6基因之间存在差异 . 马正海 钱东 马纪 林仁勇 闻明 钟哲 张富春 张秋云关键词:人乳头瘤病毒16型 E6基因 维族妇女 鼠透明带3(ZP3)融合蛋白表达以及抗血清制备 被引量:5 2002年 鼠透明带 3(mZP3)作为精子的初级受体 ,是鼠透明带中的一种主要糖蛋白 ,抗鼠透明带 3抗体能够阻断精卵的结合 ,达到不育的效果 ,因此mZP3是免疫避孕研究的重要候选抗原。从小鼠卵巢中提取总RNA ,分离mRNA ,反转录获得cDNA ,将cDNA连接到测序载体pUCm -T质粒上 ,通过序列测定和分析得到正确的mZP3cDNA。经内切酶EcoRI和XhoI处理 ,将mZP3cDNA克隆至融合蛋白表达载体pGEX - 4T - 1中 ,在T4DNA连接酶的作用下构建出融合表达载体pGEX -mZP3,转化大肠杆菌BL - 2 1菌株 ,利用IPTG诱导后获得可溶性的蛋白质产物 ,经过SDS -PAGE鉴定 ,表达的融合蛋白GST -mZP3分子质量约为 72kD左右 ,纯化的融合蛋白免疫兔子 ,获得效价为1∶1 0 0 0的抗血清 ,Westernblot检测抗血清具有针对mZP3融合蛋白的专一性 。 张富春 钱东 林仁勇 马纪 马正海 钟哲关键词:CDNA 融合蛋白 抗血清