姜立群
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院阜外心血管医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国医学科学院基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 从糜酶和肾素的转基因研究探索RAS在心肌重塑中的作用
- 2002年
- 心肌肥厚是多种心血管疾病中的一种病理改变,主要表现为心脏重塑包括心肌细胞肥大和间质成分的改变.心脏的结构与功能受到生理因素,血液动力学因素和神经体液因素等多种因素的调控,这些因素异常改变均可使心脏发生生理或病理的改变.在所有这些因素中,以肾素血管紧张素系统(RAS)及其受体最为引人关注.RAS最早作为循环内分泌系统被认识,主要参与血压调节.近年来发现在心脏等组织存在局部RAS,以自分泌,旁分泌和胞内分泌形式参与许多生理和病理过程.RAS在心脏中的作用主要通过可溶性多酶体系的级联反应形成的终末产物AngⅡ和其受体所介导.近年来关于心脏局部RAS在心脏重塑中的作用及机制研究已成为RAS研究的热点问题,但其详细作用机制尚不十分清楚,诸如:1.心脏局部RAS是否真实存在?2.心脏组织AngⅡ形成是否存在糜酶途径,该途径与ACE途径的相对贡献如何?3.糜酶与ACE途径是否存在时相性?4.糜酶对心脏重塑中是否有作用?5.肾素是心脏组织AngⅡ形成的限速因子吗?6.心脏组织中AngⅡ通过何种途径刺激心脏重塑?对上述问题的回答是揭示心脏局部RAS在心脏重塑中机制关键,针对这些研究热点我们从分子、细胞、整体动物模型等多个层次,从动态的观察角度对这些问题进行了探索.
- 陈兰英李鹏何泉姜立群周晓霞陈朋民张鹏华王醒刘嘉丽刘宏
- 关键词：糜酶转基因研究RAS肾素肾素血管紧张素系统心肌重塑
- 原核注射产生转基因小鼠中的缺失整合
- 1997年
- 用心脏特异性启动子肌球蛋白轻链－２（ｍｙｏｓｉｏｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ－２）ＭＬＣ２和糜酶结构基因相拼接构建ＭＬＣ２－糜酶融合基因，通过原核注射法产生转基因小鼠。用特异性引物对新生鼠鼠尾ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增初选，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交确定整合有外源基因的阳性鼠。低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性鼠ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段，经测序后，与所转外源基因序列比较，发现缺失整合现象。
- 何泉陈兰英田小利赵淑华姜立群
- 关键词：转基因动物小鼠
- 人Calpain1与心脏结构蛋白的相互作用被引量：2
- 2005年
- 为探讨人calpain1与心脏结构蛋白之间的相互作用 ,采用酵母双杂交体系筛选与人calpain1大亚基相互作用的蛋白质 ,通过DNA序列测定及BLAST分析同源性 ,获得了阳性克隆 12 (pACT2 12 ) ,16 (pACT2 16 ) ,2 2 (pACT2 2 2 )和 37(pACT2 37)等 .12和 2 2分别与人心脏α肌动蛋白 (humancardiacmusclealpha actin ,ACTC)有 99%和 10 0 %同源性 .16和 37分别与人心脏的肌球蛋白结合蛋白C(humancardiacmyosin bindingproteinC ,MYBPC3)和人α2 辅肌动蛋白 (humancardiacalpha 2actinin ,ACTN2 )有 10 0 %同源性 .这些阳性克隆均属于心脏中心肌细胞的结构蛋白 ,参与心肌细胞的收缩运动 .为鉴定calpain1大亚基的哪些结构域可能参与这些相互作用 ,阳性克隆再分别与含有人calpain1大亚基结构域Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的诱饵质粒共同转化AH10 9进行酵母双杂交 ,发现pACT2 12(ACTC)和pACT2 16 (MYBPC3)均能与全长人calpain1大亚基的结构域Ⅱ和Ⅲ相互作用 ;pACT2 16(MYBPC3)还能与大亚基的结构域Ⅳ作用 ;而pACT2 37(ACTN)虽能与全长人calpain1大亚基作用 ,却不与其单独的结构域Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ发生作用 .定量分析阳性克隆与人calpain1大亚基作用的强弱的结果显示 ,pACT2 12、16或 37分别与诱饵质粒pGBKT7 CANP共同转化AH10
- 姜立群崔传珏温绍君陈兰英
- 关键词：酵母双杂交
- 筛选转基因动物的新方法——PCR及其产物测序法被引量：3
- 1997年
- 用特异性引物对肌球蛋白轻链 2启动子 (myosinlightchain 2 ,MLC2 ) 糜酶融合基因的转基因新生鼠鼠尾DNA进行PCR筛选 ,低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性样品PCR所扩出的DNA条带 ,纯化后用同一对引物中的一个进行单引物PCR测序 ,与所转外源基因序列比较 ,进一步确定整合有外源基因的阳性鼠 .PCR及PCR产物测序法检测转基因动物具有操作方便 。
- 何泉李鹏姜立群陈兰英
- 关键词：基因工程转基因动物聚合酶链反应测序法
- 人肾素转基因小鼠的建立
- 2002年
- 为研究人肾素基因在体内的功能和建立其药物干预实验的动物模型 ,采用显微注射法 ,将纯化的人肾素基因导入小鼠受精卵 ,再培育成转基因小鼠 .通过DIGDNA印迹和PCR分析 ,进行转基因整合检测 .在出生的 13只子代鼠中 ,得到一只转基因阳性鼠 .整合率为 7 7% ,有效率 0 3% ,转基因已稳定传代 .RT PCR显示转基因阳性鼠的肾、心和肺组织中有肾素基因表达 ,而在肝脏与骨骼肌中则未检测到 .阳性鼠血浆肾素活性较对照鼠明显升高 ,而肾与心脏组织的肾素活性则无明显变化 .
- 陈兰英姜立群刘嘉莉苏雪峰方福德陈永福
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应地高辛显微注射动物模型转基因小鼠
