王德培
- 作品数:8 被引量:21H指数:2
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 雅致枝霉△<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶启动子序列及其应用
- 本发明涉及一种从雅致枝霉中分离到的Δ<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶启动子序列及其应用。本发明包括具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明包括利用该启动子序列来改变微生物细胞蛋白质成分的微生物基因工程方法...
- 李明春王德培魏东盛邢来君张颖慧孙伟
- 文献传递
- 利用长引物嵌套式反向PCR方法克隆雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列被引量:12
- 2006年
- 用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ分别对雅致枝霉As3.2806基因组DNA进行消化,而后在低浓度条件下利用T4DNA连接酶使DNA自身环化。根据已知基因序列,设计一对长度为35nt的长反向引物和两对较短的引物,以基因组连接产物为模板,通过三轮嵌套式PCR反应,获得一长度约为4kb的扩增片段。经序列测定表明得到了Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列约为1.3kb,初步序列分析显示该序列为一潜在的启动子序列。
- 王德培孙伟李明春魏东盛张颖慧邢来君
- 雅致枝霉△6-脂肪酸脱氢酶基因启动子的克隆及功能分析
- 多不饱和脂肪酸(PUFA)具有广泛而重要的生理功能,γ-亚麻酸(GLA)是合成PUFA 的重要前体物质,在免疫系统,心血管系统,内分泌系统,生殖系统中都具有重要的生理作用。在合成GLA的过程中△6-脂肪酸脱氢酶是关键的限...
- 涨颖慧魏东盛王德培李明春邢来君
- 文献传递
- 雅致枝霉△<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列及其应用
- 本发明涉及一种从雅致枝霉(Thamnidium elegans)中分离的编码Δ6-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列,它是具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列或该核苷酸序列的片段、类似物和衍生物。本发明包括编码Δ6-脂肪酸脱...
- 邢来君李明春王德培魏东盛张琦
- 文献传递
- 雅致枝霉△<'6>-脂肪酸脱氢酶基因及其启动子的克隆与功能分析
- 雅致枝霉As3.2806(Thamnidiumelegans)是一株可以在低温条件下生长的低等丝状真菌,并具有转化亚油酸生成γ-亚麻酸的能力强,γ-亚麻酸相对含量高而且几乎没有C18:3以上多不饱和脂肪酸等特点。通过多因...
- 王德培
- 关键词:脂肪酸脱氢酶毕赤酵母亚麻酸反向PCR克隆
- 文献传递
- 雅致枝霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及在酿酒酵母中的表达被引量:9
- 2006年
- 根据真菌Δ6-脂肪酸脱氢酶基因保守的组氨酸Ⅱ区和Ⅲ区附近保守序列设计兼并引物进行RT-PCR,得到雅致枝霉(Thamnidium elegans)As3.2806Δ6-脂肪酸脱氢酶基因459bp部分cDNA序列,然后通过快速扩增cDNA末端技术(RACE)向两端延伸得到1504bp的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因全长cDNA序列。序列分析表明有一个1377bp、编码459个氨基酸的开放阅读框TED6。推测的氨基酸序列与已知其他真菌的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的氨基酸序列比对,具有3个组氨酸保守区、2个疏水区及N末端细胞色素b5融合区。将此编码区序列亚克隆到酿酒酵母缺陷型菌株INVSc1的表达载体pYES2.0中,构建表达载体pYTED6,并在酿酒酵母INVSc1中异源表达。通过气相色谱(GC)和气相色谱/质谱(GC-MS)分析表明,该序列在酿酒酵母中获得表达,产生γ-亚麻酸(GLA)的含量占酵母总脂肪酸的7.5%。证明此序列编码的蛋白能将外加的亚油酸转化为γ-亚麻酸,是一个新的有功能的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(GenBank,AY941161)。
- 王德培李明春魏东盛张颖慧邢来君孙伟
- 关键词:Γ-亚麻酸酿酒酵母
- 雅致枝霉△<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶启动子序列及其应用
- 本发明涉及一种从雅致枝霉中分离到的Δ<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶启动子序列及其应用。本发明包括具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明包括利用该启动子序列来改变微生物细胞蛋白质成分的微生物基因工程方法...
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- 雅致枝霉△<Sup>6</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列及其应用
- 本发明涉及一种从雅致枝霉(Thamnidiumelegans)中分离的编码Δ6-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列,它是具有SEQIDNO:1所示的核苷酸序列或该核苷酸序列的片段、类似物和衍生物。本发明包括编码Δ6-脂肪酸脱氢酶的...
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