刘哲亮
- 作品数：20 被引量：84H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 残粒脂蛋白对循环内皮祖细胞血管新生的影响
- 背景与目的:内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs)的数量和功能与血管内皮功能明确相关。细胞复制性衰老是指细胞失去分化能力,同时发生相应形态学改变和其它功能障碍。危险因素通过氧化机...
- 刘哲亮
- 关键词：内皮祖细胞微小RNA血管新生血运重建
- 文献传递
- 肺癌干细胞与肺癌的发生被引量：17
- 2014年
- 背景:肺癌具有高度异质性,能够抵抗化疗药物治疗,5年生存率小于15%,目前难以确定肺癌的异质性和耐药性的发病基础。肿瘤干细胞模型近年来吸引了相当多的关注,通过这种模型可以解释各种肿瘤的异质性、耐药性、休眠、复发和转移的机制。目的:通过综述各类肺癌的组织学类型和肿瘤生长部位的特征,概括肺癌干细胞与各种肺癌发生的关系,从而为消灭肺癌干细胞攻克肺癌提供理论依据。方法:以英文检索词为"lung cancer,cancer stem cell,lung cancer stem cell,lung cancer occur,tumor heterogeneity,drug resistance,gene mutation,signal pathways"由第一作者检索1990至2014年Sciencedirect/PubMed数据库,查阅近年肺癌干细胞对肺癌发生的影响的相关文献,最终保留48篇文献。结果与结论:肿瘤干细胞模型近年来吸引了相当多的关注,通过这种模型可以解释各种肿瘤的异质性、耐药性、休眠、复发和转移。肺癌干细胞被认为是一类异质的细胞群,多种信号通路可以有针对性的有效的消除他们,从而有助于增强治疗效果。目前多学科通力合作,正在进行肺癌干细胞表征和靶定,这将给肺癌治疗领域带来显著的治疗受益。
- 刘哲亮肖高明陈跃军吴冠宇
- 关键词：干细胞肺癌肺癌干细胞肺癌发生肿瘤异质性肿瘤耐药性
- 紫绀型先天性心脏病患儿外周血内皮祖细胞的体外分离培养和鉴定被引量：1
- 2008年
- 背景:一些基础研究成果对于新生血管形成和内皮祖细胞的自动募集机制已做出了合理的解释,体外培养的内皮祖细胞可分化为成熟的内皮细胞,有助于血管内皮修复。目的:拟建立从紫绀型先天性心脏病患儿外周血获取内皮祖细胞的方法。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-08/2008-04在中南大学湘雅二医院完成。材料:外周血来源于2007-10/12中南大学湘雅二医院胸外科收治的15例法洛四联症患儿,安静状态下末梢氧饱和度为(78.0±5.0)%。方法:采用Ficoll密度梯度离心法从外周血中分离单个核细胞,以含体积分数为0.2的胎牛血清、4mg/L牛脑垂体提取物、2mmol/L谷氨酰胺、100U/mL氨苄青霉素、100g/L硫酸链霉素的M199培养基进行体外诱导分化,调整细胞密度为2×109L-1,接种至预铺人纤维连接蛋白的6孔培养板,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下,贴壁法纯化培养10d。主要观察指标:细胞形态和生长情况,Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白/FITC标记的荆豆凝集素双荧光染色鉴定结果,vWF、CD34及CD31免疫组化鉴定结果,PE标记CD133抗体与藻蓝蛋白标记KDR抗体免疫荧光鉴定结果,透射电镜观察内皮祖细胞特征细胞器。结果:接种后0.5h细胞贴壁生长,培养第7天形成典型的细胞集落,第14天呈铺路石样外观,细胞数量级可达108。培养第10天,贴壁细胞中70%呈Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白/FITC-UEA-Ⅰ双阳性,为正在分化的内皮祖细胞;vWF、CD34及CD31免疫组化染色均呈阳性表达;PE标记CD133抗体呈红色荧光,藻蓝蛋白标记KDR抗体呈蓝色荧光。透射电镜可见内皮祖细胞特征性幼稚线粒体及Weibel-Palade小体。结论:实验成功从紫绀型先天性心脏病患儿外周血中分离培养并获取高纯度的内皮祖细胞,且在体外稳定快速扩增。
- 刘哲亮吴忠仕胡建国陈勇胡野荣李伟吴坤
- 关键词：内皮祖细胞外周血紫绀先天性心脏病
- 光氧化反应增加去细胞牛颈静脉的组织稳定性被引量：6
- 2006年
- 目的:观察去细胞及去细胞后光氧化反应对牛颈静脉的组织稳定性的影响。方法:实验于2005-06/09在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室完成。①将新鲜牛颈静脉纵形剪开成血管片,横行切取牛颈静脉血管片成6根血管条,随机分为6组,新鲜组,去细胞组,及根据不同的光氧化处理时间将去细胞结合光氧化处理组分为去细胞后光氧化反应12,24,36和48h组。②通过测定处理前后的组织厚度、热皱缩温度、抗张强度及组织蛋白提取分析来比较组织稳定性。结果:①各组在处理前后的厚度:去细胞处理后血管片比处理前变薄[(0.36±0.85),(0.43±0.94)mm,P<0.05],而去细胞再光氧化处理后的血管片厚度无明显改变(P>0.05)。②各组血管片组织稳定性评价:去细胞组热皱缩温度及抗张强度比新鲜组、去细胞后光氧化反应12h组、24h组、36h组、48h组明显降低[热皱缩温度:(69.75±0.54),(72.50±0.53),(73.80±0.59),(74.40±0.46),(75.10±0.21),(75.20±0.26)℃,P<0.05;抗张强度:(3.13±0.94),(5.19±0.65),(4.54±0.88),(4.67±0.60),(5.55±0.43),(5.80±0.82)MPa,P<0.05];经光氧化处理后热皱缩温度上升且高于新鲜组(P<0.05);而最大应力与新鲜组比较无明显变化(P>0.05);去细胞后光氧化反应组的组织蛋白提取量明显少于新鲜组及去细胞组,且随光氧化反应时间延长,组织蛋白提取量逐步减少。结论:去细胞处理降低了牛颈静脉的组织稳定性,而经光氧化进一步处理后组织稳定性增强,且随光氧化时间延长组织稳定性增强。
- 张明胡铁辉吴忠仕胡建国徐新华胡野荣吕卫东李伟刘哲亮
- 关键词：光化学疗法颈静脉
- 紫绀型先天性心脏病患者循环内皮祖细胞的数量及功能变化
- 目的：检测紫绀型先天性心脏病患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的数量及功能变化，探讨其作为组织工程带瓣血管种子细胞的可行性。
方法：选取法洛四联症患者10...
- 刘哲亮
- 关键词：紫绀先天性心脏病内皮祖细胞
- 文献传递
- 内皮祖细胞在血管组织工程研究中的应用现状
- 2007年
- 组织工程血管是修复紫绀型先心病右心室流出道的潜在替代材料,实验研究表明外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)可作为构建组织工程血管的良好种子细胞。现阶段国内外对组织工程血管的研究方兴未艾,EPC在血管组织工程研究中的应用还处在体外培养或动物实验阶段,尚无临床应用报道。近来某些基础研究的成果对于新生血管的形成和EPC的自动募集机制有了合理的解释,其中缺氧被认为是重要的始动因素,这些研究成果也为EPC作为种子细胞应用于血管组织工程提供了理论基础。所以,阐明EPC的低氧诱导机制及其在血管组织工程的应用必将有助于复杂紫绀型先心病的外科治疗。本文主要介绍了目前该领域研究现状及相关研究基础的进展,并总结提出了在EPC研究和未来临床应用中需解决的问题。
- 刘哲亮吴忠仕李伟
- 关键词：内皮祖细胞种子细胞先天性心脏病血管组织工程
- 普胸术后再次剖胸止血86例分析被引量：1
- 2014年
- 目的探讨普胸术后胸内活动性出血的原因,预防及外科治疗指征。方法回顾性分析2003年1月-2013年1月普胸术后大出血再次开胸止血治疗86例患者资料。结果全组病例均痊出院,无死亡及胸腔感染病例。结论对普胸术后发生的活动性出血应积极再次剖胸止血,床旁胸片应做为术后大出血病人常规检查。
- 陈跃军邹求益朱广汤轶刘哲亮肖高明
- 关键词：胸外科术后出血
- sEHi对冠心病患者内皮祖细胞功能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂(soluble epoxide hydrolase inhibitor,sEHi)tAUCB对冠心病(CHD)患者外周血来源的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)迁移、血管生成能力和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:采用密度梯度离心法从CHD患者外周血获取单个核细胞培养7 d后,采用免疫荧光和流式细胞仪进行EPCs的鉴定;随后用不同浓度(0,10-6,10-5,10-4mol/L)tAUCB干预24 h,分别用Transwell小室和Matrigel-Matrix管腔形成的体外模型检测其迁移、血管生成能力的变化,提取蛋白用Western印迹检测EPCs VEGF的表达。培养年龄性别匹配的健康对照者的EPCs作为对照组。结果:与健康对照组相比,CHD患者EPCs的迁移及血管生成能力均显著下降(P<0.05);与处理前(0 mol/L tAUCB)相比,tAUCB呈浓度依赖性地显著增加CHD患者EPCs迁移、血管生成能力并促进CHD患者EPCs表达VEGF。10-6mol/L tAUCB即明显增加CHD患者EPCs的上述功能并促进其VEGF的表达(P<0.05)。结论:sEHi具有正向调节CHD患者EPCs功能的作用,其有望成为一类治疗CHD的新型药物。
- 许丹焰陈琛蒋云赵水平刘哲亮谢小梅刘玲
- 关键词：冠心病内皮祖细胞血管内皮生长因子
- 紫绀型先天性心脏病病人循环内皮祖细胞的数量及功能变化
- 2008年
- 目的探讨紫绀型先天性心脏病病人外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）的数量及功能特点。方法选取法洛四联症及单纯室间隔缺损病人各10例，采用Fieoll密度梯度离心法从外周血中分离单个核细胞，用添加牛脑垂体提取物和胎牛血清的M199培基进行体外诱导分化培养。用免疫组化和透射电镜行EPC表型鉴定；采用流式细胞仪计数CD133^＋／KDR^＋细胞；采用改良的Boyden小室，黏附能力测定实验和MTT比色法，观察EPC的迁移、黏附及增殖能力。结果紫绀型先天性心脏病病人外周血内皮祖细胞的数量增多[集落记数（14．7±3．1）／100倍视野对（8．2±1．3）／100倍视野；DiI-Acldl^＋／UEA-I^＋细胞数（72．2±9．73），200倍视野对（51．2±3．83）／200倍视野；CD133^＋／KDR^＋细胞百分比（0．66±0．20）％对（0．18±0．08）％，P〈0．01]，其迁移能力[（140．6±9．24）／200倍视野对（91．84±8．58）／200倍视野]、黏附能力[（149．00±11．58）／200倍视野对（112．6±7．02）／200倍视野]及增殖能力（0D值0．34±0．02对0．27±0．01）增强（P〈0．01）。结论紫绀型先天性心脏病病人循环内皮祖细胞的数量增多，其迁移、黏附及增殖能力增强。
- 刘哲亮吴忠仕胡建国陈勇胡野荣李伟
- 关键词：心脏缺损先天性发绀细胞黏附细胞运动
- 人肺鳞癌来源肺癌干细胞原代培养:数量及功能变化被引量：3
- 2015年
- 背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法,及其在原代培养过程中的数量和功能变化。方法:借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外排法初筛SP细胞,将初筛细胞置于条件培养基分离培养,后续应用流式细胞分析及分选技术,进一步分离纯化肺鳞癌干细胞。实验结合CD133和CD44鉴定目标细胞,计数第1代和第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数;检测第1代和第4代肺癌干细胞的单细胞克隆形成能力、平板集落形成能力和细胞球形成能力。结果与结论:传代培养第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数明显增多,流式细胞检测结果显示,第4代和第1代的CD133+和CD133/CD44双阳性细胞表达率差异有显著性意义,第4代和第1代肺癌干细胞的CD44+细胞表达率差异无显著性意义。第4代细胞的单细胞克隆形成能力,平板集落形成能力和细胞球形成能力比均明显强于第1代肺癌干细胞。实验初步从肺鳞癌患者新鲜肺组织标本中分离培养并获取干细胞样肺鳞癌细胞,且在体外稳定快速扩增,为进一步研究肺鳞癌干细胞的异质性和耐药性奠定基础。
- 刘哲亮邬娇王林纤陈跃军吴冠宇肖高明
- 关键词：干细胞肿瘤干细胞肺癌干细胞原代培养细胞鉴定
