陈杨
- 作品数：23 被引量：63H指数：5
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 联合表达PCV2 ORF2和PPV VP2基因病毒样颗粒获得及免疫原性被引量：4
- 2009年
- 将包含有完整闼读框架，长1740、705bp的PPVVP2基因、PCV2ORF2基因分别插入真核表达载体pPI-2．EGFP，构建了重组质粒pPi-Z．EGFP．VP2．ORF2。观察由脂质体介导转染重组质粒后的Vero细胞，结果最早在转染后20h左右出现荧光，36h达到高峰；对转染细胞进行电镜检测，结果观察到病毒样颗粒存在。为证实所获病毒样颗粒是否为重组颗粒，将纯化后的病毒样颗粒免疫仔猪，检测其血中T淋巴细胞的动态变化以及血清抗体水平。结果免疫仔猪的CD3＋、CD4＋T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高；CD8＋T淋巴细胞在免疫后7～14d有所下降，之后再升高。抗体检测结果表明，免疫动物血清中有较高水平的PPV、PCV2特异性抗体。结果表明重组质粒pPI-2．EGFP．VP2．ORF2获得成功表达并形成重组病毒样颗粒，且该颗粒具有良好的免疫原性。
- 徐志文郭万柱陈杨朱玲陈燕凌王印
- 关键词：病毒样颗粒猪细小病毒免疫原性
- 猪瘟病毒四川分离株E2基因的分子克隆、原核表达及免疫学活性分析被引量：4
- 2010年
- 分子克隆猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)四川分离株E2基因,并对其进行原核表达及免疫学活性分析。PK-15细胞培养增殖CSFV四川分离株提取总RNA,运用RT-PCR扩增E2基因,定向克隆构建原核重组表达载体,转化E.coli Rosetta-gami-TM(DE3)plysS,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达,Western blotting分析表达蛋白的免疫学活性。试验结果表明,成功克隆了E2基因,共1119 bp,包含有编码E2蛋白的完整序列,编码373个氨基酸;成功构建了CS-FVE2基因完整阅读框、主要抗原区原核表达载体pET-E2(pe)、pET-mE2(pe);蛋白质电泳结果显示,成功表达出约45.32、28.49 ku两目的蛋白,而且表达的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白均能被CSFV阳性血清所识别,具有良好的免疫学反应活性。因此,本试验成功获得CSFV四川分离株E2基因,表达出具有生物学活性的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白。
- 韩国全郭万柱林华王利娜张博陈弟诗陈杨
- 关键词：猪瘟病毒四川分离株E2基因原核表达免疫学活性
- 一种高层楼房外墙自动喷漆装置
- 本实用新型公开一种高层楼房外墙自动喷漆装置，包括架设于楼顶的若干个升降电机、与各升降电机相连的绳索、吊装在各条绳索末端的水平导轨、可移动地设置于水平导轨上的喷漆车，以及与升降电机和喷漆车信号连接的主机，且用于根据内置程序...
- 陈松柏陈诚刘辉陈杨
- 文献传递
- 四川省PPV与PCV2的病原流行病学调查被引量：6
- 2012年
- 从四川省21个规模化猪场采集样品273份,利用PCR方法检测并分析了猪细小病毒和猪圆环病毒的感染及混合感染情况,结果共检出PPV病原阳性样品47份(占17.22%);PPV阳性猪场8个(占38.1%);种猪的感染率较高,仔猪感染率相对较低;检出PCV2病原阳性样品143份(占52.38%),PCV2阳性猪场18个(占85.7%);PCV2感染随猪年龄的增长而升高;检出PPV和PCV2混合感染样品29份(占10.62%);同时存在PPV和PCV2的猪场6个(占28.7%),混合感染主要集中在母猪和保育仔猪阶段。仅有3个猪场未检出PPV和PCV2病原,占14.3%。该结果说明PPV与PCV2及其混合感染在四川省流行广泛,对养殖业构成了较严重的危害。
- 徐君郭万柱陈杨徐志文王小玉
- 关键词：猪细小病毒猪圆环病毒流行病学
- 猪圆环病毒1型和2型四川分离株全基因克隆分析被引量：3
- 2007年
- 参照Genbank收录猪圆环病毒（porcine circovirus,PCV）1、2型序列,设计两对特异性引物,分别扩增猪圆环病毒1型和2型四川分离株（PCV1-YA1株和PCV2-SC株）全基因组,获得了预期目标大小一致扩增产物,分别将其克隆于PMD18-T载体,分别命名为PMD18-T-PCV1-YA与PMD18-T-PCV2-SC。经酶切鉴定和序列测定证实,成功克隆了PCV1-YA1株1759bp和PCV2-SC株1767 bp的全基因组序列。所得序列与GenBank中的国内外其它PCV1和PCV2毒株进行比较分析,其同源性分别达到98.8%-99.9%与93.6%-98.6%;而PCV1-YA1株和PCV2-SC株之间的同源性则仅为69.2%,进一步分析两个毒株的主要阅读框架,毒株间ORF1核苷酸序列及推导的氨基酸同源性均为85.3%,而ORF2的核苷酸序列及推导的氨基酸同源性分别为66%和65.2%。推导显示两毒株之间ORF1编码产物疏水性区域分布有相似之处,而ORF2编码产物的跨膜区存在差异。
- 朱玲郭万柱徐志文陈杨周远成
- 关键词：猪圆环病毒全基因克隆
- 猪沙门氏菌病与猪肉食品安全被引量：4
- 2010年
- 沙门氏菌能引起猪的相关沙门氏菌病,是猪肉产品的严重感染源,人类食源性中毒的主要因素,因而猪的沙门氏菌备受关注。从病原、流行病学、临床症状、鉴别诊断、治疗和预防,以及食品安全等方面对猪沙门氏菌进行综述。
- 陈弟诗郭万柱陈杨李雯
- 牛疱疹病毒4研究进展被引量：1
- 2011年
- 国外早已对牛疱疹病毒4(BHV-4)做了广泛的研究,尤其是作为有潜力的病毒载体,它更是引起了诸多学者的兴趣,但国内尚未见对该病毒的深入研究。为了更加全面地认识该病毒,论文对BHV-4基本生物学、分子生物学特征及流行病学等方面做了较为全面的综述,以期对相关研究提供资料。
- 陈弟诗郭万柱李雯陈杨王小玉
- 关键词：分子生物学流行病学
- 含EGFP基因的PRV Fa株重组PPV VP2基因与PCV2 ORF2基因表达载体的构建
- 将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,得到了转移载体质粒pPI-2.EGFP.VP2。再以含有PCV2 SC株全基因组的重组质粒pMD-PCV2为模板扩增PCV2 ORF2基...
- 陈杨徐志文郭万柱朱玲陈弟诗王印王小玉
- 关键词：VP2基因ORF2基因EGFP
- 文献传递
- 含EGFP基因的PRVFa株重组PPVVP2基因与PCV2ORF2基因表达载体的构建
- 将扩增得到的PPVSC-1株VP2基因产物插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中，得到了转移载体质粒pPI～2.EGFP.VP2。再以含有PCV2SC株全基因组的重组质粒pMD-PCV2为模板扩增PCV2ORF2基因，进...
- 陈杨徐志文郭万柱朱玲陈弟诗王印王小玉
- 关键词：伪狂犬病毒VP2基因ORF2基因EGFP
- 文献传递
- 猪伪狂犬病病毒gD基因的克隆与分析被引量：3
- 2007年
- 克隆测定12条PRV不同毒株的gD全序列连同Genebank中登录的9条gD基因全序列共21条基因序列，使用生物软件对它们的基因序列的同源性、突变区域的定位、遗传进化关系、氨基酸序列的同源性、蛋白质亲水性、抗原表位分析、三级结构预测等生物信息学的内容进行预测和分析。结果表明：PRV—gD基因的开放阅读框的核苷酸长度在1197～1215nt之间，氨基酸长度在399—405个之间，核酸同源性在97．3％-100％之间，氨基酸的同源性在89．8％～98．8％之间，在核酸820—837位有个高变重复区。在遗传进化关系上将我国PRV流行分为四川、华北、东南三个区域。该结果说明PRV—gD基因具有很高的保守性。
- 朱玲许雁峰郭万柱徐志文陈杨
- 关键词：伪狂犬病病毒GD基因克隆生物信息学
