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mTERT启动子驱动的m4-1BBL基因靶向免疫治疗小鼠肝细胞肝癌的体内实验研究: 目的:构建携带mTERT启动子和m4-1BBL基因的重组腺病毒,为探讨治疗肝细胞肝癌的方法提供实验基础。观察mTERT启动子驱动的m4-1BBL基因对小鼠体内肿瘤的生长的抑制作用,探讨其治疗潜力。方法:应用...; 邢迎清; 关键词：肝细胞肝癌 4-1BBL; 文献传递

由mTERT启动子驱动m4-1BBL基因的腺病毒载体的构建被引量：1: 2009年; 目的构建由具有肿瘤特异性启动作用的端粒酶逆转录酶启动子(mTERT-promotor)驱动m4-1BBL(CD137Ligand)基因的腺病毒载体。方法用PCR和RT-PCR的方法,分别从C57BL/6小鼠组织中克隆mTERT启动子和共刺激分子m4-1BBL基因,通过T载体和转移载体将目的基因亚克隆到腺病毒载体上,293A细胞包装成病毒颗粒rAD-mTERT-m4-1BBL,流式细胞仪检测m4-1BBL基因在Hepa1-6及L929细胞上的表达。结果通过PCR检测、直接测序证实目的基因克隆成功并亚克隆到表达载体上,细胞免疫化法证实病毒包装成功,流式细胞仪检测发现重组腺病毒载体rAD-mTERT-m4-1BBL能特异性地在肿瘤细胞Hepa1-6上高表达m4-1BBL。结论由mTERT-promotor驱动m4-1BBL基因的具有肿瘤特异性的腺病毒载体构建成功,为下一步进行体内外抗肿瘤实验打下了基础。; 肖樟生姚辉华龚伟达杜鹏邢迎清吴浩荣; 关键词：端粒酶逆转录酶启动子 4-1BBL 腺病毒载体基因治疗

重组腺病毒rAD—mTERT—m4—1BBL与T淋巴细胞混合培养对小鼠肝癌细胞株Hepa1-6的免疫杀伤作用被引量：1: 2009年; 目的研究在T淋巴细胞混合培养条件下，腺病毒rAD—mTERT—m4—1BBL（简称rAD—mTERT）对小鼠肝癌细胞株Hepal-6的免疫杀伤作用。方法分别以rAD、rAD—CMV—m4-1BBL（简称rAD-CMV）和rAD—mTERT转染Hepal-6和L929细胞，检测其生长和凋亡变化。将转基因细胞与小鼠脾T淋巴细胞混合培养，观察T淋巴细胞表型变化及转基因细胞的生长和凋亡变化。细胞生长的检测采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法，细胞凋亡的检测采用AnnexinV-碘化丙啶（P1）双染色法。结果rAD、rAD-CMV和rAD—mTERT病毒对Hepal-6和L929细胞均有明显的生长抑制作用和轻度的促凋亡作用。与活化T淋巴细胞混合培养后，各组转基因Hepal-6和1929细胞的生长均受到抑制，以rAD—CMV＋T淋巴细胞组最为明显；rAD-CMV对Hepal-6和L929细胞的促凋亡作用均十分明显，rAD—mTERT仅对Hepal-6细胞有明显的促凋亡作用。混合培养后，CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞均出现一定程度的增殖，但CD8^＋T淋巴细胞增殖明显强于CD4^＋T淋巴细胞，CD4／CD8比值从混合培养前的1．27下降为混合培养后的1．08。结论单纯腺病毒可以抑制靶细胞的生长，但不促进其凋亡。在与T淋巴细胞混合培养下，重组腺病毒载体rAD—mTERT可靶向抑制Hepal-6细胞的生长并促进其凋亡，其促凋亡作用是通过T淋巴细胞的免疫杀伤作用实现的。; 肖樟生马士签龚伟达姚辉华杜鹏邢迎清吴浩荣; 关键词：重组腺病毒载体端粒酶逆转录酶 T淋巴细胞

腹腔镜胆总管探查术55例临床分析被引量：1: 2009年; 邢迎清吴浩荣王浩炜陈伟肖樟生; 关键词：腹腔镜胆总管探查术胆总管切开取石术胆总管结石 LCBDE DUCT 胆道镜

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邢迎清

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