公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

正常与异常核型人类胚胎干细胞体外分化不同时期基因表达的异同被引量：1: 2009年; 目的:研究正常核型和异常核型人胚胎干细胞(hESC)基因的表达异同。方法:实时荧光相对定量PCR检测两株正常核型(46,XX)及一株平衡易位13三体核型和一株三倍体核型hESC在体外自体分化不同时期X连锁基因PGK1、抑癌基因RBBP7及癌症基因GPC4的表达情况,并比较分化后不同时期、不同核型对父系印迹基因H19、IGF2R,母系印迹基因SNRPN及多能性调控基因OCT4、NANOG的影响。结果:随着分化时间的增加:①正常和异常核型hESC的PGK1均上调表达;②异常核型hESC抑癌基因RBBP7及癌症基因GPC4相对正常核型hESC呈现明显上调表达;③正常和异常核型hESC中印迹基因表达基本一致:H19、IGF2R上调而SNRPN表达变化不明显或下调;④多能性调控基因OCT4、NANOG在正常核型hESC中较在异常核型hESC中表达明显下降。结论:X连锁基因PGK1、印迹基因在hESC的发育过程中能维持正常调节而不受核型的影响。异常核型hESC抑癌基因、癌症基因在发育过程中的表达上调表明此种细胞具有更危险的发育前景,同时多能性基因在分化后仍能检出表明此种细胞分化能力较正常细胞弱。; 刘维强孙筱放银益飞骆玉梅蒋永华李少英郑育红孔舒; 关键词：胚胎干细胞核型印迹基因癌症基因

小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立及生物学特性鉴定被引量：1: 2007年; 目的:探讨建立合适的小鼠孤雌胚胎干细胞建系方法。方法:采用氯化锶联合细胞松弛素B激活B6D2F1杂交小鼠卵母细胞,所获得的囊胚与桑椹胚分别用于孤雌胚胎干细胞的建系,观察两者的建系成功率。结果:共建立了12株小鼠孤雌胚胎干细胞系,这些细胞SSEA-1抗原阳性,SSEA-4,TRA-1-81,TRA-1-60表面抗原阴性,具有AKP活性,保持正常染色体核型,体内外分化分别形成畸胎瘤和拟胚体。结论:采用囊胚和去透明带的桑葚胚建立孤雌胚胎干细胞系获得成功。该方法为人类纯合子的胚胎干细胞建系提供基础,在自体细胞治疗领域中具有潜在的应用价值。; 银益飞孙筱放蒋永华张文红郑育红孔舒潘倩莹廖宝平; 关键词：孤雌激活细胞松弛素B 小鼠

4个品系小鼠胚胎干细胞系的建立: 2007年; 探索高效的不同品系的小鼠胚胎干细胞的建系方法。B6D2F1(C57BL/6×DBA/2)、129/SV×DBA/2、C57BL/6、BALB/C等4个不同品系小鼠,孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG)+人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)促排,3.5天交配后(days post coitus,dpc)冲洗子宫取囊胚,或者2.5dpc冲洗输卵管,卵裂球体外培养获取囊胚。囊胚种植到小鼠成纤维细胞饲养层上干细胞培养液培养,4～5天内细胞团扩增后玻璃毛细管挑出,种植到新的饲养层上过夜再行胰蛋白酶消化,3～4天传代一次。对所建立的小鼠ES细胞系进行形态学、染色体核型、AKP染色、体内外分化能力,干细胞分子标记物荧光免疫染色等鉴定。获得10株小鼠胚胎干细胞,具有典型的胚胎干细胞生长特性,符合ES细胞的鉴定标准。结果表明成功的建立了来自B6D2F1(C57BL/6×DBA/2)、129/SV×DBA/2、C57BL/6、BALB/C等4个不同品系小鼠的10株ES细胞系。内细胞团挑出过夜增殖后消化的培养方法可能有助于提高ES细胞的建系率。; 蒋永华孙筱放郑育红张文红银益飞廖宝平; 关键词：小鼠品系胚胎干细胞系内细胞团体外培养

人胚胎干细胞系HUES4的培养和染色体核型分析被引量：1: 2007年; 目的建立人胚胎干细胞无动物源性饲养层培养方法,同时对长时间体外培养的人胚胎干细胞核型变化进行分析。方法人胚胎干细胞系HUES4细胞分别培养于小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞饲养层,并对其干细胞特性进行鉴定;在培养传代过程中,收获P27、P34、P41和P44细胞进行染色体核型分析,P27细胞还进行DNA短串联重复序列多态性分析。结果生长于人包皮成纤维细胞饲养层的HUES4细胞碱性磷酸酶染色以及SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81抗原阳性,SSEA-1抗原阴性。所检测的4代细胞中均见46,XY/46,XY,t（9;15）（q22;q26）核型嵌合现象,且异常核型百分比随传代次数增加有上升的趋势。结论培养人胚胎干细胞的饲养层细胞可由无动物源性的饲养层细胞替代;长期体外培养有增加细胞染色体核型异常的风险。; 张文红孙筱放孔舒蒋永华郑育红银益飞; 关键词：人胚胎干细胞核型短串联重复序列

孤雌胚胎干细胞基因印迹及X染色体失活状态初步研究: 2010年; 目的:研究孤雌胚胎干细胞(phESC)与受精卵来源胚胎干细胞(hESC)在印迹基因表达、X染色体失活等方面的异同。方法:运用实时荧光相对定量PCR、甲基化特异性PCR和免疫荧光染色等方法检测phESC与hESC在父系印迹基因IGF2R,母系印迹基因SNRPN,IGF2相对表达量及X染色体失活状态。结果:①母系印迹基因SNRPN,IGF2在phESC细胞中不表达,而父系印迹基因IGF2R表达量则相对于hESC有近2倍的上调;②XIST基因在第35代phESC细胞中没有表达,意味着早期的phESC没有进行X染色体失活,而到了第55代,XIST基因开始表达并随着分化时间的延长表达量逐渐上调;③XIST启动子甲基化状态及组蛋白H3赖氨酸27三甲基化免疫荧光染色阳性证实phESC在长期培养后启动了X染色体失活。结论:phESC的X染色体失活状态在培养过程中存在不稳定的情况,建议对phESC进行更深入的表观遗传稳定性研究,以确保这种细胞未来安全、高效的应用。; 刘维强骆玉梅李少英郑育红孔舒黄盛昌银益飞蒋永华孙筱放; 关键词：孤雌印迹 X染色体失活稳定性

人胚胎干细胞系HUES4的培养和细胞染色体核型分析: 目的:建立人胚胎干细胞无动物源性饲养层培养方法,同时对长时间体外培养的人胚胎干细胞核型变化进行分析。方法:人胚胎干细胞系 HUES4细胞分别培养于 MEFs 细胞和人包皮成纤维细胞饲养层,并对其干细胞特性进行鉴定;在培养...; 张文红孙筱放孔舒蒋永华郑育红银益飞; 关键词：人胚胎干细胞核型; 文献传递

4个品系小鼠胚胎干细胞系的建立: 目的:探索高效的不同品系的小鼠胚胎干细胞的建系方法。方法:B6D2F1(C57BL/6* DBA/2),129/SV*DBA/2,C57BL/6,BALB/C 等4个不同品系小鼠,PMSG+HCG 促排,3.5dpc 冲...; 蒋永华孙筱放郑育红张文红银益飞廖宝平; 关键词：小鼠品系胚胎干细胞系内细胞团体外培养; 文献传递

建立人类异常染色体核型的成纤维细胞系及滋养层细胞系被引量：1: 2008年; 从自然流产绒毛或者中期妊娠羊水中分离细胞体外培养,建立人类异常染色体核型成纤维细胞系及滋养层细胞系。中期妊娠羊水染色体诊断或自然流产绒毛染色体诊断过程中,行G显带细胞核型分型,对于发现异常核型的细胞,进行分离、培养、传代、冻存、复苏及鉴定,建立细胞系,用PowerPlex 16系统行DNA-STR基因型检测。建立1株来自羊水的21三体成纤维细胞系,以及7株来自绒毛的滋养层细胞系,核型分别为47,XX+21;69,XXX;69,XXY;47,XY+12;47,XX+5;48,XY+21,22;47,XY+18。所有细胞系体外传代均超过10代,冷冻复苏率大于50%,核型维持稳定,DNA-STR基因检测能对人细胞系进行个体识别。人异常染色体核型的成纤维细胞系和绒毛膜滋养层细胞系的建立,可以为探讨异常染色体产生机制及相关的分子遗传学研究提供细胞来源。; 蒋永华孙筱放郑育红李少英刘维强潘倩莹; 关键词：染色体成纤维细胞滋养层细胞短串联重复序列

高危孕产妇医院感染分析被引量：1: 2005年; 目的分析高危孕产妇医院感染,为防治医院感染寻找对策。方法回顾性分析1999年1月～2003年12月在广州市重症孕产妇救治中心住院的8342例住院孕产妇的病历,对医院感染者逐个进行登记。结果高危孕产妇医院感染发生率为5.34%(237/4441),明显高于正常孕产妇的0.79%(31/3901),P<0.05。高危孕产妇的医院感染主要发生在产后,占85.23%,发生于产前的占14.76%。感染发生的部位以生殖道最多,达94例(39.25%),其余依次为呼吸道77例(32.49%),切口及皮肤54例(22.78%),胃肠道7例(2.95%)、泌尿道6例(2.53%)。剖宫产者和阴道助产者医院感染发生率分别为6.80%和6.29%,均非常显著性地高于自然分娩者(3.11%),P均<0.01。联合应用抗生素者医院感染发生率5.23%,单用抗生素者医院感染率5.74%,二者无显著性差异。结论高危孕产妇容易发生医院感染,感染发生的部位以生殖道、呼吸道、切口及皮肤为主,剖宫产者和阴道助产者会增加医院感染发生的机会,联合应用抗生素并不能降低发生感染的机会。; 麦卫阳陈敦金陈欣洁肖国宏刘见桥蒋永华孙筱放; 关键词：高危孕产妇医院感染剖宫产抗生素

全选清除导出

共1页<1>

蒋永华

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

蒋永华

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈