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单极纺锤体蛋白激酶1是一个可能的新型抗肿瘤靶标: 2011年; 纺锤体装配检验点是有丝分裂分裂过程中一个非常重要的监督机器,其作用在于有丝分裂中期向后期转化前将所有的染色体排列到中期板上.近年来的研究表明,该检验点缺陷与肿瘤发生密切相关.单极纺锤体蛋白激酶1是纺锤体装配检验点的必需基因,存在于正常分裂细胞,并在肿瘤组织中高表达.最近研究发现,单极纺锤体蛋白激酶1的表达水平与乳腺癌恶性程度相关.更有意思的是抑制其激酶活性或降低其蛋白水平将会导致多种肿瘤细胞的纺锤体装配检验点功能缺陷和细胞死亡.这表明,单极纺锤体蛋白激酶1是一个潜在的抗癌药物新靶标.本文对单极纺锤体蛋白激酶1如何调控纺锤体装配检验点以及其在抗肿瘤应用研究中的最新进展进行了回顾.; 凌有国钟辉曹诚胥全彬; 关键词：肿瘤治疗

血管生成素的结构与功能的研究进展被引量：6: 2006年; 血管生成素(angiogenin,ANG)是一种有效的血管生成因子,是RNase超家族中惟一具有促血管生成能力的成员,也是目前已知的所有血管生成因子中独具核糖核酸酶活性的因子。ANG具有3个功能元件,即RNase活性中心、细胞表面结合位点及核定位序列。ANG参与血管生成的各个阶段,是其他血管生成因子诱导新血管生成的枢纽,其作用受到受体调节。在肿瘤的发生、发展及恶化过程中,ANG也具有非常重要的作用。通过对ANG促血管生成及细胞增殖机制的研究,为治疗肿瘤提供了多种靶点和途径。; 张雷雷胥全彬马清钧; 关键词：血管生成素血管生成核糖核酸酶

HeLa/GFP-Plk1/Cherry-H2B稳定细胞系的构建: 2014年; 目的:构建可研究Polo样激酶1(Plk1)定位的HeLa细胞系。方法:用PCR方法扩增Plk1基因,定向克隆到pRex-EGFP-IRES-Hygro载体中,构建pRex-EGFP-Plk1-IRES-Hygro表达载体;利用逆转录病毒感染的方法,向HeLa细胞系中依次转染pRex-EGFP-Plk1-IRES-Hygro、pRex-Cherry-H2B-IRES-Hygro,构建Hela/GFP-Plk1/Cherry-H2B稳定细胞系;激光共聚焦显微镜观察Hela/GFP-Plk1/Cherry-H2B稳定细胞系在不同有丝细胞分裂期时Plk1的定位。结果:质粒酶切及测序证明pRex-EGFP-Plk1-IRES-Hygro载体构建正确;在Hela/GFP-Plk1/Cherry-H2B稳定细胞系有丝分裂中期和末期时,观察到Plk1分别定位于着丝粒和中间体上。结论:构建了Hela/GFP-Plk1/CherryH2B稳定细胞系,为研究Plk1在有丝分裂不同时期的调控机制提供了细胞模型。; 李伟胥全彬江其生刘萱李平曹诚; 关键词：POLO样激酶1

金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验被引量：12: 2003年; 利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株 (Staphylococcusaureus,ATCC13 5 65 )中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因 ,序列测定结果与报道完全一致。构建了表达载体pET SEA并获得高效表达 ,重组蛋白 (rSEA)在 3 7℃诱导时以包涵体形式存在 ,降低温度则出现可溶表达 ,可溶性rSEA占总rSEA的 5 5 %。可溶性rSEA经Ni2 + 亲和层析纯化 ,达电泳纯。通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较 ,结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了 9个氨基酸但其结构并没有明显的变化。单核细胞增殖试验进一步证明了该结论 :将rSEA与SEA同外周血单个核细胞共同培养 ,两者均能有效地促进其增殖。将rSEA与体内激活的脾细胞共培养。; 胥全彬刘传暄马清钧; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素A 基因克隆可溶表达活性分析

葡萄球菌肠毒素A基因的新用途: 本发明公开了葡萄球菌肠毒素A基因的新用途。本发明发明人的实验证实，葡萄球菌肠毒素A基因能够显著改善动物对DNA疫苗的反应性，可以用作DNA或重组亚单位疫苗免疫原性增强佐剂。葡萄球菌肠毒素A基因可以使乙肝病毒表面抗原DNA...; 马清钧靳彦文胥全彬曹诚; 文献传递

ROS影响有丝分裂时期细胞内线粒体的形态及分布: 2015年; 目的利用稳定表达线粒体荧光信号的细胞系,检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)对有丝分裂时期细胞的线粒体形态及分布的影响。方法构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体,经测序鉴定和Western印迹检测正确后,通过病毒包装及感染的方法构建稳定表达线粒体荧光信号的He La s3细胞系He La s3-COX4tp-EGFP;进一步用免疫荧光法观察线粒体在ROS影响下形态及分布的变化。结果成功构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体及稳定细胞系,通过激光共聚焦显微镜观察,发现H2O2处理能显著影响有丝分裂时期细胞线粒体的形态及分布。结论初步证明ROS可影响线粒体有丝分裂时期的形态及分布,为后续研究线粒体功能与细胞有丝分裂的调控奠定基础。; 白圆圆凌有国胡勇付洋波邱立红颜芳胥全彬曹诚; 关键词：活性氧簇有丝分裂线粒体

超抗原SEA增强小鼠对HBV DNA疫苗的免疫反应被引量：5: 2005年; 观察超抗原SEA(D227A)的真核表达载体(pmSEA),对HBVDNA疫苗诱导Balbc小鼠(H2d)免疫应答的调节作用。肌内注射空载体pcDNA3、HBVDNA疫苗加pmSEA佐剂(pHBVS2S+pmSEA)或不加佐剂(pHBVS2S);ELISA法测定血清抗HBs;ELISPOT检测分泌IFNγ的脾淋巴细胞;4h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。HBVDNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度明显高于不加佐剂组,其IgG1IgG2a的比例不同于多肽免疫组,二者分别为0.282与10。HBVDNA佐剂组均能增强IgG1和IgG2a的产生,是不加佐剂组的1.36、1.73倍。佐剂组小鼠脾淋巴细胞IFNγ的分泌量是不加佐剂组2～3倍。CTL细胞杀伤活性(E:T=100)佐剂组与不加佐剂组分别为:69.77%±7.5%、42.81%±7.7%,差异显著(P<0.05)。HBVDNA疫苗具有较强的免疫原性,能够诱导机体产生特异性的抗体及CTL反应;pmSEA佐剂能够提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答,有望成为DNA疫苗的免疫佐剂。; 靳彦文李平胥全彬刘萱黄维王云龙曹诚马清钧; 关键词：DNA疫苗乙型肝炎表面抗原 SEA 小鼠

利用Mps1特异性siRNA抑制人宫颈癌HeLaS3细胞增殖的研究: 2013年; 目的验证所设计的Mps1小干扰RNA(siRNA)的特异性,为其应用于肿瘤治疗提供研究基础。方法针对Mps1基因的5'端设计合成一个siRNA(简称为siMps1),利用Western印迹检测siMps1的干扰效果,以及干扰后对肿瘤细胞的增殖和有丝分裂的影响。进一步构建稳定表达siMps1的细胞系SW480-YFPMps1siR/shRNA,检测过表达外源Mps1能否恢复其内源基因缺失的表型。结果转染siMps1能够降低细胞中的Mps1蛋白水平,导致有丝分裂指数降低,染色体中期排列异常;进而通过克隆形成实验发现,HeLaS3细胞转染siMps1后大量死亡,出现多核细胞;构建的稳定细胞系SW480-YFPMps1siR/shRNA能够恢复Mps1缺失后的表型。结论该设计得到的siMps1具有很高特异性,有望应用于肿瘤的治疗中。; 王文军凌有国汪莹张艳红张部昌胥全彬钟辉; 关键词：小干扰RNA 特异性肿瘤抑制

嵌合表皮生长因子疫苗E5T-mSEA的设计及抑瘤活性检测: 2010年; 表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)及其配体在多种肿瘤细胞中高表达,免疫注射表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)-载体蛋白所产生的抗体能够干扰EGFR与EGF的相互作用,进而抑制肿瘤生长。本实验室设计了EGF和TGFα的嵌合配体E5T,并将具有免疫增强作用的葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)与之融合。融合蛋白在大肠杆菌内表达后,通过金属螯合亲和层析,得到了纯度较高的E5T-mSEA融合蛋白。将E5T-mSEA免疫小鼠,能够产生高滴度的抗体,该抗体能够同时识别EGF和TGFα。将抗E5T-mSEA免疫血清与肿瘤细胞共培养,在1:10的稀释度下能显著抑制EGFR阳性肿瘤细胞的生长,而对EGFR阴性肿瘤细胞293T的生长没有明显影响。; 尹晴晴贾海威张艳红刘传暄马清钧张部昌钟辉胥全彬; 关键词：表皮生长因子肿瘤疫苗

葡萄球菌肠毒素A基因及其编码蛋白的新用途: 本发明公开了葡萄球菌肠毒素A基因及其编码蛋白的新用途。本发明发明人的实验证实，葡萄球菌肠毒素A基因能够显著改善动物对DNA疫苗的反应性，可以用作DNA或重组亚单位疫苗免疫原性增强佐剂。葡萄球菌肠毒素A基因可以使乙肝病毒表...; 马清钧靳彦文胥全彬曹诚; 文献传递

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