李莎
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心肌纤维化病理染色鉴定方法的综合评价被引量：6
- 2017年
- 目的观察比较苏木精-伊红染色法(hematoxylin and eosin staining,HE staining)、Masson染色法和苦味酸-天狼猩红染色法(picric sirius red staining,PSR staining)在评价心肌纤维化的各自特征及优缺点。方法 20只SD大鼠予以盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)制备心肌纤维化模型,以5mg/(kg·d)于同一时间段注射,持续3周。取大鼠心脏组织行HE染色、Masson染色以及PSR染色,置于显微镜下观察纤维化面积及胶原沉积特点,并比较Masson染色和PSR染色纤维化面积所占心肌总面积比重。结果 3种染色方法均可显示心肌纤维化面积,Masson染色和PSR染色所示纤维化面积差异无统计学意义(P>0.05);PSR染色后进一步行免疫荧光染色能够明确区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维的表达,然而Masson染色和HE染色则不能区分。结论 PSR染色法结合免疫荧光技术较Masson染色法和HE染色法,能够更好的评价心肌纤维化程度及胶原纤维类型,对于心肌纤维化的治疗及预防具有重要意义。
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- 关键词：心肌纤维化胶原蛋白MASSON染色
- Pin1通过氧化应激诱导大鼠心室重塑的研究
- 2017年
- 目的讨论肽脯氨酰顺反异构酶Pin1(peptidyl-prolyl isomerase Pin1)与心肌纤维化之间的关系,并验证Pin1是否通过氧化应激参与异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的大鼠心肌纤维化。方法 30只SD大鼠随机分为空白对照组(A组,8只)、ISO组(B组,13只)以及ISO+胡桃醌(Juglone)组(C组,9只)持续用药4周后取材,行Masson染色观察心肌病理改变和心肌间质胶原纤维增生反应,测定心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);应用活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针检测心肌组织氧化活性物质的生成,运用免疫组织化学方法对心肌组织Pin1进行定性定量分析;利用反转录酶-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测Pin1、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平。结果与A组比较,B组心肌间质胶原增生明显,大量纤维结缔组织将心肌肌束分隔包饶,心肌细胞排列紊乱;CVF明显增高(P<0.01);此外B组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及Pin1 mRNA表达水平高于A组,差异有统计学意义(P<0.01)。与B相比,C组心肌肌束大体规则,心肌间质及血管旁有少量纤维结缔组织增生;CVF低于B组(P<0.05);Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白、Pin1 mRNA表达水平C组低于B组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论上述结果表明在ISO诱导的大鼠心肌纤维化模型中,Pin1与氧化活性物质的产生有关;加入Pin1特异性抑制剂Juglone后显著减少了氧化活性物质的产生,故尚可认为Pin1可能通过某种机制诱导氧化应激反应参与ISO介导的大鼠心肌纤维化的发生与维持。
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- 关键词：心肌纤维化氧化应激胶原蛋白
- 逆转录-半套式-聚合酶链反应单管法检测血清中HCV RNA
- 2002年
- 目的 探讨建立一种更简便 ,更特异灵敏的逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)单管法。方法 采用蜡隔将RT和PCR扩增 2个独立的反应体系在 1个Eppendoff(Ep)管中分隔开来 ,设计内外引物 ,优化反应体系及条件 ,使整个检测反应经高温启动继而连续封闭地完成。结果 在 6 0例血透析患者血清中 ,33例 (5 5 % )抗 HCV IgG阳性和 2 7例抗 HCV IgG阴性血清用单管RT PCR分别检出 2 8例 (85 % )和 3例 (9% )HCVRNA阳性 ,并对 3份阳性PCR产物作核酸序列测定。本方法的检测灵敏度为 10 2 拷贝 /ml。结论 RT PCR单管法在保持高灵敏度的前提下 ,提高了特异性 ,具有简单高效 。
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- 关键词：聚合酶链反应丙型肝炎病毒HCVRNA
