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假单胞菌TS-1138 L-半胱氨酸脱巯基酶的纯化和性质研究被引量：5: 2004年; 假单胞菌TS-1138L-半胱氨酸脱巯基酶经DEAECellulose-52阶段洗脱、SephadexG-100柱层析被纯化了80.3倍,SDS-PAGE鉴定为单一条带,该酶的相对分子质量为53.0kDa;酶反应的最适pH为7.5,最适反应温度为35℃,该酶的米氏常数为2.37μmol/L,最大反应速度为0.11μmol/mL·min·Pb2+对该酶有很强的激活作用,Zn2+对该酶有较强的抑制作用,羟胺为该酶特异性的抑制剂.; 金永杰杨文博刘忠白钢孙丹; 关键词：L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌酶纯化酶性质

航天制造企业质量信息管理系统的设计与开发: 质量是航天科技工业的生命。通过多年的摸索与积累,在航天制造领域形成了一套行之有效的质量管理体系,但随着航天产品生产任务量的激增,原有的管理方式与工作手段,很难满足目前对型号产品质量管理大数据量以及迅速反应的需要。借助信息...; 刘忠; 关键词：质量管理信息化; 文献传递

假单胞菌L-半胱氨酸合成酶的纯化和性质研究被引量：7: 2004年; 假单胞菌TS 1 1 38的细胞浆液通过硫铵沉淀、SephadexG 75凝胶过滤、DEAE Cellulose5 2离子交换、SephadexG 1 0 0凝胶过滤等分离纯化手段分别将从L ATC合成L 半胱氨酸的两个酶———L ATC水解酶和L SCC水解酶纯化了 83 9和 90 3倍。SDS PAGE鉴定均为单一条带 ,两种酶的相对分子质量分别为 37 5和 42 8kD ;酶反应的最适温度均为 35℃ ,最适pH分别为 7 0和 8 0 ;酶的米氏常数分别为 0 67mmol L和 0 1 5mmol L ,最大反应速度分别为0 39× 1 0 3mmol L·min和 0 42× 1 0 3mmol L·min。; 金永杰杨文博刘忠白钢余养盛; 关键词：酶纯化酶性质

假单胞菌TS1138 L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆与表达被引量：2: 2006年; 提取假单胞菌TS1138染色体基因,以自行设计的引物通过PCR方法扩增得到L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cds),将其克隆至克隆载体pBluescript SKⅡ,并转化入大肠杆菌DH5α,测定了含有脱巯基酶基因(cds)的1．2 kb DNA片段的序列；同时,将其克隆至表达载体pETH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,重组蛋白量占菌体总蛋白的36．8%,经Ni-NTA柱亲合层析后,重组蛋白纯化率达88%以上．用非变性PAGE方法对基因表达的脱巯基酶进行了鉴定．; 白钢李洋余养盛杨文博游松刘忠孙丹; 关键词：L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌基因克隆

微生物酶法合成L-半胱氨酸和L-胱氨酸被引量：21: 2003年; 从土壤中分离到一株假单胞菌Pseudomonas sp.TS1138菌株,其胞内含有DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-2-Amino-△2-Thiazoline-4-Carboxylic Acid,缩写为DL-ATC)水解酶,以培养16h的细胞为酶源,可转化DL-ATC合成L-半胱氨酸.该菌株生长及产酶的最佳碳、氮源为葡萄糖和尿素,DL-ATC对酶的产生具有诱导作用.酶促反应后的产物经薄层层析、旋光度法和高效液相色谱鉴定为L-半胱氨酸.; 刘忠杨文博白钢田旺金永杰; 关键词：L-半胱氨酸 L-胱氨酸酶法转化假单胞菌

L-缬氨酸补料分批发酵的研究被引量：3: 2002年; 在批式发酵优化条件基础上 ,通过对流加补料方式、补料速度等发酵过程的各种参数 ,包括产酸率、转化率、发酵周期等的影响进行了研究 ,确定了 L-缬氨酸补料分批发酵的优化条件 .在最优补料分批发酵条件下 ,L-缬氨酸产量达 5 2 .4 5 g/ L,糖酸转化率达 34 .97% ,结果明显优于分批培养 .; 赵丽丽张蓓陈宁张克旭刘忠; 关键词：L-缬氨酸补料分批发酵发酵生产产酸率转化率发酵周期

微生物酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸相关酶系的研究: L-半胱氨酸是一种重要的含硫氨基酸,广泛应用于医药、食品、化妆品以及饲料工业.从土壤筛选获得了一株假单胞菌TS1138,可转化DL-ATC合成L-半胱氨酸.该研究从菌株鉴定、产物的鉴别、产酶及酶促反应条件、关键酶的分离纯...; 刘忠; 关键词：L-半胱氨酸酶法转化 DL-ATC 酶纯化; 文献传递

繁殖学(国家杰出青年科学基金项目): 刘林吕祁峰刘易飞刘忠黄军就王芳李超胡喆曹善柏罗本平邓凯文来左冰峰; 胚胎干细胞具有潜在多能性和无限增殖能力，可在体内体外定向诱导分化为各种组织。建立牛胚胎干细胞(牛ES细胞)系在组织工程、再生医学、细胞及基因治疗等基础研究、生产实践和临床治疗方面将有着广阔的应用前景。然而，到课题组该项课...; 关键词：; 关键词：胚胎干细胞繁殖学

细菌耐热植酸酶基因的克隆及表达被引量：5: 2004年; 设计筛选培养基 ,从 2 0 3株细菌菌株中筛选到四株可以分解植酸的菌株 :SD0 1N ,SD0 1X ,SD0 1B和SD0 1D ,设计植酸酶基因特异性引物P1和P2 ,分别以这四株菌的基因组DNA为模板进行扩增 ,其中菌株SD0 1N出现一条明显的扩增条带 ,大小约 1 2kb。对PCR产物进行序列分析表明 ,该片段含有一个编码 383个氨基酸的开放阅读框架。将该片段与载体pQE 30连接后转化大肠杆菌M1 5 ,得到重组菌株SDLiuTP0 1 ,对该菌株进行培养 ,经IPTG诱导基因表达 ,与携带空载体菌株相比较 ,在菌株SDLiuTP0 1中可检测到植酸酶活力。对重组菌株的植酸酶活力考察表明 ,该酶在 2 5℃～ 95℃温度范围均具生物活性 ,最适反应温度为 75℃ ,属于耐热性植酸酶。在各pH缓冲系统中反应结果 ,酶活力出现两个较高值 ,分别为pH4 6和pH7 5。; 刘丽丽杨文博刘忠; 关键词：耐热植酸酶克隆大肠杆菌

L-半胱氨酸高转化率菌株的构建及代谢调控理论研究: 白钢陈宁杨文博怀丽华余养盛马雷刘春琴黄磊乔明强文峰刘忠刘淑云金永杰徐庆阳李洋周昌平田旺寇广会李梅; 该研究采用化学合成的DL–ATC为底物，经假单胞菌TS1138菌株的胞内酶，催化水解L–ATC生成L–半胱氨酸，该技术可以在该类氨基酸以及其他发酵产品的生产上具有重要的借鉴意义；对L–半胱氨酸的代谢途径中关键酶的编码基因...; 关键词：; 关键词：L-半胱氨酸代谢途径酶法转化

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刘忠