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何津岩: 作品数：33 被引量：121H指数：5; 供职机构：天津医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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柴胡对癫痫模型电活动的调制: 目的研究柴胡对癫痫发作的影响。方法以毛果芸香碱致痫家兔和大鼠为实验对象,采用脑电图和细胞外玻璃微电极记录技术,观察柴胡对癫痫模型大脑皮层放电及海马脑片场电位的影响。结果腹腔注射柴胡后可使癫痫发作次数及发作持续时间显...; 徐淑梅郑开俊何津岩仇晓菁林来祥; 关键词：柴胡癫痫脑电图场电位; 文献传递

YD383,YD438对人宫颈癌细胞体外增殖及细胞周期的影响: JAK-STAT6通路的激活与过敏性疾病的发生密切相关,该通路的抑制子将有望成为新药的靶点。我们在前期的实验中,以JAK-STAT6信号传导通路为靶体,建立了STAT6活性依赖性的可稳定表达荧光素酶报告基因的HeLa-I...; 笪宇蓉姚智邓为民洪敬欣何津岩杨洁; 文献传递

hnRNP A1的增强型绿色荧光标记及细胞应激定位分析: 2014年; 目的构建包含有核不均一核糖核蛋白(hnRNP)A1蛋白编码区序列的真核表达质粒pEGFP-C1-hnRNP A1,并对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的hnRNP A1蛋白进行细胞应激共定位分析。方法提取HeLa细胞总RNA,以针对hnRNPA1-3′非翻译区的特异性片段为反转录引物,反转录出包含hnRNP A1编码区序列的cDNA,并以其为模板,降落PCR法扩增出带EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切位点的目的基因,利用双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pEGFP-C1,在T4-DNA连接酶的催化下将两者连接构建成pEGFP-C1-hnRNP A1重组质粒,然后将重组质粒转染入HeLa细胞内,以激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP-hnRNP A1的荧光表达情况,Western印迹法检测EGFP与hnRNP A1的融合表达情况,最后进行细胞原位杂交及细胞免疫荧光检测在氧化应激状态下EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA(应激颗粒的标记成分)及DPC1a(加工体的标记蛋白)的应激共定位。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误,激光共聚焦荧光显微镜观察和Western印迹结果检测到绿色荧光融合蛋白的表达;EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA呈现共定位,但与DPC1a无共定位关系。结论重组pEGFP-C1-hnRNPA1质粒成功构建并表达,应激状态下EGFP标记的hnRNPA1参与应激颗粒的构成。; 高星杰宋娟葛林付雪孙晓明张纬何津岩姚智杨洁; 关键词：绿色荧光蛋白质类 HNRNP PEGFP-C1

活细胞内人IGFBP2-3’UTR基因的GFP—MS2荧光系统标记: 2014年; 目的利用GFP—MS2系统在活细胞内对胰岛素样生长因子结合蛋白2（insulin-hke growth factor，bindin gprotein2，IGFBP2）mRNA3’非翻译区（3’untranslated region，3’UTR）进行绿色荧光标记，构建pT-／-IGFBP2-3’UTR-24×MS2重组质粒。方法提取HeLa细胞总RNA，以针对IGFBP2-3’非翻译区的特异性片段为反转录引物，反转录出cDNA，并以其为模板，降落PCR法扩增出带有EcoRI和BamHI双酶切位点的1GFBP2—3’UTR目的基因，再利用双酶切法将目的片段连接到psG5载体（启动子为T7）上，构建重组质粒pT-／．IGFBP2-3’UTR；同时。以BglII和BamHI双酶切法从pCR4-24xMS2SL．stable质粒上切下24×MS2结合位点片段并将其插入pT7-IGFBP2-3’UTR，构建重组质粒pT7-IGFBP2-3’UTR-24×MS2；然后将构建的重组质粒pT7-IGFBP2-3’UTR-24×MS2、pMS2．GFP质粒与pERFP-Tudor-SN质粒共同转染人HeLa细胞内，以激光共聚焦荧光显微镜检测IGFBP2—3’UTR的荧光标记情况及应激共定位。结果以酶切质粒法及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误．激光共聚焦结果显示在胞浆中检测到IGFBP2．3’UTR的绿色荧光信号，在细胞受到氧化应激时IGFBP2—3’UTR信号呈颗粒状聚集，且与应激颗粒（stressgranules，SGs）的标志蛋白Tudor-SN呈共定位关系。结论针对IGFBP2—3’UTR的GFP-MS2荧光标记系统质粒构建成功；细胞应激时，ICFBP2-3’UTR被招募至sGs结构中。; 付雪高星杰张毅史雪彬辛灵彪刘欣于林杨洁何津岩; 关键词：重组质粒

一种针对人Tudor-SN蛋白T103位点的应激磷酸化抗体制备方法: 一种针对人Tudor-SN蛋白T103位点的应激磷酸化抗体。本发明是以多功能人Tudor-SN蛋白为研究对象，首先通过近红外双色激光成像及质谱分析方法确定在受到外界环境氧化应激时人Tudor-SN蛋白103位点苏氨酸发生...; 杨洁高星杰苏超张毅付雪何津岩; 文献传递

钩藤对家兔癫癇模型电活动的调制被引量：5: 2003年; 目的:研究钩藤对癫癇发作的影响。方法:采用脑电图描记术,观察钩藤对毛果芸香碱致癇家兔大脑皮层放电的影响。结果:腹腔注射钩藤后可使癫(?)发作次数及发作持续时间显著减少,发作间隔时间显著延长(P<0.05)。结论:钩藤注射液能明显抑制癫痫模型电活动,提示钩藤具有抗癇作用。; 郑开俊徐淑梅何津岩仇晓菁林来祥; 关键词：钩藤癫痫脑电描记术

重组pEGFP—hSnu 114质粒的构建及表达: 2009年; 目的将hSnu114基因定向连人pEGFP质粒GFP的下游，使hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞内融合表达。从而为进一步研究hSnu114蛋白的功能奠定实验基础。方法本实验已经构建tr1E57R／T—hSnu114和pcDNA3．1（-）-hSnu114重组质粒，想要构建pEGFP—hSnu114重组质粒，需通过引入SalⅠ酶切位点，调整N端起始密码子与绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）基因之间的序列，使其不破坏读码框，融合蛋白正确表达。PCR扩增出hSnu114的第一部份（SalⅠ～MunⅠ基因序列），从hSnu114-peDNA3．1（-）重组质粒回收hSnu114的第二部分（MunI～BamHI片段），定向克隆至T／A载体，构建hSnu114全长（SalI～BamHI）pTZ57R／T重组质粒。采用SalI和BamHI双酶切方法，从重组质粒中获得hSnu114全长，将该基因片段连接入pEGFP质粒。将构建成功的pEGFP—hSnu114质粒，转染人HeLa细胞，荧光显微镜下可观察绿色荧光蛋白表达。进行Western印迹检测。结果①hSnu114Sal1～MunI目的片段获取。②将该pEGFP—hSnu114质粒进行双酶切鉴定可见hSnu114全长片段。③转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。④Western印迹可检测到pEGFP—hSnu114融合蛋白：结论①hSnu114全长成功载入pEGFP质粒。②hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞中融合表达。; 李晓冬方建飞东莉洁葛林何津岩杨洁; 关键词：重组质粒融合蛋白

重组质粒pEGFP—C1-STAT6的构建及在HeLa细胞中表达: 2009年; 目的构建以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein，EGFP）为报告基因的重组质粒pEGFP—C1-STAT6．观察其在HeLa细胞中的表达。方法以重组质粒pCLNEO—STAT6为模板，PCR法扩增出目的基因，将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP—C1上，构建重组质粒pEGFP—C1-STAT6，脂质体法转染HeLa细胞，western印迹检测融合蛋白的表达，并在荧光显微镜下观察融合蛋白的定位和分布。结果成功构建质粒pEGFP—C1—STAT6，并在HeLa细胞中实现表达；Western印迹检测到融合蛋白EGFP—STAT6；在荧光显微镜下观察到绿色的融合蛋白表达和定位。结论重组质粒pEGFP—C1-STAT6构建成功，可用于标记STAT6蛋白，为进一步研究STAT6在信号转导中的作用机制奠定基础。; 方建飞李晓冬何津岩葛林杨洁; 关键词：增强型绿色荧光蛋白 STAT6 重组质粒

一种针对人Tudor-SN蛋白T73位点的应激磷酸化抗体制备方法: 一种针对人Tudor-SN蛋白T73位点的应激磷酸化抗体。本发明是以多功能人源Tudor-SN蛋白为研究对象，首先通过近红外双色激光成像及质谱分析方法确定在受到外界环境氧化应激时人Tudor-SN蛋白73位点苏氨酸发生磷...; 杨洁高星杰苏超张毅葛林何津岩; 文献传递

重组真核质粒pEGFP—C2-hTudor—SN—SN（1～4）的构建及表达: 2012年; 目的将人类Tudor—SN（tudor staphylococcal nuclease）蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒，使Tudor—SN蛋白SN各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板，PCR法扩增出目的基因，利用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切法将目的片段连接到pEGFP—C2载体上，再将构建成功的pEGFP-C2-Tudor—SN-SN（1～4）重组质粒转染入HeLa细胞内，以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况。结果以单／双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误，荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达。结论重组pEGFP-C2-hTudor—SN-SN（1—4）质粒成功构建并表达。; 辛灵彪高星杰付雪张毅史雪彬陈朴尹洁何津岩杨洁; 关键词：PEGFP-C2 重组质粒融合蛋白

何津岩

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