钟敏
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 斑马鱼：人类血液疾病的良好模型被引量：4
- 2010年
- 斑马鱼（zebrafish,Danio rerio）又名蓝条鱼、花条鱼等,原产于南亚热带,观赏鱼,属鲤科短担尼尔属.一百多年前,由于其胚胎透明,易于观察与操作,斑马鱼成为研究胚胎形成与发育的经典模型.
- 钟敏张勇陈芳源
- 关键词：斑马鱼血液疾病亚热带观赏鱼
- MYCN基因对造血转录因子的调控
- ＜正＞目的:通过热激活系统,在斑马鱼中条件性过表达鼠源性MYCN基因,建立生殖系稳转的斑马鱼系,以研究MYCN基因对造血功能的转录调控。方法:构建携绿色荧光蛋白"报告基因"的MYCN质粒,显微注射到AB品系斑马鱼胚胎单细...
- 沈莉菁陈芳源钟敏张勇匡颖林文洁钟华钟济华
- 文献传递
- AML1-EVI1转基因斑马鱼模型的建立及对造血转录因子的调控被引量：1
- 2013年
- 目的:通过建立表达急性髓系白血病(AML)1-同向性病毒整合位点(EVI)1融合基因斑马鱼模型,研究AML1-EVI1融合基因对造血转录因子的影响。方法:构建携带绿色荧光蛋白的AML1-EVI1质粒,显微注射到斑马鱼胚胎单细胞期,建立生殖系稳定转染的转基因模型,常规养殖到F2代。以F2代转基因斑马鱼作为实验对象,运用反转录(RT)-PCR验证AML1-EVI1融合基因的表达,外周血涂片、肾细胞涂片检测血细胞形态学改变,全胚胎原位杂交及荧光实时定量PCR(RFQ-PCR)检测融合基因对造血转录因子[GATA结合蛋白1(GATA1)、髓过氧化物酶(MPO)]的影响。结果:在性成熟146条嵌合表达的F0代斑马鱼中鉴定得到3条(2.1%)转基因阳性斑马鱼,其中雄鱼2条,雌鱼1条。外周血涂片及肾细胞涂片显示转基因斑马鱼出现造血细胞分化障碍,幼稚细胞增多,全胚胎原位杂交及RFQ-PCR均显示,与野生型相比,转基因型斑马鱼造血转录因子MPO基因表达量无论造血细胞发育早期还是晚期都明显下降,转录因子GATA1则在发育早期上调,晚期呈现明显下调。结论:AML1-EVI1融合基因通过调节转录因子抑制髓系分化,红系发育,促进原始细胞增殖。
- 林文洁沈莉菁陈芳源钟敏孙瑞林钟济华
- MYCN转基因斑马鱼对造血调控因子的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:通过热激活启动子条件性过表达鼠源性MYCN基因,建立生殖系稳定转染的斑马鱼系,以研究MYCN基因对造血调控因子转录的影响。方法:构建携绿色荧光蛋白"报告基因"的MYCN质粒,显微注射到斑马鱼胚胎单细胞期,通过荧光筛选出F0代,继而建立生殖系稳定转染的转基因鱼系。通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)及血涂片论证MYCN基因的过表达及其对造血调控因子的影响。结果:在256条嵌合表达的性成熟F0代斑马鱼中,鉴定发现有18条(7.0%)显示转基因阳性,其中雄鱼8条,雌鱼10条。同时,RFQ-PCR及外周血涂片均显示,转基因斑马鱼F1和F2代均发生明显的造血分化障碍,造血关键调控因子scl、mpo、gata1基因表达量明显下降。结论:斑马鱼在基因研究中具有直观及规模化优势,特别适用于单一基因的研究,MYCN基因产物可显著抑制红系生成和造血分化。
- 钟敏沈莉菁陈芳源张勇匡颖钟华钟济华
- 关键词：斑马鱼MYCN基因造血调控因子
- 斑马鱼造血调控因子的研究进展被引量：4
- 2011年
- 斑马鱼由于其独特的生物学优势,使其成为研究造血发育过程及调控机制的良好的生物模式.目前已经利用斑马鱼建立了若干和人类极为类似的血液疾病模型,如T淋巴细胞白血病和骨髓增殖性疾病（myeloproliferative diseases,MPD）等.由于其胚胎透明便于观察,并且可以结合大规模的前向遗传学筛选,从而利于发现造血过程中的未知因子,进一步了解斑马鱼的造血过程及其调控方式.
- 钟敏沈莉菁陈芳源
- 关键词：斑马鱼造血调控因子造血干细胞
