刘海英
- 作品数：15 被引量：34H指数：4
- 供职机构：山东大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
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- 苯那普利与氯沙坦及其联合应用对糖尿病肾病大鼠Nephrin表达的影响
- 目的探讨苯那普利、氯沙坦及联合应用对糖尿病肾病大鼠nephrin蛋白表达的影响,比较在延缓糖尿病肾病 (DN)进展方面作用的不同。方法采用一侧肾切除腹腔注射STZ(55mg／kg)建立糖尿病大鼠模型,以血糖大于 16．7...
- 陈兵张燕柳刚刘海英侯香华关广聚
- 文献传递
- 人肾小球系膜细胞原代培养及鉴定方法的研究被引量：14
- 2007年
- 目的：建立一种重复性好、传代次数多的人肾小球系膜细胞培养方法。方法：取肾脏肿瘤手术切除后远离患病部位的正常肾脏组织、水囊引产的胎儿肾,三层筛网滤过分离,取最下层筛网上组织,用胶原酶消化,培养正常人肾小球系膜细胞。同时采用形态学观察和免疫荧光技术,对鼠抗人结蛋白,鼠抗人角蛋白进行鉴定,采用MTT、流式细胞仪技术对不同来源肾脏的系膜细胞生长状况进行比较。结果：形态学、免疫荧光法鉴定表明培养细胞为肾小球系膜细胞,胎肾原代培养后8~10 d即可传代,而成年肾脏原代培养后需15~16 d方可传代。成年肾脏培养细胞至第4代细胞生长缓慢,贴壁能力减弱,出现死亡。而胎肾培养细胞则可继续培养至第7~10代。结论：三层滤网法分离人肾小球系膜细胞,方法简单、高效,培养的原代肾小球系膜细胞符合肾小球系膜细胞的生物学特性,且进一步证明胚胎组织比成年个体肾脏原代细胞培养容易成功。
- 刘海英关广聚张燕柳刚陈兵李学刚
- 关键词：肾小球系膜细胞细胞原代培养胎肾
- 霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响被引量：5
- 2006年
- 霉酚酸酯（MMF）是一种新型的免疫抑制剂。本研究旨在探讨MMF对不同浓度葡萄糖所致的系膜细胞增殖及细胞外基质增多是否有抑制作用。
- 张燕关广聚陈兵刘海英侯香华
- 关键词：肾小球系膜细胞增殖霉酚酸酯高糖免疫抑制剂细胞外基质葡萄糖
- 高糖对肾小球系膜细胞表达结缔组织生长因子及其受体蛋白的调节
- 李学刚关广聚柳刚刘海英宋燕
- 膜性肾病关键基因的生物信息学分析被引量：2
- 2021年
- 目的基于微阵列数据鉴定膜性肾病(MN)中显著差异表达的基因,并为膜性肾病的诊断与治疗寻找新的潜在基因靶点。方法通过基因表达数据库(GEO)下载GSE108109、GSE115857两个数据集。应用GEO2R工具筛选出正常肾组织与MN患者肾组织的差异表达基因(DEGs)。应用DAVID数据库,对DEGs进行基因本体论(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集。然后,应用STRING工具和Cytoscape软件构建并可视化DEGs的蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络,通过Degree分析识别其中的Hub基因。应用NephonSeqv5在线平台分析Hub基因表达与MN临床特征的关系。结果共筛选出240个DEGs,其中表达上调基因149个,表达下调基因91个。DEGs涉及许多功能和表达途径,如细胞形态调节及细胞骨架的构建。在PPI网络中,共识别出13个Hub基因,包括TP53、PIK3R1、KIT、QSOX1、LAMB1、SHC1、CDK2、APOL1、NES、PTPN6、POLR2A、PRKACA、LTBP1。PRKACA、LTBP1基因表达与蛋白尿呈正相关(r分别为0.858、0.799,P分别为0.006、0.017),POLR2A的表达与蛋白尿呈负相关(r=-0.866,P=0.005)。PRKACA基因表达与血肌酐呈负相关(r=-0.601,P=0.008),POLR2A的表达与血肌酐呈正相关(r=0.583,P=0.011)。结论通过生物信息学分析MN肾组织微阵列数据,发现240个DEGs和13个Hub基因,这些基因可能为MN的诊断与治疗提供潜在基因靶点。
- 窦涪琳刘庆珍徐巧莹刘海英傅余芹
- 关键词：膜性肾病生物信息学分析差异表达基因关键基因
- 高糖对系膜细胞过氧化物酶体增殖物激活受体家族表达的影响
- 目的糖尿病肾病(diabetes nephropathy DN)是糖尿病 (diabetes mellitus,DM)最常见的慢性并发症,是DM致死致残的重要原因之一。随着DN发病率逐年提高,DN的预防和治疗成为重要的医...
- 刘海英关广聚柳刚文蓉珠张艳陈兵李学刚
- 文献传递
- 高糖对人肾小球系膜细胞过氧化物酶体增殖物激活受体家族表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究高糖作用下人肾小球系膜细胞(HMC)中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)家族的表达及转录活性的变化,探讨PPAR介导的信号转导途径在糖尿病性肾病发生发展中的作用。方法使用3层滤网法分离HMC,3～7代细胞用于实验。HMC分为正常对照组(5mmol.L-1葡萄糖,NG)、渗透浓度对照组(5mmo.lL-1葡萄糖+25mmol.L-1甘露醇,MG)和高糖组(30mmol.L-1葡萄糖,HG)。mRNA水平及蛋白水平的检测分别采用实时定量PCR和蛋白印迹法。结果NG组HMC中PPARα,PPARγ及PPARδ mRNA均有表达,PPARγ蛋白亦有表达。MG组上述mRNA表达无明显变化。高糖刺激后,PPARα mRNA表达明显高于MG组,PPARγ和PPARδmRNA表达减少,PPARγ蛋白表达亦明显降低,PPARγ激活的基因adipophilin的表达亦减少。结论高糖能上调PPARα基因的表达,抑制PPARγ和PPARδ基因表达,并降低PPARγ的转录活性,提示高糖可能通过PPAR介导的信号转导途径在糖尿病性肾病的发生发展中发挥重要作用。
- 刘海英关广聚柳刚文蓉珠张燕陈兵李学刚
- 关键词：细胞培养过氧化物酶体增殖物激活受体高血糖症
- 霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾系膜细胞TGF-B、CTGFmRNA表达的影响
- 目的观察高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞(MCs)的增殖、转化生长因子B(TGF-B)、结缔组织生长因子(CT- GF)mRNA的表达及霉酚酸酯(MMF)对其干预的影响。方法不同高浓度葡萄糖刺激大鼠MCs增殖,选定30mmo...
- 张燕关广聚陈兵柳刚刘海英侯香华
- 文献传递
- 硝基油酸对肾急性缺血再灌注模型小鼠肾的保护作用及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的探讨硝基油酸(OA-NO2)对肾急性缺血再灌注(I/R)模型小鼠肾的保护作用。方法 C57小鼠分为假手术、I/R模型对照、I/R+OA-NO2500μg·kg-1和I/R+油酸(OA)500μg·kg-1组。I/R小鼠使用乙醚麻醉后,开腹采用夹闭双侧肾动脉30 min,去除血管夹,再灌注24 h制备肾I/R模型。I/R+OANO2和I/R+OA组在去除血管夹后分别ip给予OA-NO2和OA 500μg·kg-1,每6 h注射1次。假手术和I/R模型组ip给予乙醇0.8 ml·kg-1。24 h后处死小鼠,取血和肾组织,用全自动生化检测仪检测小鼠血浆尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,HE染色检测肾组织病理改变,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,实时PCR检测肾组织细胞黏附分子1(ICAM-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶胞浆亚基(p47)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶催化亚基(gp91)基因表达,Western蛋白质印迹法检测肾组织TNF-α和IL-1β蛋白表达,ELISA检测肾组织丙二醛(MDA)含量。结果 I/R模型组小鼠血浆BUN和Cr水平较假手术组明显增高(P<0.01);OA-NO2处理后,与I/R模型组比较,血浆BUN水平降低36%(P<0.01),Cr水平降低44%(P<0.01);I/R+OA组BUN和Cr水平无明显变化。I/R模型组小鼠肾组织出现肾小管上皮细胞坏死、细胞结构消失、肾小管管腔扩张和肾小管管腔管型堵塞等改变,血浆TNF-α浓度、肾组织ICAM-1,IL-1β,p47和gp91mRNA表达、TNF-α和IL-1β蛋白表达及MDA含量均较假手术组明显升高(P<0.01);应用OA-NO2处理后,与I/R模型组比较,肾组织病理改变减轻,肾小管管腔扩张明显改善,未发现明显的肾小管管腔管型堵塞;血浆TNF-α浓度由I/R模型组的(590±73)ng·L-1降低至(259±71)ng·L-1(P<0.01),肾组织ICAM-1,IL-1β,p47和gp91基因表达以及TNF-α和IL-1β蛋白表达降低(P<0.01),MDA含量由I/R模型组的(3.6±0.7)mol·g-1组织降低至(1.8±0.4)mol·g-1组织(P<0.01);应用OA处理后,上述指标与I/R模型组比较均无明显差异。结论 OA-NO2对肾I/R
- 吴涛关广聚刘海英
- 关键词：再灌注损伤肾损伤
- 霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:观察霉酚酸酯(mycophenolate mofetil MMF)对高糖环境大鼠肾小球系膜细胞(mesangialcells MCs)增殖及Ⅳ型胶原的影响。方法:以30 mmol/L葡萄糖刺激体外培养的大鼠MCs增殖,加入不同浓度的MMF,采用MTT比色法观察6、12、24、48 h系膜细胞的增殖情况;放射免疫法测定细胞上清液中Ⅳ型胶原的含量。结果:葡萄糖对系膜细胞的增殖效应呈浓度和时间依赖性,反应最佳浓度为30 mmol/L,最佳时点为24 h。MMF有抑制高糖所致MCs增殖、减少细胞外基质的作用,并呈剂量时间依赖性。结论:高糖在一定浓度和一定时段内有刺激大鼠系膜细胞增殖的效应,MMF对高糖所致MCs增殖具有抑制作用,且随MMF剂量增大,作用时间的延长,抑制作用增强。
- 张燕关广聚陈兵刘海英
- 关键词：霉酚酸酯高糖系膜细胞
