侯利华
- 作品数：86 被引量：127H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人干扰素INF-ω在植物乳杆菌中的表达与鉴定
- 2009年
- 目的以植物乳杆菌为载体,将干扰素IFN-ω基因导入植物乳杆菌内,作为先期探索和尝试,构建重组阴道微生态菌株。方法采用抗菌肽诱导双组分调节表达系统,以细菌素Sakacin A为诱导物、sapK和sapR为双组分调节基因的穿梭质粒pSIP300,将干扰素ω基因置于pSIP300上,构成重组质粒pSIP300-ω,在大肠埃希菌DH5α中进行扩增,分别电转化3株植物乳杆菌:Lacbacillus plantarum1.3,Lacbacillus plantarum1.11,Lacbacillusplantarum14917。结果与结论经SDS-PAGE与ELISA检测证实,成功构建了能够表达IFN-ω重组植物乳杆菌Lacbacillus plantarum1.11/pSIP300-ω。
- 曹晓梅张虎成刘树玲侯利华付玲陈薇
- 关键词：植物乳杆菌
- 丙型肝炎病毒部分非结构区蛋白B细胞表位的研究
- 丙型肝炎病毒（HCV）是导致非胃肠道传播的肝炎的主要致病原.为单股正链RNA病毒,3.000多个氨基酸的前体蛋白切割后分为结构区与非结构区蛋白,HCV的非结构蛋白在病毒的复制及成熟中发挥重要的作用.如NS3的丝氨酸蛋白酶...
- 侯利华
- 关键词：丙型肝炎病毒B细胞表位噬菌体肽库
- 文献传递
- 前列腺干细胞抗原与热休克蛋白70羧基端结构域的融合表达及纯化
- 2012年
- 目的构建前列腺干细胞抗原(prostate stem cell antigen,PSCA)及热休克蛋白70(heat-shock protein,HSP70)羧基端结构域的重组表达质粒,对重组融合蛋白进行诱导、表达及纯化,为肿瘤疫苗的研究奠定基础。方法克隆人HSP70羧基端基因及PSCA基因,构建重组表达载体pET21-PSCA-HSPC,重组融合蛋白经(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,利用单克隆抗体进行Western blot鉴定,最后进行蛋白纯化。结果成功构建了重组表达质粒pET21-PSCA-HSPC;SDS-PAGE结果显示目的蛋白以可溶性形式存在,经镍柱亲和层析、苯基柱疏水及凝胶过滤柱纯化后,重组融合蛋白纯度在95%以上。结论该研究成功实现了PSCA与HSP70羧基端结构域的可溶性表达。
- 董磊张晓鹏易绍琼任军侯利华付玲于长明陈薇
- 关键词：前列腺干细胞抗原热休克蛋白
- 特异靶向AML1-ETO+细胞的渗透肽的表达纯化与筛选
- 细胞渗透肽(cell penetrating proteins,CPP)是一类由5～30个氨基酸组成的短肽,具有特殊的细胞膜穿透作用。研究发现其能够将药物大分子物质转运到细胞内,在细胞生物学和细胞免疫学,尤其是在药物开发...
- 赵陶然董韵竹张金龙吴诗坡侯利华赵兴卉徐俊杰陈薇
- 关键词：AML1-ETO白血病蛋白表达
- 文献传递
- 基于活体成像的表达人PSCA抗原的小鼠肿瘤模型的建立被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨并建立可供药物评价或生物学功能研究的表达人PSCA抗原的荧光素酶小鼠肿瘤模型。方法:克隆人PSCA基因及荧光素酶基因luc,构建真核表达质粒pcDNA-PSCA及pcDNA-luc,共转染RM-1细胞株;照度计检测转染细胞的荧光素酶活性,RT-PCR及流式细胞术检测PSCA的表达,筛选出共表达荧光素酶及人PSCA的RM-PSCA/luc细胞株;将RM-PSCA/luc细胞接种C57BL/6小鼠,观察所致肿瘤的生长情况及小鼠存活状况,并对小鼠进行活体成像检测Luc的表达;采用免疫组织化学染色方法检测人PSCA在小鼠肿瘤组织中的表达。结果:筛选到了稳定共表达Luc及人PSCA抗原的RM-PSCA/luc细胞,接种实验小鼠全部成瘤,肿瘤生长迅速,小鼠平均存活38天;转染荧光素酶基因的肿瘤细胞生物特性稳定,活体成像仪检测到转染荧光素酶细胞在小鼠体内活体成像,荧光素酶表达活性的强弱能够反映肿瘤大小;免疫组织化学染色方法检测到小鼠肿瘤组织PSCA的表达。结论:成功构建了可用于活体成像表达人PSCA抗原的小鼠肿瘤模型,为相关肿瘤药物及疫苗的研发奠定基础。
- 董磊张晓鹏易绍琼毛亚丽于婷侯利华付玲于长明陈薇
- 关键词：前列腺干细胞抗原肿瘤模型
- 乙肝核心蛋白与结核抗原或抗原片段的重组融合蛋白及用途
- 本发明涉及乙肝核心蛋白和结核分枝杆菌抗原或抗原片段所构成的一种或数种重组融合蛋白，所述的结核抗原或抗原片段以单抗原或抗原片段，或者组合在一起的多种抗原或抗原片段的形式插入到乙肝核心蛋白的相同或不同的许可位点。本发明所述的...
- 陈薇徐俊杰殷瑛张军董大勇李浩侯利华付玲
- 文献传递
- 杀灭芽孢杆菌芽孢的复合制剂
- 本发明公开了一种杀灭芽孢杆菌芽孢的复合制剂。本发明提供的复合制剂，其活性成分是乳酸链球菌素和L-丙氨酸。应用本发明的复合制剂，在常温条件下，在15min内，对芽孢的杀灭率可达99.37％，比常规试剂乳酸链球菌素提高了约5...
- 陈薇李曼侯利华曹晓梅付玲李建民张晓鹏董大勇宋小红
- 文献传递
- 利用SEC-HPLC测定鼠神经生长因子的纯度被引量：1
- 2013年
- 目的：建立检测鼠神经生长因子（mNGF）纯度的分子排阻高效液相色谱法（SEC-HPLC）。方法：利用TSK G3000 SWXL分析柱和Waters 2695/2487高效液相色谱系统检测mNGF标准品纯度，并对方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、检测限及耐用性等指标进行评估。结果：空白溶剂在mNGF积分范围内无特异峰出现；样品浓度与吸收峰之间线性回归系数R2=0.9998；6次进样峰面积相对标准偏差（RSD）为1.18%；中间精密度分析RSD为0.45%；检测限为0.2μg；耐用性实验表明磷酸盐浓度在0.2~0.3 mol/L之间变动对检测结果无影响。结论：各项指标符合规定，SEC-HPLC法可用于检测mNGF的纯度。
- 张金龙任军付玲宋晓红陈俭勤吕鹏侯利华
- 关键词：鼠神经生长因子纯度
- 破伤风毒素受体结合区Hc在大肠杆菌中的高效表达及应用
- 本发明涉及一种通过核苷酸序列优化使破伤风毒素受体结合区Hc在大肠杆菌中获得高效可溶性表达的方法。根据国内破伤风梭菌C.Tetani强毒株CMCC64008株的测序结果，对破伤风毒素受体结合区Hc序列进行分析优化，优化后的...
- 陈薇于蕊侯利华于长明刘树玲任军房婷
- 聚乙二醇化重组人干扰素ω偶合物
- 本发明公开了聚乙二醇化重组人干扰素ω偶合物及其制备工艺，相比未修饰的人干扰素ω，在人体内具有更长的半衰期，能够明显减少用药次数，降低毒副作用，特别适合于治疗对干扰素ω敏感的慢性病毒感染，临床上具有广泛的应用前景。
- 陈薇李建民侯利华付玲李冰徐春娥张金龙任军
- 文献传递
