张玉霞
- 作品数：76 被引量：102H指数：5
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省农业科学院青年科研基金山东省农业重大应用技术创新课题更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 2016年～2017年山东地区商品肉鸡H9N2亚型禽流感病毒HA基因的分子特征和遗传进化分析被引量：5
- 2018年
- 为了解山东地区商品肉鸡H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对13株从不同肉鸡场分离的H9N2 AIV的HA基因进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的HA基因序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示:13个分离株的HA裂解位点均为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;8株分离株有8处糖基化位点,其余5株存在个别位点缺失情况;受体结合位点除198位有变异外,其它位点均保守;234位氨基酸均为L,因此具有与哺乳动物唾液酸α,2-6受体结合的特征。所有分离株HA基因核苷酸同源性为94.1%~99.8%,氨基酸同源性为94.3%~100%。HA基因进化树显示,所有分离株均属于欧亚分支中的A/Chicken/Beijing/1/1994(A/Duck/Hong Kong/Y280/97)亚群,也同属于近几年在中国鸡群中流行的以A/chicken/Zhejiang/HJ/2007为代表的G57分支。以上研究为H9N2亚型AIV的防控和疫苗研制提供了科学参考。
- 袁小远孟凯张玉霞徐怀英李莉艾武杨金兴亓丽红王友令
- 关键词：H9N2亚型HA基因遗传进化
- 不同ELISA试剂盒与PCR法检测鸡新城疫病毒的比对试验与研究被引量：1
- 2018年
- 分别采用A、B、C公司的商品化新城疫病毒ELISA检测试剂盒和PCR法对50份临床疑似新城疫病料进行新城疫病毒检测方法的比对试验与研究,其中以La Sota疫苗株作阳性对照,SPF鸡胚尿囊液作阴性对照。结果表明,A、B、C三个公司生产的商品化ELISA抗原检测试剂盒的检测结果与PCR检测结果的阳性符合率分别为:94.1%、91.2%、85.3%;阴性符合率分别为:93.8%、87.5%、81.3%;阴阳性总体符合率分别为:92%、92%、84%。A、B、C三个公司的ELISA抗原检测试剂盒的检测时间分别为4、3、3h。产品价格分别为1800、1300、1100元。由此可以看出,间接ELISA法是一种检测结果准确,成本相对较低,省时省力,适用于大批量的新城疫病毒检测方法。与此同时,不同公司生产的商品化ELISA抗原检测试剂盒在敏感性、准确性、试验时长和价格上均存在较大差异,综合分析,B公司生产的商品化ELISA抗原检测试剂盒价格适中、敏感性高、准确性高,可以在临床上进行推广应用。
- 孟凯邵明辰袁小远张玉霞王友令
- 关键词：新城疫病毒PCRELISA
- 家禽大肠杆菌分型方法研究进展被引量：4
- 2011年
- 大肠杆菌感染是家禽在集约化养殖下经常爆发并迅速传播的一种疾病。该病能引起家禽局部或全身性感染,给广大养殖户带来巨大的经济损失。大肠杆菌既是家禽体内的正常菌群又是致病菌,不同类型的大肠杆菌其致病力不同。论文回顾了大肠杆菌目前常用的分型方法,包括常规的血清学分型,生化分型、药敏实验分型以及近年来随着生物学发展新兴的质粒图谱分型和脉冲场分型等,并就大肠杆菌现有的分型方法做一简要阐述,希望能为更好地研究和预防该病的发生,为确定不同菌株之间的关联性、细菌传染源的追踪和寻找传播途径提供更好、更合适的方法做参考。
- 张玉霞徐怀英
- 关键词：家禽大肠杆菌
- 新城疫病毒SD强毒株全长cDNA克隆的构建及序列分析
- 2017年
- 将新城疫病毒SD强毒株的全基因组cDNA序列进行分段扩增,并将各个片段通过In-Fusion技术连于克隆载体pBR322上,获得了SD毒株的全基因组cDNA克隆。通过分段PCR扩增鉴定及全长测序分析,结果表明,SD毒株的全基因组cDNA克隆构建成功,并且成功引入T7启动子序列,全长基因组序列与亲本毒氨基酸序列的一致性为99.9%。单个序列比对发现,全基因组cDNA克隆中有11处碱基突变,其中只有2处引起氨基酸序列发生改变;整个序列未出现基因的缺失、插入变化,因此全长氨基酸的位数未发生任何变化。SD毒株全长cDNA克隆的成功构建和序列分析为后续的反向遗传操作奠定了关键的技术基础。
- 袁小远杨金兴张玉霞孟凯王友令艾武
- 关键词：新城疫病毒重组质粒
- 一种快速鉴别N1、N2亚型流感病毒的方法
- 本发明公开了一种快速测定N1、N2亚流感病毒的方法，本发明采用一步法荧光定量RT-PCR检测方法，将Buffer、dNTP、Enhance？solution预混成2X？one-step？buffer，将多种酶配比进行混合...
- 王友令袁小远宋敏训艾武徐怀英亓丽红张玉霞
- 新城疫病毒抗原性及其核心基因分子变异相关性的研究进展
- 新城疫(ND)是禽类的一种急性、烈性传染病,屡次造成世界性的流行,是严重危害家禽业的两大疫病之一(另一是高致病性禽流感)。我国自上世纪50年代一直采用疫苗预防ND,取得了良好的效果,但近年来,ND的发生出现了一些新特点,...
- 秦卓明徐怀英王友令欧阳文军袁小远张玉霞黄兵金维江
- 文献传递
- 3株传染性法氏囊病病毒的分离与鉴定
- 2018年
- 本研究于2014—2017年从山东省发生传染性法氏囊病的鸡群中分离到3株传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,通过RT-PCR技术对3株分离毒株进行鉴定,并测定其ELD50以及对3周龄SPF鸡的致死率。结果如下:3株传染性法氏囊病病毒分离株均可导致70%以上SPF鸡的死亡,属于强毒株。通过特异性引物对3株分离株VP2基因的高变区进行扩增并测序,序列分析结果显示:3株分离株与5个超强毒株均在同一个大的分支上,同源性在96. 3%~99. 3%之间;与疫苗株B87和D78分属于两个分支,同源性仅为88. 7%~90. 6%。本研究为山东地区传染性法氏囊病的防治提供了有益参考。
- 孟凯袁小远张玉霞李莉王友令
- 关键词：传染性法氏囊病病毒RT-PCRVP2
- 1株鸭坦布苏病毒人工感染雏鸭的病理学研究被引量：10
- 2013年
- 7日龄雏鸭经肌肉接种坦布苏病毒BZ株1周后,发病率100%,死亡率为80%。接种鸭全身多数器官出现充血、出血、坏死等症状,病理学变化主要表现在肝实质严重变性、坏死;脾淋巴细胞局部减少;肾小管上皮细胞肿胀;肺淤血,内有大量细胞渗出;胰腺中可见凝固性坏死灶;大脑软脑膜充血、水肿,小脑脑膜上炎性细胞浸润。鸭接种该病毒后,攻毒组的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、谷氨酰胺转移酶、乳酸脱氢酶水平和血清尿酸的浓度较对照组明显升高。结果表明:坦布苏病毒BZ株可造成全身多器官的病理性损伤以及主要血液生化指标的显著变化,这可能是该病毒致病性的重要机制之一。
- 王友令袁小远杨金兴于可响徐怀英张玉霞艾武秦卓明李玉峰
- 关键词：病理学研究血清酶
- 樱桃谷肉鸭H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)免疫程序研究被引量：4
- 2017年
- 选取1日龄健康无免疫的樱桃谷肉鸭600只,随机分成A、B、C、D 4组,每组150只。B、C和D组在7日龄分别免疫H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)0.5、0.6和0.8 m L/只。A组为非免疫对照组。采用HI方法检测其母源抗体和免疫抗体水平,根据母源抗体和免疫抗体消长规律探讨樱桃谷鸭H5NI亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)的合理免疫程序。结果表明:樱桃谷鸭Re-6与Re-8母源抗体效价和抗体合格率在1日龄最高,分别为7.8log2和100%、7.6log2和100%,14日龄下降至3.93 log2和53.3%、3.78 log2和50.0%,21日龄之后几乎没有保护力;3个剂量试验组免疫抗体水平和抗体合格率在统计学上差异不显著(P>0.05)。建议樱桃谷肉鸭在7日龄免疫,剂量为0.5m L/只。
- 王友令亓丽红徐怀英袁小远张玉霞李莉艾武
- 关键词：H5N1亚型禽流感母源抗体HI抗体效价
- p53基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miRNA-2127靶向关系的验证被引量：2
- 2019年
- 为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORT^(TM)双荧光素酶报告载体中,构建野生型与突变型重组双荧光素酶报告质粒。将293T细胞分为4组,分别共转染野生型报告质粒+阴性对照(NC)、野生型报告质粒+miRNA-2127、突变型报告质粒+NC、突变型报告质粒+miRNA-2127。检测各组细胞中荧光素酶活性差异,结果显示:共转染了野生型报告质粒+miRNA-2127的293T细胞与共转染了野生型报告质粒+NC组相比,荧光素酶活性显著降低(P<0.05);且突变型报告质粒+miRNA-2127组的相对荧光素酶活性显著高于野生型报告质粒+miRNA-2127(P<0.05),说明miRNA-2127能够靶向调控p53基因,且结合位点位于3′UTR区369—375间。
- 张玉霞袁小远王友令孟凯
- 关键词：P53
