程菊会
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技攻关计划浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学一般工业技术更多>>
- 多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法
- 本发明公开了一种多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法，包括以下步骤：1)、分别合成马铃薯X病毒--PVX、马铃薯Y病毒--PVY、马铃薯卷叶病毒--PLRV、马铃薯A病毒--PVA和马铃薯S病毒--PVS的所对...
- 姜永厚程菊会董沁芳郭江峰丁先锋
- 猪细小病毒LDR-PCR检测方法的建立和应用
- 2012年
- 为准确特异灵敏地检测猪细小病毒(PPV),建立一种新的LDR-PCR方法。首先在病毒的保守区内设计一对LDR探针,LDR探针两端各连有一段引物对应序列,以连接产物为模板进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测结果。以标准质粒为模板,通过对LDR反应的退火温度、连接酶浓度及探针浓度等反应条件进行优化,确定了LDR最佳的反应体系,并建立了LDR-PCR方法。结果表明,可以特异地检测PPV,与猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)无交叉反应;最低检测限为102个拷贝。利用建立的方法对41例临床样本进行检测,14份样品PPV阳性,与普通PCR检测结果符合率为97.6%。
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- 关键词：猪细小病毒
- 同时检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒和伪狂犬病毒连接酶检测反应-PCR基因芯片检测方法的建立被引量：3
- 2011年
- 为快速、灵敏、准确地同时检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病毒(PRV)的方法,本研究采用连接酶检测反应(LDR)-PCR和基因芯片技术建立一种新型检测方法。首先在3种病毒的保守区内分别设计一对LDR探针,两端各连接一段通用序列,依次进行LDR、通用引物荧光标记扩增和芯片杂交,同时比较引物标记和Cy5-dCTP标记方法的灵敏度。结果表明该方法可以特异地检测PCV2、PPV和PRV3种病毒,而对牛病毒性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪圆环病毒1型检测结果均为阴性;对3种病毒的最低检测限少于10个拷贝;Cy5-dCTP标记检测的灵敏度显著高于引物标记。利用建立的方法对41例临床样品进行检测,与普通PCR检测结果符合率为97.6%～100%。该方法的建立为基础研究和临床应用提供了技术平台。
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- 关键词：通用芯片猪病毒
- 马铃薯卷叶病毒的RT-LDR-PCR检测
- 2011年
- 马铃薯卷叶病毒（Potato leaf roll virus,PLRV）属黄症病毒科Luteoviridae黄花病毒属Polerovirus,是目前严重影响马铃薯产量与品质的病毒,其分布局限于寄主植物的韧皮部,且含量非常低,难于提纯,这给PLRV检测带来很大的困难[1]。
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- 关键词：马铃薯卷叶病毒PCR检测马铃薯产量LEAF寄主植物PLRV
- 改变PCR产物Tm值达到多重荧光PCR的方法和用途
- 本发明公开了一种准确、快速改变PCR产物Tm值达到多重荧光PCR的方法；在原有不同扩增片段Tm值的基础上，选择性地挑选至少1种目的片段小的产物，并在所述产物原有上下游引物5’端基于引物设计原则有针对性地添加碱基，当期望产...
- 姜永厚程菊会董沁芳郭江峰丁先锋
- 文献传递
- EvaGreen多重荧光PCR同时检测多种马铃薯病毒
- 马铃薯是一种重要的世界性粮食作物,马铃薯病毒病是马铃薯非常重要的一类病害,分布于世界各马铃薯种植区,其中一些马铃薯病毒会严重影响马铃薯的产量和质量。马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)...
- 程菊会
- 关键词：马铃薯病毒实时荧光定量检测熔解曲线分析
- 文献传递
- 多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法
- 本发明公开了一种多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法，包括以下步骤：1)分别合成马铃薯X病毒--PVX、马铃薯Y病毒--PVY、马铃薯卷叶病毒--PLRV、马铃薯A病毒--PVA和马铃薯S病毒--PVS的所对应...
- 姜永厚程菊会董沁芳郭江峰丁先锋
- 文献传递
