龚云飞
- 作品数：17 被引量：66H指数：4
- 供职机构：中国计量学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金浙江省重点科技创新团队项目浙江省农业科技成果转化资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体的制备被引量：4
- 2012年
- [目的]制备恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体。[方法]采用活性酯法合成恩诺沙星的人工抗原,并通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳对其进行鉴定。利用免疫原(ENR-BSA)免疫新西兰大白兔,制备抗恩诺沙星的高亲和力和高特异性的多克隆抗体。[结果]恩诺沙星成功地偶联到载体蛋白上。通过动物免疫,获得了高效价的抗血清,最高效价达到1∶100 000,说明人工抗原成功地诱导机体产生免疫应答。[结论]恩诺沙星的人工抗原合成路线简单易行,可为进一步建立恩诺沙星的免疫检测方法奠定了基础。
- 邹晓楠龚云飞奚茜李沐洁张晓峰方结红陈宗伦王唯芬张明洲
- 关键词：恩诺沙星人工抗原多克隆抗体
- 三聚氰胺人工抗原合成与鉴定被引量：1
- 2011年
- 采用戊二醛法与甲醛树脂法分别将三聚氰胺(Melamine,Mel)偶联到牛血清白蛋白(BSA)与鸡卵清蛋白上,合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白(Mel-BSA)与包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白(Mel-OVA)。通过快速凝胶液相层析(FPLC)纯化后,合成抗原进行紫外扫描、红外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定。结果表明三聚氰胺已偶联到载体蛋白,为进一步制备三聚氰胺的特异性抗体与建立三聚氰胺免疫检测方法奠定了基础。
- 王旻子应永飞龚云飞方结红陈宗伦张明洲
- 关键词：三聚氰胺人工抗原
- 恩诺沙星直接竞争ELISA检测试剂盒的研制被引量：3
- 2013年
- 目的：应用多克隆抗体技术研制一种检测动物食品中恩诺沙星残留直接竞争酶联免疫检测试剂盒。方法：利用直接竞争ELISA法检测人为添加到动物食品中恩诺沙星的含量，与高效液相色谱的检测结果比较，并测定试剂盒的各项指标。结果：恩诺沙星质量浓度0．1～8．1ng／mL，标准曲线的线性回归方程y=-0．3769x＋0．7899（R2=0．9924），方法的检测灵敏度IC50=0．55ng／mL，IC50=0．11ng／mL；板内平均变异系数为3．73％，板间平均变异系数为7．42％；猪肝、猪肉、鸡肉、鱼、虾、猪血清、牛奶、蜂蜜组织样品中ENR最低检测限分别为3．24．3．33，6．08，0．89，1-34，0．64，0．73，0．58g／kg；添加25．0-200g／kg恩诺沙星时，回收率80．9％～100％。采用ELISA和HPLC两种检测方法的相关性大于95％。结论：本文研制的试剂盒可用于检测动物食品中恩诺沙星的残留。
- 邹晓楠龚云飞奚茜李沐洁张晓峰张明洲
- 关键词：多克隆抗体恩诺沙星动物食品
- 禽类食品中磺胺二甲嘧啶间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 试验采用高碘酸钠法合成了磺胺二甲嘧啶的人工SMZ-BSA和SMZ-OVA,紫外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定证明抗原耦联成功。在此基础上,建立间接竞争ELISA法,将磺胺二甲嘧啶添加到鸡蛋和鸡肉样品中,分别用ELISA和高效液相色谱（HPLC）分析方法检测。结果表明,在0.1~50 ng/mL浓度范围内,方法的检测灵敏度IC10=0.18 ng/mL。鸡蛋实际样品的检出限可达到2.0 ng/g,鸡肉实际样品检出限可达到5.0 ng/g。研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有较高的相符性,可用于鸡蛋与鸡肉样品中磺胺二甲嘧啶残留含量分析的大量样品的筛查。
- 龚云飞王唯芬张明洲陈宗伦奚茜李沐洁
- 关键词：ELISA鸡蛋鸡肉
- 青霉素结合蛋白在残留检测中的应用研究被引量：2
- 2013年
- 近年来,青霉素结合蛋白在青霉素残留检测技术上的应用已成为一个趋势,克服了其他青霉素残留检测技术的一些不足。因此全面了解和关注青霉素结合蛋白的研究进展十分必要。文中通过阅读近10年相关文献,对青霉素结合蛋白的发现分类、研究方法及在食品安全检测中的应用进行了综述。
- 夏澜冯朝艳黄鑫陈卓婧阎淑男龚云飞
- 关键词：青霉素结合蛋白
- 化学发光免疫法检测食品中恩诺沙星残留的研究被引量：4
- 2014年
- 建立了基于多克隆抗体的化学发光免疫检测技术，用于测定动物源性食品中恩诺沙星残留含量。反应条件优化结果为：抗体包被最佳稀释倍数为64000倍，最佳酶标抗原稀释倍数为256000倍。结果显示：该方法的回归曲线方程为y=-13．898x＋110．38（R。=0．9893），检测线性范围为3-810pg／mL，IC50为69．63pg／mL，ICm为1．41pg／mL；鸡肉、鱼肉、虾肉、蜂蜜、牛奶空白组织样品中恩诺沙星的最低检测限分别为3．76、4．59、2．85、2．65、4．20pg／mL，最低定量限分别为6．13、7.35、3．57、3．73和6．48pg／mL，回收率在88．28％-102．6％，板内和板间的平均变异系数分别为2．61％和4．71％。表明本研究建立的化学发光免疫检测方法满足动物源性食品恩诺沙星残留的检测要求。
- 龚云飞邹晓楠张露露吴莹莹戴明雁陈宗伦张明洲
- 关键词：恩诺沙星食品安全
- 三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- [目的]制备抗三聚氰胺单克隆抗体,并对其效价、敏感性与特异性进行测定。[方法]通过三聚氰胺人工抗原MEL-BSA免疫BALB/c小鼠以及细胞融合等方法,获得分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并利用小鼠体内腹水诱生法制备抗三聚氰胺单克隆抗体;采用间接竞争ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、敏感性与特异性。[结果]经小鼠免疫、细胞融合与亚克隆后获得了2株分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1B12和2H9;间接ELISA检测结果显示,杂交瘤细胞1B12和2H9腹水型单抗的效价分别为1∶25 600与1∶12 800,IC50分别为8.0 ng/ml与8.3 ng/ml,且该2种单抗只与三聚氰胺有反应,与三聚氰胺类似物无交叉反应。[结论]该研究获得了高效价、高灵敏度的三聚氰胺特异性单克隆抗体,为后续研究提供了良好基础。
- 王旻子应永飞龚云飞方结红陈宗伦张明洲
- 关键词：三聚氰胺单克隆抗体
- 水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究被引量：7
- 2014年
- [目的]制备一种特异、快速、便捷的检测虾及鱼肉中恩诺沙星残留的胶体金免疫层析试纸条。[方法]用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金标记恩诺沙星多克隆抗体,喷于试纸的金标垫。将ENR-OVA(恩诺沙星和卵清白蛋白的偶联物)和纯化的羊抗兔IgG分别喷于试纸的T(检测线)处和C(质控线)处,通过挑选试纸条材料和调试工艺参数,并最终组装成试纸条。[结果]制备的试纸条检测体系方法的检出限为0.9 ng/ml。试纸条对虾及鱼肉中的恩诺沙星残留的检出限分别为5和10 ng/g。[结论]制备的恩诺沙星胶体金检测试纸适用于现场实际样品恩诺沙星残留水平检测,具有良好的应用前景。
- 余法建水柏年龚云飞
- 关键词：恩诺沙星多克隆抗体胶体金免疫层析水产品
- 磺胺二甲嘧啶快速直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用被引量：2
- 2011年
- 在多克隆抗体的基础上研制一种用于检测动物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证。将磺胺二甲嘧啶添加到猪肝、猪肉和鸡肉样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的磺胺二甲嘧啶残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。研究结果表明,磺胺二甲嘧啶浓度在0.5～50ng.mL-1,方法的检测灵敏度IC10=0.47ng.mL-1,板内平均变异系数为7.4%,板间平均变异系数为9.27%。猪肝、猪肉与鸡肉组织样品中SMZ最低检测限分别为3.91、4.81与1.59μg.kg-1。在添加10.0～50.0μg.kg-1时,平均回收率在85%～110%。试剂盒的检测时间为12.6min,在4℃至少可以保存6个月。研制的试剂盒可以满足猪肝、猪肉和鸡肉中磺胺二甲嘧啶残留的现场快速检测。
- 龚云飞王唯芬张明洲陈宗伦李沐洁奚茜
- 关键词：磺胺二甲嘧啶ELISA试剂盒猪肝猪肉鸡肉
- Bt基因和Bt蛋白检测技术研究进展被引量：1
- 2012年
- 通过转基因技术将可表达杀虫特性蛋白的Bt基因转入大豆、水稻等农作物中,培育出优良的抗虫品种,从而在不使用农药等有害物质的前提下,对病虫害起到高效防治作用。然而动物试验及临床研究发现,Bt蛋白可能导致哺乳动物的免疫器官和免疫细胞损伤,也可能影响基因库的遗传结构及群体遗传多样性,对土壤特异生物类群功能、土壤生物多样性以及土壤酶活性等也有不同程度的影响,且Bt蛋白有可能沿着食物链在人体内富集,对人体形成潜在的危害。因此,开展对Bt基因和Bt蛋白的监控研究是必要的,该文对Bt的相关研究现状作一简要综述。
- 汪倩向晓玲许耀心倪晓强姜佳燕龚云飞
- 关键词：BT基因BT蛋白
